Forbedring vores forståelse af og vores evne til at håndtere mange af de insekt-transmitterede plantevira kræver brug af vektoren. Insekt transmission af plantevirus er en tritrophic interaktion, og som sådan kræver manipulation af insekter, virus, og plante. Vektorer skal opdrættes i stort antal og manipuleret på en sådan måde, at forsikre høje transmission til forsøgsanlæg. Det grundlæggende i opdræt og manipulere whitefly,<em> Bemisa tabaci</em> (<em> Hemiptera: Aleyrodidae</em>) Er en vektor af plante vira tilhører flere spirende plante virus slægter, som repræsenterer et stort antal økonomisk vigtige vira præsenteres.
Whiteflies, Hemiptera: Aleyrodidae, Bemisia tabaci, et kompleks af morfologisk indistinquishable arter 5, er vektorer for mange plante virus. Adskillige slægter af disse whitefly-transmitterede plante virus (Begomovirus, Carlavirus, Crinivirus, Ipomovirus, Torradovirus) omfatte flere hundrede arter af nye og økonomisk betydning patogener af vigtige fødevarer og fiber afgrøder (gennemgået af 9,10,16). Disse vira replikeres ikke i deres vektor men alligevel flyttes let fra anlæg til anlæg af den voksne mellus ved forskellige midler (gennemgået af 2,6,7,9,10,11,17). For de fleste af disse vira whitefly fodring er nødvendig for erhvervelse og podning, mens det for andre kun sondering er påkrævet. Mange af disse vira er ude af stand til eller ikke kan let overføres på andre måder. Derfor vedligeholdelse af viruskulturer, biologiske og molekylær karakterisering (identifikation af værtsspektrum og symptomer) 3,13, Økologi 2,12 kræve, at de vira overføres til eksperimentelle værter ved hjælp af whitefly vektor. Desuden udvikling af nye metoder til ledelse, såsom evaluering af nye kemikalier 14 eller forbindelser 15, nye kulturelle tilgange 1,4,19, eller udvælgelse og udvikling af resistente sorter 7,8,18, kræver brug af whiteflies for virus transmission. Brugen af whitefly transmission af plantevirus for udvælgelse og udvikling af resistente sorter i avlsprogrammer er særligt udfordrende 7.. Effektiv udvælgelse og screening for resistens beskæftiger et stort antal af planter, og der er et behov for 100% af planterne, der skal podes, for at finde de få genotyper besidder resistensgener. Disse undersøgelser bruger et meget stort antal spiseligt virusinficeret whiteflies, ofte flere gange om året.
Whitefly vedligeholdelse er beskrevet her kan generere hundredvis eller tusindvisaf voksne whiteflies på planter hvert ugen, året rundt, uden forurening af andre vegetabilske virus. Planter fri for både whiteflies og virus skal fremlægges for indføre i whitefly koloni hver uge. Whitefly kulturer skal holdes fri for whitefly patogener, parasitter og parasitoider der kan reducere whitefly befolkninger og / eller mindske sendeeffektivitet virus. Kolonier fremstillet på den beskrevne måde kan hurtigt skaleres at øge eller mindske befolkningstal efter behov, og kan tilpasses de fodring præferencer mellus baseret på planten vært for virusset.
Der er to grundlæggende typer af whitefly kolonier, der kan vedligeholdes: a nonviruliferous og et spiseligt virusinficeret whitefly koloni. Den nonviruliferous koloni er sammensat af mellus opdrættet på virusfri planter og tillader den ugentlige tilgængelighed af mellus, som kan bruges til at overføre virus fra forskellige kulturer. Den spiseligt virusinficeret mellus koloni,sammensat af whiteflies opdrættet på virusinficerede planter, tillader ugentlig tilgængelighed af whiteflies der har erhvervet virus dermed udelade et skridt i virus transmission processen.
