Förbättra vår förståelse och vår förmåga att hantera många av de kryp-överförda växtvirus kräver användning av vektorn. Insect överföring av växtvirus är en tritrophic interaktion, och som sådan kräver manipulation av insekter, virus och växtprodukter. Vektorer skall födas upp i stort antal och manipuleras på ett sådant sätt att försäkra höga överföring till testplantorna. Grunderna i uppfödning och manipulera whitefly,<em> Bemisa tabaci</em> (<em> Hemiptera: Aleyrodidae</em>), Är en vektor av växtvirus tillhör flera framväxande växtvirus släkten, som representerar ett stort antal ekonomiskt betydelsefulla virus presenteras.
Vita flygare, Hemiptera: Aleyrodidae, Bemisia tabaci, ett komplex av morfologiskt indistinquishable arter 5, är vektorer för många växt-virus. Flera släkten av dessa whitefly-sända växtvirus (Begomovirus, Carlavirus, Crinivirus, Ipomovirus, Torradovirus) omfattar flera hundra arter av framväxande och ekonomiskt betydelsefulla patogener av viktiga livsmedel och grödor fiber (granskad av 9,10,16). Dessa virus inte replikeras i sin vektor men ändå flyttas lätt från anläggning till anläggning av den vuxna whitefly på olika sätt (granskad av 2,6,7,9,10,11,17). För de flesta av dessa virus whitefly utfodring krävs för förvärv och ympning, medan det för andra endast sondering krävs. Många av dessa virus inte kan eller kan inte lätt överföras på annat sätt. Därför kan underhåll av viruskulturer, biologiska och molekylär karakterisering (identifiera värdområde och symtom) 3,13, Ekologi 2,12, kräva att virus överförs till experimentella värdar via whitefly vektor. Utöver utvecklingen av nya metoder inom företagsledning, som utvärdering av nya kemikalier 14 eller föreningar 15, nya kulturella synsätt 1,4,19, eller urval och utveckling av resistenta sorter 7,8,18, kräver användning av vita flygare för virus transmission. Användningen av vita flygare överföring av växtvirus för urval och utveckling av resistenta sorter i avelsprogram är speciellt utmanande 7. Effektiv selektion och screening för resistens utnyttjar ett stort antal växter och det finns ett behov av 100% av de växter som skall inokuleras för att finna de få genotyper som besitter resistensgener. Dessa studier använder mycket stora mängder viruliferous whiteflies, ofta flera gånger per år.
Whitefly underhåll beskrivs här kan generera hundratals eller tusentalsav vuxna vita flygare på växter varje vecka, året runt, utan förorening av andra vegetabiliska virus. Växter fria från både whiteflies och virus måste produceras för att införa i whitefly kolonin varje vecka. Whitefly kulturer måste hållas fria från vita flygare patogener, parasiter och parasiter som kan minska vita flygare populationer och / eller minska överföringen effektiviteten av viruset. Kolonier som producerats på det beskrivna sättet kan snabbt skalas för att öka eller minska invånarantal efter behov, och kan justeras för att rymma de utfodring preferenser whitefly baserade på växtvärden av viruset.
Det finns två grundläggande typer av vita flygare kolonier som kan underhållas: a nonviruliferous och en viruliferous whitefly koloni. Den nonviruliferous kolonin består av vita flygare som fötts upp på virusfria växter och låter den veckovisa tillgängligheten av vita flygare, som kan användas för att överföra virus från olika kulturer. Den viruliferous whitefly koloni,består av vita flygare som fötts upp på virus-infekterade växter, gör veckovis tillgängligheten av vita flygare som har förvärvat viruset därmed utelämna ett steg i viruset transmissionsmekanismen.
