Улучшение понимания и способности управлять многие из передаваемых насекомыми вирусов растений требует использования вектора. Насекомых передачи вирусов растений является tritrophic взаимодействия и, соответственно, требует манипуляции насекомых, вирусов и растения. Векторы должны выращиваться в больших количествах и манипулировать таким образом, чтобы обеспечить высокий уровень передачи испытуемых растений. Основы воспитания и манипулирования белокрылки,<em> Bemisa tabaci</em> (<em> Hemiptera: Aleyrodidae</em>), Вектор растительных вирусов, принадлежащих к родам несколько новых вирусов растений, представляющих большое количество экономически значимые вирусов представлена.
Белокрылки, Hemiptera: Aleyrodidae, Bemisia tabaci, комплекс морфологически indistinquishable видов 5, являются переносчиками многих вирусов растений. Некоторые виды этих белокрылки передающейся вирусов растений (Begomovirus, Carlavirus, Crinivirus, Ipomovirus, Torradovirus) включают несколько сотен видов новых и экономически значимых возбудителей важные продукты питания и лубяных культур (обзор 9,10,16). Эти вирусы не размножаются в их вектора, но тем не менее, легко перемещаются от растения к растению взрослые белокрылки с помощью различных средств (обзор 2,6,7,9,10,11,17). Для большинства из этих вирусов белокрылки кормления необходимы для приобретения и прививки, а для других только зондирование требуется. Многие из этих вирусов не могут или не могут быть легко передаются другим способом. Поэтому поддержание культуры вируса, биологических и молекулярных характеристик (определение круга хозяев и симптомы) 3,13, Экология 2,12, требуют, чтобы вирусы передаются хостов, используя экспериментальные белокрылки вектор. Кроме того, разработка новых подходов к управлению, такие как оценка новых химических веществ 14 или соединения 15, новый культурных подходов 1,4,19 или выбора и разработки устойчивых сортов 7,8,18, требует использования для белокрылки передачи вируса. Использование белокрылки передачи вирусов растений для отбора и развития устойчивых сортов в селекционных программах задача представляется особенно сложной 7. Эффективное отбора и скрининга на сопротивление использует большое количество растений и существует необходимость в 100% растений быть защищен для того, чтобы найти несколько генотипов, которые обладают генами устойчивости. Эти исследования используют очень большое количество белокрылки содержащий вирус, часто по нескольку раз в год.
Белокрылки обслуживания описанные здесь, могут генерировать сотни или тысячивзрослой белокрылки на растениях каждую неделю, круглый год, без загрязнения других вирусов растений. Растения от обеих белокрылки и вирус должен быть произведен ввести в белокрылки колонии каждую неделю. Белокрылки культур должны быть свободны от белокрылки патогенов, паразитов и паразитов, которые могут уменьшить белокрылки населения и / или снижения эффективности передачи вируса. Колонии, полученную способом, описанным может быть быстро масштабируется для увеличения или уменьшения численности населения в случае необходимости, и может быть скорректировано с учетом кормления предпочтений белокрылки на основе растения-хозяина вируса.
Существуют два основных типа белокрылки колонии, которые могут быть сохранены: nonviruliferous и колонии содержащий вирус белокрылки. Колонии nonviruliferous состоит из белокрылки вскормленных на незараженных растений и позволяет еженедельно наличие белокрылки, которые могут быть использованы для передачи вирусов из разных культур. Колония содержащий вирус белокрылки,состоит из белокрылки воспитанных на инфицированные вирусом растений, позволяет еженедельно наличие белокрылки, которые приобрели вирус что предупреждает один шаг в процессе передачи вируса.
