L'uso di cistometria in piccoli roditori: A Study of Chemosensation vescica
Summary
Cistometria è una tecnica efficace per misurare la funzione della vescica di piccoli animali<em> In vivo</em>. La vescica è continuamente infuso a velocità controllate tramite un catetere intravescicale, mentre l'uretra viene lasciata libera per la minzione. Questo permette ripetitiva riempimento e lo svuotamento della vescica, mentre la pressione intravescicale e volume annullato vengono registrati.
Abstract
<p class="jove_content"> Le basse vie urinarie (LUT) funge da serbatoio dinamica che è in grado di immagazzinare l'urina e di espellere efficacemente in un momento opportuno. Durante la memorizzazione urine, tuttavia, la vescica è esposto per periodi prolungati di prodotti di scarto. Agendo come una barriera a tenuta, il rivestimento epiteliale LUT, dell'urotelio, evita il riassorbimento di sostanze nocive. Inoltre, le sostanze chimiche nocive stimolare innervazione nocicettiva della vescica e di avviare annullare contrazioni che espellere il contenuto della vescica. È interessante notare che la sensibilità della vescica a sostanze chimiche nocive è stato utilizzato con successo nella pratica clinica, per via endovescicale infondendo il TRPV1 capsaicina agonista per il trattamento della vescica neurogena iperattività<sup> 1</sup>. Ciò sottolinea il vantaggio di vedere la vescica come un organo chemiosensoriali e richiede ulteriori ricerche cliniche. Tuttavia, le questioni etiche limitano fortemente la possibilità di eseguire, su soggetti umani, le misure invasive che sono necessarie per svelare le basi molecolari della LUT farmacologia clinica. Un modo per superare questa limitazione è l'uso di modelli animali<sup> 2</sup>. Qui si descrive l'implementazione di cistometria in topi e ratti, una tecnica che permette di misurare la pressione intravescicale in condizioni di perfusione vescica controllata.</p><p class="jove_content"> Dopo laparotomia, un catetere viene impiantato nella cupola vescica e tunnel per via sottocutanea nella regione interscapolare. Quindi la vescica può essere riempito a velocità controllata, mentre l'uretra è lasciato libero per minzione. Durante i cicli ripetitivi di riempimento e svuotamento, la pressione intravescicale può essere misurata tramite il catetere impiantato. Come tale, le variazioni di pressione possono essere quantificati e analizzati. Inoltre, la misurazione simultanea del volume consente di distinguere le contrazioni annullata svuotamento di non svuotamento contrazioni<sup> 3</sup>.</p><p class="jove_content"> Importante, a causa delle differenze di controllo della minzione tra roditori ed esseri umani, misurazioni cistometrici in questi animali hanno un limitato valore traslazionale<sup> 4</sup>. Tuttavia, sono abbastanza strumentale nello studio della fisiopatologia vescica e farmacologia sperimentali pre-clinici impostazioni. Recenti ricerche utilizzando questa tecnica ha rivelato il ruolo chiave di nuovi attori molecolari nelle proprietà meccano-e chemo-sensoriali della vescica.</p
Protocol
1. Animali da laboratorio Animali (topi, ratti) sono alloggiati in una struttura specializzata animale con un 12-hr ciclo luce-buio e ad libitum accesso all'acqua e pellet cibo standard. Sia l'età e il sesso degli animali sono parametri importanti che dovrebbero essere standardizzate in base alle esigenze. Noi di solito eseguire cistometria in 10 – 12 settimana animali vecchi femmine 5,6. Tutti gli esperimenti sugli animali siano effettuati in conformità con le linee gu…
Discussion
La tecnica qui presentata cistometria permette di effettuare misure in vivo della funzione della vescica in modelli animali. I ratti sono probabilmente il modello animale più utilizzato. I topi sono più difficili da gestire, ma offrono il vantaggio di utilizzare animali geneticamente manipolati. A causa della difficoltà tecnica di utilizzare topi coscienti, che tendono ad essere molto attivo con conseguente allentamento del catetere impiantato e variazioni delle pressioni intra-addominale che possono influen…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Questo lavoro è stato supportato anche da finanziamenti del governo federale belga (IUAP P6/28), la Fondazione-Fiandre (FWO) (G.0565.07 e G.0686.09), la ricerca europea Astellas Foundation Award 2009 e il Consiglio di ricerca del KU Leuven (GOA 2009/07, e EF/95/010 PFV/10/006). PU e NOI siamo dottorandi della Research Foundation-Fiandre (FWO). MB è un borsista Marie Curie. DDR un fondamentale-clinica collega del FWO.
Materials
| Name of the reagent | Commercial name, company, | Catalogue number | Comments |
| urethane | Urethane, Sigma-Aldrich | 315419 | group 2B carcinogen |
| isoflurane | Isoba, Schering-Plough Animal Health | ||
| polyethylene catheter | Intramedic Polyethylene tubing PE50, Becton Dickinson | 427411 | |
| surgical microscope | Op-Mi 6, Carl Zeiss | Op-Mi 6 | |
| purse-string suture | Prolene 6/0, Ethicon | 8610H | |
| fascia and skin suture | Ethilon 4/0 or 5/0, Ethicon | 662G or 661G | |
| postoperative analgesics | Temgesic, Schering-Plough Animal Health | dosage for rats: 0.05 mg/kg | |
| amplifier | 78534c monitor, Hewlett Packard | ||
| analytical balances and balance data acquisition software | FZ 300i, A&D | FZ-300i | |
| infusion pumps | pump 33, Harvard apparatus | HA33 | |
| cystometry recording system | Dataq instruments, DI-730 series and Windaq/Lite | DI-730-USB Windaq/Lite | |
| temperature registration | Fluke 52 KJ thermometer | 52 KJ | |
| pressure transducers | Edwards Lifesciences, pressure monitoring set | T322247A |
References
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Cite This Article
Uvin, P., Everaerts, W., Pinto, S., Alpízar, Y. A., Boudes, M., Gevaert, T., Voets, T., Nilius, B., Talavera, K., De Ridder, D. The Use of Cystometry in Small Rodents: A Study of Bladder Chemosensation. J. Vis. Exp. (66), e3869, doi:10.3791/3869 (2012).