De metoder som beskrivs här har utvecklats under en period av två decennier och är baserade på den grundläggande information som många studier av vita flygare transmission, beteende och biologi. Eftersom det finns många publikationer, refererar detta manuskript främst recensioner och några utvalda särskilda publikationer för att illustrera vilken typ av data som används för att utveckla denna teknik. Det är mycket viktigt i detta förfarande att whiteflies hanteras varsamt eftersom bryta av ben och antenner kan leda till onormala beteenden och lägre överföring. Samling med dammsugare och andra mekaniska anordningar sug har aldrig gett goda resultat. En annan faktor för framgång är att antalet vita flygare används för att erhålla 100% transmission till testplantor skall bestämmas för varje kombination av växtvärd och virus. Denna optimala förhållandet behöver endast fastställas en gång. Bästa resultat har erhållits med användning av unga vuxna vita flygare (1-3 dagar efter uppkomst) eftersom de give de högsta nivåerna av transmissionen. Äldre vuxna kan användas utan större antal whiteflies kommer att behövas för att kompensera för sina reducerade överföring. Honorna är kända för att sända till högre priser än män, eftersom de äter oftare än män. Det är dock oftast inte värt mödan att separera könen för sändning. Detta förfarande kan modifieras på många olika sätt för att passa de resurser och behov av forskaren.
När du arbetar med flera virus är det bäst att hålla en enda koloni av whiteflies uppfödda på nonhost växter av viruset. Dessa whiteflies kan hämtas ut på virus-infekterade växter för förvärv och sedan efter förvärven whiteflies kan flyttas igen till testplantorna. Växter avsedda för kolonin bör odlas i växthus i burar för att förhindra införsel av vita flygare som kan infektera dem med ett annat virus. Angrepp av dessa anläggningar med kvalster, trips och andra växtskadegörare kan äventyra health av kolonin och få den att kollapsa. Slutligen vattning av kolonin växter måste göras med försiktighet. Dessa anläggningar är föremål för extrem stress genom att utfodra så många whiteflies och lägre än normala ljusförhållanden. Root ruttnande svampar som införs på torv i soilless mixar kan bli ett problem om växterna overwatered ännu en gång. Förbehandling av plantorna med en fungicid dränka kan eliminera några av problemen.
Medan whitefly överföring av växtvirus kan vara tidskrävande och kräver värdefulla resurser (såsom tillväxtfaktorer rum) är det viktigt för överföring av vissa virus som vi inte har några andra överföringssätt. Det är också ett värdefullt sätt att sorteringsanläggning för resistens mot virus, eftersom den använder samma typ av transmission som växter i området förväntas motstå. Användningen av mer artificiella medel för överföring inte alltid ger de bästa resultaten i utvärderingar av arvsmassa för Virus-motstånd.
The authors have nothing to disclose.
Name of the Item | Company | Catalogue No. | Comments (optional) |
Whitefly proof screening | Klayman Meteor Ltd. Petah Tikva 49130, Israel | — | BioNet 50 mesh screen Antivirus Insect Screen |
Whitefly proof screening | Hummert International (www.hummert.com) | 27-4050-1 – 27-4062-1 | BioNet 50 mesh screen Antivirus Insect Screen |
Whitefly Collection Devices | BioQuip | 1135A | Can also be made using eye droppers, flexible plastic tubing, plastic vacuum adaptors, and cheesecloth |
Collection vials | BioQuip | 8909 | Vials used depend on which aspirator is used. |
Yellow plastic cards | any company | — | Any bright yellow plastic card will work, can be purchased in many places. |
Whitefly Cages | — | — | These are not commercially available and must be constructed. 60 cm x 60 cm x 60 cm cages work well for us. Our preference is for those constructed of aluminum window screening, nylon organdy, vinyl plastic, with a structure created using aluminum window frames. Doors are attached using piano hinges and sealed with weather stripping; tops of the cages are vinyl plastic. Cages can also be made of 1) plexiglass glued together on the edges with ventilation provided by screened openings cut on the side pieces; 2) large bags of nylon organdy, organza, or 50 mesh whitefly screening with internal supports provided by PVC pipes and fittings cut to desired lengths and assembled inside the bags, 3) wood frames and nylon organdy, organza, or 50 mesh whitefly screening. |