1. पशु के लिए परिणाम के नीचे की सूचना दी, तीन C57BL/6J चूहों और चार B6.V – एलईपी ओब / जम्मू चूहों जैक्सन प्रयोगशालाओं (बार हार्बर, में, संयुक्त राज्य अमेरिका) से प्राप्त किया गया. B6.V एलईपी / ओब जम्मू चूहों मोटापे की जल्द से जल्द मॉडल का प्रतिनिधित्व करते हैं और सक्रिय रूप से शोध रहते हैं. B6.V एलईपी / ओब जम्मू चूहों एक वृद्धि वसाकोशिका आकार और संख्या के द्वारा विशेषता phenotype के प्रदर्शन और जंगली प्रकार के चूहों की तुलना में तीन गुना अधिक वजन कर सकते हैं 7,8 यहाँ B6.V एलईपी / ओब जम्मू चूहों को एक सकारात्मक रूप में कार्यरत थे. सीटी आधारित वसा सामग्री मापन के लिए Albira सीटी सिस्टम की व्यवहार्यता का वर्णन एक मोटे phenotype के लिए नियंत्रण. इमेजिंग प्रदर्शन किया था जब पशुओं लगभग 12 सप्ताह की उम्र तक पहुँच. (B6.V एलईपी / ओब जम्मू चूहों में मोटापा उम्र के 4 हफ्तों के बाद प्रकट होता है). चूहे Isofluorane (2.5% प्रवाह की दर) के द्वारा संवेदनाहृत थे और इमेजिंग के लिए एक सेटअप नाक शंकु के माध्यम से 2.5% के अंतर्गत रखा. एकimals Albira छवि स्टेशन से आपूर्ति में मानक चूहा बिस्तर (M2M इमेजिंग इंक क्लीवलैंड, ओह) में प्रवण तैनात थे. अंग एक वर्दी सीटी अधिग्रहण के लिए धड़ से पार्श्व तैनात थे. छवि अधिग्रहण के बाद पूरा किया गया, चूहों नाक शंकु से हटा दिया गया है और चल जब तक वसूली पिंजरे में लौट आए. 2. छवि अधिग्रहण और पुनर्निर्माण छवि अधिग्रहण Albira सीटी सिस्टम (Carestream आण्विक इमेजिंग, वुडब्रिज, सीटी) का उपयोग करते हुए प्रदर्शन कर रहे हैं. चूहे Isofluorane (2.5% प्रवाह की दर) के द्वारा संवेदनाहृत थे और इमेजिंग के लिए एक सेटअप नाक शंकु के माध्यम से 2.5% के अंतर्गत रखा. अधिग्रहण के लिए 115 मिमी लंबाई की एक बिस्तर स्कैन 600 अनुमानों का उपयोग कर प्रदर्शन किया गया. स्रोत एक्स – रे 200 μA और 45 केवीपी की वोल्टेज के एक वर्तमान के लिए स्थापित किया गया था, और कठोर बीम के लिए एक 0.5 मिमी अल फिल्टर का इस्तेमाल किया. सीटी सेटिंग्स के लिए लगभग विकिरण गहरी खुराक के बराबर 220 mSv था, और उथले खुराक बराबर 357.4 mSv था. इनमात्रा 20 गुना कम से रिपोर्ट LD50 मूल्यों से अधिक कर रहे हैं 9. छवियाँ Albira सुइट 5.0 Reconstructor के माध्यम से खरीदे गए विदेशी बिल (छनित वापस प्रोजेक्शन) कलन विधि का उपयोग कर "मानक" पैरामीटर का उपयोग खंगाला जाता है. ये संयुक्त अधिग्रहण और पुनर्निर्माण सेटिंग्स 125 माइक्रोन isotropic voxels साथ एक अंतिम छवि उत्पादन, पूरे पशु विश्लेषण के लिए पर्याप्त समझा. विस्तृत क्षेत्र विशिष्ट विश्लेषण के लिए, 35 माइक्रोन isotropic voxels साथ पुनर्निर्माण के 90 माइक्रोन का एक अंतिम समाधान के लिए चुना जा सकता है. 