El uso rápido de exploración voltametría cíclica para medir la dinámica evocada eléctricamente presináptica de dopamina estriatal en rodajas de cerebro.
Una amplia investigación se ha centrado en el neurotransmisor dopamina debido a su importancia en el mecanismo de acción de las drogas de abuso (cocaína y anfetaminas, por ejemplo), el papel que desempeña en las enfermedades psiquiátricas (esquizofrenia, por ejemplo, y déficit de atención e hiperactividad), y su participación en degenerativos trastornos como el Parkinson y la enfermedad de Huntington. En condiciones fisiológicas normales, la dopamina se sabe que regulan la actividad locomotora, la cognición, el aprendizaje, afecta emocional y la secreción de hormonas neuroendocrinas. Una de las mayores densidades de las neuronas de dopamina en el estriado es, que se pueden dividir en dos regiones distintas neuroanatómicas conocida como el núcleo accumbens y el núcleo caudado putamen. El objetivo es ilustrar un protocolo general para la voltametría cíclica corte rápido escaneo (FSCV) en el cuerpo estriado del ratón. FSCV es una técnica bien definida electroquímico proporciona la oportunidad de medir la liberación de dopamina y la captación en tiempo real en discrete regiones del cerebro. Microelectrodos de fibra de carbono (diámetro de aproximadamente 7 micras) se utilizan en FSCV para detectar la oxidación de la dopamina. La ventaja de la utilización de análisis para detectar FSCV dopamina es su mejor resolución temporal de 100 milisegundos y una resolución espacial de menos de diez micras, proporciona información complementaria a la microdiálisis in vivo.
El protocolo que aquí se presenta muestra cómo preparar y usar rodajas de cerebro de ratón coronal para experimentos FSCV. Aunque este método es específico para la obtención y medición de la dinámica de la dopamina, neurotransmisores tales como la adenosina, el peróxido de hidrógeno, norepinefrina y serotonina han sido controlados en vivo o in vitro con FSCV 3, 8 – 11. FSCV se puede utilizar para controlar algunos de estos neuroquímicos otras modificaciones simples de la forma de …
The authors have nothing to disclose.
Financiamiento proporcionado por el Instituto Nacional sobre el Abuso de Alcohol y Alcoholismo (NIAAA, AA-016967 y AA016967 01S1; TAM), Wayne State University en marcha los fondos, y Wayne State University Programa de Becas de Investigación. El contenido es responsabilidad exclusiva de sus autores y no representan la opinión oficial del NIAAA y los Institutos Nacionales de Salud.
Name | Company | CAS number |
Reagent |
||
Potassium Chloride |
Fisher | 7447407 |
Sodium chloride |
EMD Chemicals | 7647145 |
Magnesium chloride |
Fisher |
7791186 |
Calcium chloride |
Fisher |
10035048 |
Sodium bicarbonate |
EMD Chemicals |
144558 |
Sodium phosphate,Dibasic |
EMD Chemicals |
7558794 |
D-glucose |
Fisher |
50997 |
Ascorbic acid |
Fisher |
50817 |
Sucrose |
Fisher |
57501 |
|
|
|
Materials |
Vendor |
Catalogue number |
Carbon fiber |
Goodfellow Oakdale, PA | |
Glass capillary |
A-M Systems Carlsborg WA. | 602000 |
Silver wire |
A-M Systems Carlsborg WA. | 787000 |
Tungsten stimulating electrode |
Plastics One, Roanoke, VA | |
Platinum wire |
||
Lead wire |
Squires Electronics, Cornelius, OR | |
Loctite 404 instant adhesive |
Hankal Corp. Rocky Hill CT. |
|
Razor blade |
World precision Instruments Inc. FL. | |
BD Spinal needle |
BD Medical systems, Franlin Lake, NJ |
REF 405234 |
Surgical Blade |
Feather Safety razor Co. LTD. Japan | |
|
||
Software |
Vendor |
Catalogue number |
TH software |
ESA Inc.,Chelmsford, MA | |
Instrument |
Vendor |
Catalogue number |
Submersion recording chamber |
Custom Scientific, Denver, CO | |
Neorolog stimulus isolator |
Digitmeter, Hertfordshire, England | |
Automatic temperature controller |
Warner Instrument Corporation | |
Microscope (SZX7) |
Olympus | |
Microscope |
Fisher | |
Vibratome 3000 sectioning system |
St. Louis , MO. | |
Perfusion pump |
Watson Marlow Limited, Falmouth Cornwall – England | H110708 |
Micropipette puller |
Narishige, Tokyo, Japan | |
ChemClamp potentiostat |
Dagan Corporations, Minneapolis, MN. |