Beter inzicht in en ons vermogen om veel van de insecten overgedragen plantenvirussen beheerder vereist het gebruik van de vector. Insect overdracht van plantenvirussen is een tritrofe interactie, en als zodanig vereist het manipuleren van insecten, virussen, en plant. Vectoren worden gekweekt in grote aantallen en gemanipuleerd op zodanige wijze dat een hoge mate van overdracht op testplanten verzekeren. De basisprincipes van het houden van en het manipuleren van de witte vlieg,<em> Bemisa tabaci</em> (<em> Hemiptera: Aleyrodidae</em>), Wordt een vector van plantaardige virussen behorend tot verschillende opkomende planten virus geslachten, wat neerkomt op een groot aantal economisch belangrijke virussen gepresenteerd.
Wittevlieg, Hemiptera: Aleyrodidae, Bemisia tabaci, een complex van morfologisch indistinquishable soorten 5, zijn vectoren van veel plant-virussen. Verschillende genera van deze witte vlieg-overgebrachte plantenvirussen (Begomovirus, carlavirus, Crinivirus, Ipomovirus, Torradovirus) zijn enkele honderden soorten van opkomende en economisch belangrijke pathogenen van belangrijke voedsel-en vezelgewassen (beoordeeld door 9,10,16). Deze virussen niet repliceren in hun vector, maar toch worden gemakkelijk verplaatst van plant tot plant door de volwassen wittevlieg met verschillende middelen (beoordeeld door 2,6,7,9,10,11,17). Voor de meeste van deze virussen witte vlieg voeding vereist voor het verkrijgen en inoculatie, terwijl voor andere slechts sonderen vereist. Veel van deze virussen kunnen of kunnen niet gemakkelijk worden overgebracht door andere middelen. Daarom houden van het virus culturen, biologische en moleculaire karakterisering (identificatie van gastheer bereik en symptomen) 3,13, Ecologie 2,12, vereisen dat de virussen om experimentele hosts met behulp van de witte vlieg vector worden overgedragen. Naast de ontwikkeling van nieuwe benaderingen voor het beheer, zoals de evaluatie van nieuwe chemische verbindingen 14 of 15, nieuwe culturele benaderingen 1,4,19, of de selectie en ontwikkeling van resistente cultivars 7,8,18, vereist het gebruik van wittevlieg voor virusoverdracht. Het gebruik van witte vlieg overdracht van plantenvirussen voor de selectie en ontwikkeling van resistente cultivars in fokprogramma's is bijzonder uitdagend 7. Effectieve selectie en screening op resistentie telt grote aantallen planten en er is behoefte aan 100% van de planten geënt om het aantal genotypes die resistentiegenen bezitten voorbeeld. Deze studies maken gebruik van zeer grote aantallen viruliferous witte vliegen, vaak meerdere keren per jaar.
Wittevlieg onderhoud hier beschreven kan honderden of duizenden genererenvan de volwassen wittevlieg op planten per week, het hele jaar door, zonder de besmetting van andere plantaardige virussen. Planten vrij zijn van zowel wittevlieg en virus moet worden geproduceerd om in de witte vlieg kolonie elke week. Wittevlieg culturen moet vrij zijn van witte vlieg pathogenen, parasieten, en parasitoiden dat wittevliegpopulatie en / kan verminderen of verminderen van de transmissie-efficiëntie van het virus worden bewaard. Kolonies die in de beschreven wijze snel worden opgeschaald getallen populatie nodig verhogen of verlagen, en kan worden aangepast aan het toevoeren voorkeuren van de witte vlieg gebaseerd op de plant samen met het virus tegemoet.
Er zijn twee basistypen van wittevlieg kolonies die kunnen worden gehandhaafd: een nonviruliferous en een viruliferous wittevlieg kolonie. De nonviruliferous kolonie bestaat uit witte vliegen grootgebracht virusvrije planten en kan de wekelijkse beschikbaarheid wittevlieg die kunnen worden gebruikt om virussen te brengen van verschillende culturen. De viruliferous wittevlieg kolonie,samengesteld wittevlieg grootgebracht virus-geïnfecteerde planten kan wekelijks beschikbaarheid witte vliegen die het virus verkregen waardoor het overslaan van een stap in het virus transmissieproces.
