This manuscript provides a protocol for implanting telemeters in the mouse for the purpose of measuring intrauterine pressures during pregnancy.
En kompleks integrering av molekylære og elektriske signaler som er nødvendig for å transformere en hvile livmoren inn i en kontraktile organ ved slutten av svangerskapet. Til tross for oppdagelsen av viktige regulatorer av uteruskontraktilitet, denne prosessen er fortsatt ikke fullstendig forstått. Gene mus gir en ideell modell for å studere fødsel. Tidligere har den eneste metode for å studere uteruskontraktilitet i mus var ex vivo isometriske strekkopptak, som er suboptimal av flere grunner. Livmoren må fjernes fra dens fysiologisk miljø, er en begrenset tid løpet av undersøkelsen er mulig, og musene må ofres. Den siste utviklingen av radiometrisk telemetri har tillatt for langsgående, sanntidsmålinger av in vivo intrauterin press i mus. Her, i implantering av en intrauterin telemeter måler trykkendringer i mus livmoren fra midten av svangerskapet før levering, er beskrevet. Ved å sammenligne forskjeller i trykktiltak mellom villtype og transgene mus, kan den fysiologiske virkningen av et gen av interesse bli belyst. Denne teknikken bør fremskynde utviklingen av legemiddelselskap som brukes til å behandle myometriske lidelser under svangerskapet, blant annet for tidlig fødsel.
Tidlig fødsel er den ledende årsak til perinatal sykelighet og dødelighet i utviklede land; den er ansvarlig for 50% av perinatal sykelighet og 75% av perinatal dødelighet 1,2. Tidlig fødsel er mangefasettert, og kan være idiopatisk. Selv om mye forskning har dukket opp på de molekylære og elektriske baner trans myometriet fra en hvilende vevet inn en kontraktile en, nøyaktig patofysiologien av preterm arbeidskraft forblir unnvikende. Endokrine, inflammatorisk og genregule alle har vært knyttet til for tidlige veer 3,4. Men etiske hensyn begrense muligheten til å forske på mekanismene for tidlig fødsel hos mennesker.
Gitt disse begrensningene, har mange forskere slått til mus som modellsystem som å studere fysiologi av fødsel. Mus har korte gestations varer ca tre uker og kan lett genetisk manipulert. I tillegg flere genetiske musemodeller harblitt utviklet for å bestemme de signalveier som er avgjørende for arbeids 5. Til tross for viktige forskjeller mellom mus og menneske fødsel, mus og mennesker deler mange av de samme mekanismene som er avgjørende for arbeidskraft, herunder intrauterin betennelse og infeksjon 6. Således mus tjener som et uvurderlig verktøy for å undersøke livmoraktivitet. Til dags dato, til gullstandarden måle uteruskontraktilitet i mus har vært ex vivo isometriske spenning opptak; men dette er begrenset til en svangerskaps tidspunkt per eksperiment og krever fjerning av livmoren fra dens fysiologisk miljø. En annen viktig faktor er det store antallet av dyr som kreves for disse undersøkelsene. Til slutt, ikke denne metodikken tillater for longitudinelle studier som undersøker induksjon av fødsel og preterm patofysiologi.
Nylige fremskritt gjort i radiometriske telemetri enheter som brukes til å studere arteriell trykkforandringer 7 i mus og intrauterine trykk i rotter 8 ba spørsmålet om hvorvidt det samme teknologi kan brukes til å studere forandringer i intrauterine trykket hos mus i løpet av graviditet. Etter innledende feilsøking, ble en metode med hell utviklet for å måle arbeidskraft induksjon og progresjon i en mus. Denne in vivo tilnærming kan måle overgangen fra lavtrykkstilstand hvile livmoren til høytrykkstilstand som indikerer kraftige arbeids sammentrekninger. Denne metoden har også vært i stand til å detektere signifikante trykkforskjeller mellom transgene mus med kompromittert fødsel og villtype-mus, noe som demonstrerer den fysiologiske virkningen av genekspresjon 9. Denne protokollen gir en real-time, in vivo metode for å studere mus livmor trykket under svangerskapet.
Undersøkelser av myometriets kontraktilitet har stolt på ex vivo målinger av muskelspenninger. Denne metoden kan være nyttig for tidlig stadium testing av nyutviklede preparates uterotoniske medikamenter som ikke kan administreres til levende dyr. Imidlertid, in vivo metoder er nødvendige for å forstå langs progresjon av arbeidskraft. De in vivo-målinger tjene flere formål. Først aktiverer de fangst av et komplett bilde av endringer i livmor kontraktile mønster over varigheten av sv…
The authors have nothing to disclose.
This work was supported by funding from the March of Dimes FY12-133 (S.K.E.) and the National Institutes of Health R01HD037831 (S.K.E.). We would like to thank Dr. Deborah Frank for critical review of the manuscript.
Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
Surgical Glue | 3M Vetbond | 1469SB | Tissue Adhesive–stored in Drierite |
Absorbable 6-0 Sutures | Ethicon | J212H | Vicryl |
Non-absorbable 6-0 Sutures | Ethicon | 8706H | Prolene |
Water Jacket Blanket + Heating Pad | Gaymer | T/Pump PN 11184-000 Blanket-66N111CC | Specialized for rodents |
Bead sterilizer | Keller | Z378577 | Steri 250 Sterilizer |
Disecting Microscope | Nikon | SMZ754 | Fibre optic gooseneck external light source |
Sterile Surgical Gloves–Latex | Cardinal Health Triflex | 2D7253 | |
PhysioTel PA-C10 Pressure Transmitter | Data Sciences International | 270-0135-001 | TA11PA-C10 |
Telemeter Reciever | Data Sciences International | 272-6001-001 | RPC-1 |
Dataquest ART 4.3.2 Analysis Platinum | Data Sciences International | 271-0147-141 | Analysis software |
Diet Recovery Gel | Clear H2O | 72-01-5022 | Purified Soft Diet for Rodents |
Tergazyme | Sigma-Aldrich | Z273287 | Enzyme detergent |