Методы, описанные здесь, были разработаны в течение двух лет и основаны на основной информации, предоставленной многих исследований белокрылки передачи, поведение и биологии. Так как существует много публикаций, эта рукопись относится прежде всего к отзывам и несколько выбранных конкретных публикаций, чтобы проиллюстрировать, какие данные используются для разработки этой техники. Это очень важно в этой процедуре, что белокрылки обрабатываются осторожно, так как нарушение ноги и антенны могут привести к нарушениям поведения и низким показателем передачи ВИЧ. Коллекция с пылесосов и других механических всасывающих устройств никогда не производил хорошие результаты. Другим аспектом успеха в том, что количество белокрылки использованы для получения 100% передачи испытуемых растений, должны быть определены для каждой комбинации растения-хозяина и вируса. Это оптимальное соотношение только должен быть установлен один раз. Наилучшие результаты были получены при использовании молодых взрослых белокрылок (1-3 дня появления прошлом), поскольку они §,ив самых высоких скоростях передачи. Пожилые люди могут быть использованы, но большее количество белокрылки будут необходимы, чтобы компенсировать их снижение уровня передачи. Женщины, как известно, передают по более высоким ставкам, чем мужчины, так как они питаются чаще, чем мужчины. Однако это, как правило, не стоит время, чтобы отделить полов для передачи. Эта процедура может быть модифицирован различными способами в соответствии с ресурсов и потребностей исследователя.
При работе с несколькими вирусами лучше всего держать отдельную колонию белокрылки воспитанных на нехозяев растений вируса. Эти белокрылки могут быть собраны размещены на вирус-инфицированных растений на приобретение и затем после приобретения белокрылки, можно снова к испытуемых растений. Установок, предназначенных для колонии должны быть выращены в теплицах в клетках, чтобы предотвратить введение белокрылки, способных заразить его с другим вирусом. Заражение этих растений с клещами, трипсов и других вредителей растений может поставить под угрозу чДОРОВЬЕ колонии и привести к ее краху. Наконец полива растений колонии должно быть сделано с большой осторожностью. Эти растения подвергаются колоссальным стрессом, кормление так много белокрылки и ниже нормальных условиях освещения. Гниения корней грибов, которые вводятся на торфе в незапятнанный смесей может стать проблемой, если растения overwatered ни разу. Предварительная обработка растений с фунгицидом промокания может устранить некоторые проблемы.
В то время как белокрылка передачи вирусов растений может занять много времени и требуют ценные ресурсы (такие как рост номеров) очень важно для передачи некоторых вирусов, для которых у нас нет других средств передачи. Он также является ценным средством скрининга растений на устойчивость к вирусам, так как она использует тот же тип передачи, что растения в области будет оказывать сопротивление. Использование более искусственных средств передачи не всегда дают лучшие результаты в оценки зародышевой плазмы для ViruS-сопротивления.
The authors have nothing to disclose.
Name of the Item | Company | Catalogue No. | Comments (optional) |
Whitefly proof screening | Klayman Meteor Ltd. Petah Tikva 49130, Israel | — | BioNet 50 mesh screen Antivirus Insect Screen |
Whitefly proof screening | Hummert International (www.hummert.com) | 27-4050-1 – 27-4062-1 | BioNet 50 mesh screen Antivirus Insect Screen |
Whitefly Collection Devices | BioQuip | 1135A | Can also be made using eye droppers, flexible plastic tubing, plastic vacuum adaptors, and cheesecloth |
Collection vials | BioQuip | 8909 | Vials used depend on which aspirator is used. |
Yellow plastic cards | any company | — | Any bright yellow plastic card will work, can be purchased in many places. |
Whitefly Cages | — | — | These are not commercially available and must be constructed. 60 cm x 60 cm x 60 cm cages work well for us. Our preference is for those constructed of aluminum window screening, nylon organdy, vinyl plastic, with a structure created using aluminum window frames. Doors are attached using piano hinges and sealed with weather stripping; tops of the cages are vinyl plastic. Cages can also be made of 1) plexiglass glued together on the edges with ventilation provided by screened openings cut on the side pieces; 2) large bags of nylon organdy, organza, or 50 mesh whitefly screening with internal supports provided by PVC pipes and fittings cut to desired lengths and assembled inside the bags, 3) wood frames and nylon organdy, organza, or 50 mesh whitefly screening. |