De her beskrevne metoder er udviklet over en periode på to årtier og er baseret på den grundlæggende oplysninger fra mange undersøgelser af whitefly transmission, adfærd og biologi. Da der er mange publikationer, dette manuskript menes primært vurderinger og få udvalgte specifikke publikationer til at illustrere den type data, der anvendes til at udvikle denne teknik. Det er meget vigtigt i denne procedure, at whiteflies håndteres forsigtigt, da bryde ben og antenner kan føre til unormal adfærd og lavere transmission. Samling med støvsuger og andre mekaniske sugeindretningerne har aldrig givet gode resultater. En anden overvejelse for succes er, at antallet af mellus anvendes til at opnå 100% transmission til testplanterne skal bestemmes for hver kombination af plante vært og virus. Denne optimale ratio skal kun etableres en gang. De bedste resultater er blevet opnået ved hjælp af unge voksne mellus (1-3 dage tidligere fremkomst), da de give de højeste satser for transmission. Ældre voksne kan bruges, men et større antal whiteflies vil være behov for at kompensere for deres nedsatte satser for transmission. Hunnerne er kendt for at overføre til højere satser end mænd, fordi de fodrer oftere end mænd. Men det er normalt ikke værd tid til at adskille de to køn til transmission. Denne procedure kan ændres på mange måder, der passer til de ressourcer og behov forskeren.
Når man arbejder med flere vira er det bedst at holde en enkelt koloni af mellus opdrættet på nonhost planter af viruset. Disse whiteflies kan indsamles placeres på virusinficerede planter til erhvervelse og derefter efter erhvervelsen de whiteflies kan flyttes igen til test anlæg. Planter til kolonien skal dyrkes i drivhuse i bure for at forhindre indførelse af whiteflies der kan inficere dem med en anden virus. Angreb af disse planter med mider, thrips og andre vegetabilske skadedyr kan kompromittere health af kolonien og få det til at kollapse. Endelig vanding af kolonien planter der skal gøres med omhu. Disse planter er udsat for ekstreme stress ved fodring af så mange whiteflies og de lavere end normale lysforhold. Root rådnende svampe, som bliver introduceret på tørv i soilless mix kan blive et problem hvis planterne overwatered endnu en gang. Forbehandling af planter med et fungicid gennembløde kan eliminere nogle af de problemer.
Mens whitefly transmission af plante vira kan være tidskrævende og kræver værdifulde ressourcer (såsom vækst værelser) det er afgørende for transmission af nogle vira, som vi ikke har andre midler til transmission. Det er også et værdifuldt middel til screening planter til resistens over for virus, som det anvender samme type transmission, at planter i marken forventes at modstå. Brugen af mere kunstige midler for transmission ikke altid give de bedste resultater i evalueringer af germplasma til Virus-modstand.
The authors have nothing to disclose.
Name of the Item | Company | Catalogue No. | Comments (optional) |
Whitefly proof screening | Klayman Meteor Ltd. Petah Tikva 49130, Israel | — | BioNet 50 mesh screen Antivirus Insect Screen |
Whitefly proof screening | Hummert International (www.hummert.com) | 27-4050-1 – 27-4062-1 | BioNet 50 mesh screen Antivirus Insect Screen |
Whitefly Collection Devices | BioQuip | 1135A | Can also be made using eye droppers, flexible plastic tubing, plastic vacuum adaptors, and cheesecloth |
Collection vials | BioQuip | 8909 | Vials used depend on which aspirator is used. |
Yellow plastic cards | any company | — | Any bright yellow plastic card will work, can be purchased in many places. |
Whitefly Cages | — | — | These are not commercially available and must be constructed. 60 cm x 60 cm x 60 cm cages work well for us. Our preference is for those constructed of aluminum window screening, nylon organdy, vinyl plastic, with a structure created using aluminum window frames. Doors are attached using piano hinges and sealed with weather stripping; tops of the cages are vinyl plastic. Cages can also be made of 1) plexiglass glued together on the edges with ventilation provided by screened openings cut on the side pieces; 2) large bags of nylon organdy, organza, or 50 mesh whitefly screening with internal supports provided by PVC pipes and fittings cut to desired lengths and assembled inside the bags, 3) wood frames and nylon organdy, organza, or 50 mesh whitefly screening. |