3. छवि विश्लेषण छवि विश्लेषण PMOD (PMOD टेक्नोलॉजीज लिमिटेड, ज्यूरिख, स्विट्जरलैंड) विश्लेषण सॉफ्टवेयर का उपयोग किया जाता है. छवियाँ PMOD में कुल मात्रा के लिए घनत्व पहले ऊतक और वसा की मात्रा के लिए अनुसार खंडित होते हैं. कम्प्यूटेशनल मांगों को कम 3.1 छवियाँ विश्लेषण के लिए कम किया जा सकता है. को कम करने के लिए, मुख्य दृश्य टैब पर नेविगेट. </ली> उपकरण का चयन करें> में कमी. 2 से एक्स का चयन करें, 2 से वाई, और 2 से Z. बदलें की जाँच करें. चलाएँ का चयन करें. संदेश: "bounding बॉक्स बदल जाएगा" प्रदर्शित करता है एक बार कमी पूरा हो गया है. 3.2 छवियाँ बाद विश्लेषण मात्रा की ब्याज (Voi) के लिए बिस्तर और नाक शंकु तत्वों को खत्म करने के लिए नकाबपोश जा सकता है. मुखौटा करने के लिए, विमान नेविगेट करने के लिए, लेआउट, घुमाव, मिरर, 3 डी मार्करों> विमानों और लेआउट. चयन नक्शा विमान जेड. जेड विमान में नाक शंकु के लिए स्क्रॉल. मुख्य Voi टैब का चयन करें> कोने ड्रा. पशु (आरओआई) ब्याज की एक क्षेत्र के आसपास ड्रा नाक – बिस्तर और नाक शंकु को छोड़कर. चयनवास्तविक लागत पर लाभ की प्रतिलिपि बनाएँ. अगले टुकड़ा ले जाएँ, और पेस्ट बफर से नाक की प्रासंगिक विमानों के माध्यम से लागत पर लाभ. संपादित करें कोने के समूह का उपयोग करने के लिए आवश्यक के रूप में ROIs समायोजित. नाक शंकु परे पहले विमानों पर लागत पर लाभ हटाएँ का चयन करें. एक नया नाक शंकु परे पहले विमानों पर पशु परिधि (पशु बिस्तर को छोड़कर) का धरना Voi उत्पन्न करता है. Voi उपकरण> मास्किंग और बीजगणित के लिए नेविगेट. वार्ता दिए गए बॉक्स में दर्ज करें -1000. चयनित VOIs बटन बाहर मास्क voxels का चयन करें. संदेश: "अपरिवर्तनीय डेटा आपरेशन आप जारी रखना चाहते है?" प्रदर्शित करता है. हाँ का चयन करें. विमान के लिए नेविगेट करने के लिए, लेआउट, घुमाव, मिरर, 3 डी मार्करों> विमानों और लेटाओबहिष्कार. सभी विमानों दिखाएँ का चयन करें. अखंडता के लिए Voi जांच करते हैं. सहेजें का चयन करें. विश्लेषण के रूप में सहेजें. फ़ाइल नाम उपसर्ग बदलें. 3.3 पहले, खंड कुल जानवर मात्रा के लिए छवि: उपकरण> विदेश का चयन करें. विभाजन चेक बॉक्स का चयन करें. -300 के लिए पैंतीस सौ (घनत्व सीमा पेट वसा क्षेत्र घनत्व सीमा से व्युत्पन्न संदर्भ) की एक सीमा दर्ज करें. चुनें विभाजन भागो. विभाजन की अखंडता की जांच करते हैं. चयन ठीक है. आरओआई निकालें का चयन करें. Voi आँकड़े का चयन करें. रिपोर्टेड आँकड़े कुल मात्रा का प्रतिनिधित्व करते हैं. रिपोर्ट मात्रा रिकार्ड. </lमैं> 3.4 अगला खंड वसा की मात्रा के लिए छवि: गैर वसा