De hier beschreven methoden ontwikkeld gedurende twee decennia en zijn gebaseerd op de fundamentele informatie van vele studies witte vlieg transmissie, gedrag en biologie. Aangezien er vele publicaties, dit manuscript vooral betrekking reviews en een aantal geselecteerde specifieke publicaties het type gegevens gebruikt voor ontwikkeling van deze techniek illustreren. Het is hierbij van groot belang dat de procedure wittevliegen zachtjes sinds breken van poten en antennes worden behandeld kan leiden tot abnormaal gedrag en lagere transmissie. Collectie met stofzuigers en andere mechanische afzuiginrichtingen heeft nooit goede resultaten opgeleverd. Een andere overweging voor succes is dat het aantal wittevliegen gebruikt om 100% transmissie te testen planten te verkrijgen, moet worden vastgesteld voor elke combinatie van de waardplant en virussen. Deze optimale verhouding hoeft maar een keer te worden vastgesteld. De beste resultaten werden verkregen met behulp van jonge volwassen witte vliegen (1-3 dagen na opkomst) omdat ze giive de hoogste tarieven van de transmissie. Oudere volwassenen kan worden gebruikt, maar grotere aantallen wittevlieg nodig zal zijn om te compenseren voor hun verlaagde tarieven van overdracht. Vrouwtjes zijn gekend om te zenden tegen hogere tarieven dan mannen, omdat ze zich voeden vaker dan mannen. Het is echter meestal niet de moeite waard de tijd om de seksen voor transmissie wordt gescheiden. Deze procedure kan worden aangepast op vele manieren om de middelen en behoeften van de onderzoeker te passen.
Bij het werken met meerdere virussen is het het beste om een enkele kolonie van wittevlieg gefokt op nonhost planten van het virus te houden. Deze witte vliegen kunnen geplaatst op virus-geïnfecteerde planten voor overname worden verzameld en vervolgens na de overname van de wittevlieg weer kan worden verplaatst naar de test planten. Planten bestemd voor de kolonie worden gekweekt in kassen in kooien om de invoering van witte vliegen die hen zouden kunnen besmetten met een virus te voorkomen. Aantasting van deze planten met mijten, trips en andere plantenziekten kunnen compromitteren de health van de kolonie en veroorzaken in te storten. Eindelijk besproeien van de kolonie planten moet worden gedaan met zorg. Deze planten zijn onderhevig aan extreme stress door het voederen van zoveel wittevlieg en de lager dan normale lichtomstandigheden. Root rottende schimmels die worden ingevoerd op het veen in de grondloze mixen kan een probleem worden als de planten zijn zelfs een keer overwatered. Voorbehandeling van de planten met een fungicide doordrenken kan sommige van de problemen te elimineren.
Terwijl wittevlieg overdracht van plantenvirussen kan tijdrovend zijn en vereisen kostbare hulpbronnen (zoals groei kamers) is het essentieel voor de overdracht van sommige virussen waarvoor we geen andere middelen van overdracht. Het is het een belangrijk hulpmiddel voor het screenen planten op resistentie tegen virussen, omdat het gebruik maakt van dezelfde soort transmissie die planten in het veld wordt verwacht te weerstaan. Het gebruik van meer kunstmatige middelen van overdracht niet altijd de beste resultaten opleveren in evaluaties van kiemplasma voor Virus-resistentie.
The authors have nothing to disclose.
Name of the Item | Company | Catalogue No. | Comments (optional) |
Whitefly proof screening | Klayman Meteor Ltd. Petah Tikva 49130, Israel | — | BioNet 50 mesh screen Antivirus Insect Screen |
Whitefly proof screening | Hummert International (www.hummert.com) | 27-4050-1 – 27-4062-1 | BioNet 50 mesh screen Antivirus Insect Screen |
Whitefly Collection Devices | BioQuip | 1135A | Can also be made using eye droppers, flexible plastic tubing, plastic vacuum adaptors, and cheesecloth |
Collection vials | BioQuip | 8909 | Vials used depend on which aspirator is used. |
Yellow plastic cards | any company | — | Any bright yellow plastic card will work, can be purchased in many places. |
Whitefly Cages | — | — | These are not commercially available and must be constructed. 60 cm x 60 cm x 60 cm cages work well for us. Our preference is for those constructed of aluminum window screening, nylon organdy, vinyl plastic, with a structure created using aluminum window frames. Doors are attached using piano hinges and sealed with weather stripping; tops of the cages are vinyl plastic. Cages can also be made of 1) plexiglass glued together on the edges with ventilation provided by screened openings cut on the side pieces; 2) large bags of nylon organdy, organza, or 50 mesh whitefly screening with internal supports provided by PVC pipes and fittings cut to desired lengths and assembled inside the bags, 3) wood frames and nylon organdy, organza, or 50 mesh whitefly screening. |