की मात्रा विभाजन के लिए खंडों नकाबपोश छवि पर लौटें. को बचाया नकाबपोश डेटा फ़ाइल लोड करने के लिए, बॉक्स में लोड खिड़की विश्लेषण की जांच करने के लिए). उपकरण> विदेश का चयन करें. विभाजन चेक बॉक्स का चयन करें. -200 की एक श्रृंखला -50 के लिए दर्ज करें. चुनें विभाजन भागो. विभाजन की अखंडता की जांच करते हैं. चयन ठीक है. Voi आँकड़े का चयन करें. रिपोर्ट आँकड़े वसा की मात्रा का प्रतिनिधित्व करते हैं. रिपोर्ट मात्रा रिकार्ड. सहेजें का चयन करें. विश्लेषण के रूप में सहेजें. फ़ाइल नाम उपसर्ग बदलें. <strong> वैकल्पिक: यदि त्वचा / परिधीय घनत्व रहता है, "क्षरण और फैलाव नीचे प्रोटोकॉल Voi विश्लेषण के लिए इन क्षेत्रों को समाप्त किया जा सकता है. उपकरण> विदेश का चयन करें. आकृति – मूलक चेक बॉक्स का चयन करें. Morphological दृश्य प्रदर्शित करता है. कटाव का चयन करें. चयन ठीक है. उपकरण> विदेश का चयन करें. आकृति – मूलक चेक बॉक्स का चयन करें. Morphological दृश्य प्रदर्शित करता है. फैलाव का चयन करें. चयन ठीक है. 4. सीटी छवियाँ की विज़ुअलाइज़ेशन 4.1 V3.2 VolView (Kitware, Clifton पार्क, न्यूयॉर्क, संयुक्त राज्य अमेरिका) के लिए प्रदान की गई खंडों छवियों के 3 डी दृश्य दिखाता है बनाने के लिए उपयोग किया गया था. <lमैं> सीटी विश्लेषण प्रारूप में निर्धारित डेटा को खोलें. पॉप – अप विंडो में डिफ़ॉल्ट सेटिंग्स का उपयोग करें. प्लग – इन्स मेनू खोलें. उपयोगिता के तहत, मर्ज संस्करणों का चयन करें. Rescale अवयव अनचेक करें. दूसरा इनपुट असाइन करें क्लिक करें. दूसरे इनपुट के लिए खंडों वसा डेटा चुनें. पॉप – अप विंडो में डिफ़ॉल्ट सेटिंग्स का उपयोग करें. प्लग में लागू करें क्लिक करें. डबल – क्लिक करें विषय माउस का एक बड़ा देखने के लिए वॉल्यूम दृश्य खिड़की. 4.2 / रंग अपारदर्शिता टैब पर लौटें. घटक बॉक्स ड्रॉप डाउन डेटा सेट जो वर्तमान में संपादित किया जा रहा करने के लिए संदर्भित करता है. दो स्लाइडर्स टैब के तल पर स्थित हैं और प्रत्येक घटक के डेटा उपरिशायी भीतर निर्धारित की रिश्तेदार चमक निर्धारित, 0 से 1 मूल्यों का उपयोग कर. एक घटक, वें के लिएई सीटी, हम एक रंग योजना स्केल का उपयोग करने के लिए पसंद करते हैं. रंग बदलने के लिए: अदिश रंग मानचित्रण अनुभाग में, एक रंग स्लाइडर्स पर डबल क्लिक करें. एक स्लाइडर को हटाने, यह बॉक्स से बाहर खींचें. एक नया स्लाइडर को जोड़ने के लिए, स्लाइडर क्षेत्र के भीतर कहीं भी क्लिक करें. Sliders के एक निकालें. बाईं रंग स्लाइडर काला (अदिश मूल्य (एस) -19,000 =) बनाओ. सही रंग स्लाइडर सफेद ((एस) = 15,000) बनाओ. अदिश अपारदर्शिता मानचित्रण बॉक्स से, बॉक्स में क्लिक करके एक नई बात पैदा करते हैं. इस विंडो में तीन अंक की कुल दे देंगे. मध्य बिंदु के लिए, -3000 ~ (एस), और अस्पष्टता (का.) मान 0. विंडो के दाएँ भाग में तीसरे बिंदु का चयन करें. +३२००० के बारे में (एस) बदलें, और <stronछ> .25 से हे. पहली बात छोड़ दिया पर कहीं भी हो, बस के रूप में लंबे समय के रूप में अस्पष्टता मूल्य 0 पर सेट है. दो घटक है, जो वसा की नज़र संपादित करना चाहिए करने के लिए बदलें. लाल डबल – क्लिक करके और ह्यू (एच) स्लाइडर फिसलने नक्शा झूठी रंग लाल करने के लिए वसा के लिए छोड़ दिया करने के लिए रंग sliders के प्रत्येक बदलें. बहुत छोटे और वसा के देखो को समायोजित करने की जरूरत किया जाना चाहिए. 4.3 एक रोटेशन तीन पैनल प्रदर्शित फिल्म सीटी, वसा, और उपरिशायी बनाने: क्लिक करें और खींचें आप का सामना करना पड़ के साथ वापस एक ईमानदार स्थिति में विषय माउस. घटक तौल के तहत, घटक के मूल्य निर्धारित करने के लिए दो 0 केवल सीटी स्कैन प्रदर्शित करने के लिए. > समीक्षा कैमरा क्लिक करें. फ्रेम के लिए एक नंबर का चयन करेंआर रोटेशन फिल्म (वर्तमान मामले के लिए, हम चुना "36"). एक्स रोटेशन 360 डिग्री के लिए मूल्य बदलें. बनाएँ का चयन करें. पॉप – अप संवाद बॉक्स में, एक नई सीटी नामक फ़ोल्डर बनाने के लिए, और झगड़ा प्रारूप में फाइल को बचाने, जो रोटेशन छवियों की एक श्रृंखला का उत्पादन होगा. वसा छवि के लिए यह कदम के रूप में अच्छी तरह से मढ़ा छवि / वसा सीटी के लिए दोहराएँ, उन्हें अलग – अलग फ़ोल्डर्स में प्रत्येक समय की बचत. 4.4 ImageJ ध् 1.43u एक रोटेशन फिल्म VolView उत्पादन छवियों का उपयोग कर फाइल उत्पन्न करने के लिए इस्तेमाल किया गया था. ImageJ में, फ़ाइल आयात> छवि अनुक्रम का चयन करें. सीटी फ़ोल्डर में पहली छवि का चयन करें. सॉफ्टवेयर स्वचालित रूप से अन्य फ़ाइलों का पता लगाने और उन्हें एक ढेर के रूप में खोलने के. वसा और उपरिशायी दृश्यों को खोलने के लिए दोहराएँ. विश्लेषण के तहत आरओआई प्रबंधक खोलें> उपकरण> आरओआईप्रबंधक. विषय माउस के चारों ओर एक रॉय को छोड़कर अनावश्यक पृष्ठभूमि पिक्सल, ड्रा. आरओआई प्रबंधक, लागत पर लाभ को जोड़ने के लिए जोड़ें क्लिक करें. एक अलग छवि अनुक्रम का चयन करें. आरओआई प्रबंधक में, क्लिक करें यह तस्वीर करने के लिए लागू करने की लागत पर लाभ. इस फैशन में फसल के ढेर में से प्रत्येक को पूरी तरह से मैच होगा. जब लागत पर लाभ सभी के ढेर पर है, रॉय के भीतर राइट – क्लिक करें. डुप्लिकेट का चयन करें. छवि के बाकी हिस्सों से लागत पर लाभ को अलग डुप्लिकेट ढेर चेक बॉक्स का चयन करें. बड़ी छवि के ढेर बंद करें. तीनों छवि दृश्यों के लिए इस प्रक्रिया को दोहराएँ. जाओ छवि> ढेर> उपकरण> के ढेर के साथ गठबंधन का मिश्रण है. 1 ढेर के लिए सीटी का चयन करें. दो ढेर के लिए वसा का चयन करें. <li > दोहराएँ, और 1 ढेर और दो ढेर के लिए ओवरले के लिए संयुक्त ढेर का चयन करें. अब तीन पैनल, ढेर छवि रोटेशन कि पूर्वावलोकन छवि विंडो के निचले – बाएँ कोने में खेलने का चयन करके किया जा सकता है. एक AVI के रूप में फिल्म बचाने के लिए, फ़ाइल का चयन करें> के रूप में सहेजें … AVI के> … सहेजें पर क्लिक करें. 5. प्रतिनिधि परिणाम तीन WT (C57BL/6J) के चूहों और चार (B6.V एलईपी ओब / जम्मू) मोटे चूहों के लिए परिणाम यहाँ वसा / कुल मात्रा अनुपात Albira सीटी सिस्टम रोजगार माप का एक प्रतिनिधि उदाहरण के रूप में रिपोर्ट कर रहे हैं चित्रा 1 के एक प्रतिनिधि से नीचे प्रदान करता है. मोटे चूहों सीटी छवियों (यानी कुल मात्रा और वसा की मात्रा) के विभाजन के लिए दिखाने के V3.2 VolView के साथ बनाया गया है. / 0/3680fig1.jpg "> आकृति 1. प्रतिनिधि सीटी खंडों वसा के लिए (ए) स्केल में मोटापे से ग्रस्त माउस सीटी (B6.V एलईपी ओब / जम्मू) कुल मात्रा छवियों, (बी) लाल रंग में वसा की मात्रा, और (सी) छवि संलयन. (डी) WT माउस स्केल में (C57BL/6J) सीटी कुल मात्रा, (ई) लाल में वसा की मात्रा, और (एफ) छवि संलयन. कुल संस्करणों, वसा संस्करणों, और गणना वसा / कुल मात्रा अनुपात नीचे तालिका 1 में प्रत्येक WT माउस और प्रत्येक मोटापे से ग्रस्त माउस के लिए रिपोर्ट कर रहे हैं. औसत वसा / WT समूह और मोटापे से ग्रस्त समूह के लिए कुल मात्रा अनुपात 0.09 और 0.42 क्रमशः (चित्रा 2). वसा / मोटे चूहों बनाम WT चूहों के लिए कुल मात्रा के अनुपात में काफी अलग (पी 0.001 =) पाया गया. WT (C57BL/6J) कुल (3 सेमी) वसा (3 सेमी) वसा / कुल अनुपात मोटापे से ग्रस्त (B6.V एलईपी ओब <//> समर्थन) कुल (3 सेमी) वसा (3 सेमी) वसा / कुल अनुपात एक पशु 28.79 3.00 0.10 एक पशु 66.25 26.75 0.40 दो पशु 33.25 3.05 0.09 दो पशु 61.15 26.31 0.43 तीन पशु 30.30 2.63 0.09 तीन पशु 64.19 25.7 0.40 4 पशु 54.25 23.78 0.44 तालिका 1. कुल मात्रा, वसा की मात्रा,और वसा / WT और मोटापे से ग्रस्त चूहों के लिए कुल मात्रा के अनुपात में कुल और वसा संस्करणों. खंडों PMOD Voi विश्लेषण छवियों का उपयोग कर से प्राप्त किए गए. चित्रा 2. वसा / मोटे चूहों बनाम WT चूहों के लिए कुल मात्रा के अनुपात में औसत. औसत / वसा कुल मात्रा के लिए डब्ल्यूटी (C57BL/6J) के और मोटे (B6.V एलईपी ओब / जम्मू) अनुपात क्रमश: 0.09 और 0.42 प्रदर्शित कर रहे हैं पाया. (त्रुटि पट्टियाँ = एक मानक विचलन). WT मोटापे से ग्रस्त / वसा कुल मात्रा अनुपात की तुलना में काफी अलग (पी = मूल्य 0.001) पाए गए.