Este protocolo fornece uma descrição detalhada da abordagem ecocardiográfica para fenotipagem abrangente do coração e da função da válvula cardíaca em camundongos.
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Artigo de método
Abordagens ecocardiograma e protocolos de Comprehensive Caracterização fenotípica de doença cardíaca valvular em ratos
Neste artigo
Resumo
Resumo
O objetivo deste manuscrito e do vídeo que o acompanha é fornecer uma visão geral dos métodos e abordagens usados para imagens da função valvar cardíaca em roedores, com descrições detalhadas dos métodos apropriados para anestesia, as janelas ecocardiográficas utilizadas, os planos de imagem e orientações de sonda para aquisição de imagens, os métodos para análise de dados e as limitações das tecnologias emergentes para a avaliação da função cardíaca e valvar. É importante ressaltar que também destacamos várias áreas futuras de pesquisa em imagens cardíacas e valvares cardíacas que podem ser aproveitadas para obter informações sobre a patogênese da doença valvar em modelos animais pré-clínicos. Propomos que o uso de uma abordagem sistemática para avaliar a função cardíaca e valvar cardíaca em camundongos pode resultar em dados mais robustos e reprodutíveis, bem como facilitar a descoberta de fenótipos anteriormente subestimados em camundongos geneticamente alterados e / ou fisiologicamente estressados.
Introdução
O envelhecimento está associado com aumentos progressivos na calcificação cardiovascular 1. Estenose da valva aórtica hemodinamicamente significativa afeta 3% da população com idade superior a 65 2, e os pacientes com estenose da válvula aórtica, mesmo moderada (velocidade de pico de 3-4 m / s) têm uma sobrevida livre de eventos em 5 ano de menos de 40% 3. Atualmente, não existem tratamentos eficazes para retardar a progressão da calcificação da válvula aórtica e substituição da válvula aórtica cirúrgica é o único tratamento disponível para a estenose da válvula aórtica avançada
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Protocolo
1. Prepare os materiais e equipamentos (Tabela 1 e Figura 1)
- Ligue a máquina de ultra-som. Digite o ID do animal, data e hora (para experimentos com imagens de série) e outras informações relevantes.
- Use um transdutor de ultra-sons de alta freqüência, 40 MHz para os ratos de imagem inferior a ~ 20 g ou 30 MHz para ratos maiores que ~ 20 g.
- Conectar-se a plataforma para o eletrocardiograma (ECG) monitorar ECG gating de imagiologia para certas modalidades.
NOTA: criticamente, este também permite o cálculo instantânea da frequência cardíaca (HR), que pode ser utilizado como um de vários índices de uma profundidade adequada da aneste....
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Resultados
Exemplos de imagens que são rotineiramente obtidos a partir de animais imagiologia ultra-sons cardíacos são incluídos neste manuscrito. Uma ilustração do posicionamento do transdutor sobre o peito do animal é fornecida para dar ao leitor uma compreensão clara de que o transdutor está posicionado para obtenção de imagens tal como descrito. Uma fotografia do laboratório de ultra-som set-up também está incluído para enfatizar a importância do equipamento adequado, especialmente o transdutor.......
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Discussão
A indução da anestesia
indução e manutenção de anestesia adequada é fundamental para a avaliação precisa das mudanças na válvula cardíaca e função cardíaca em ratos. Dada a rápida indução da anestesia induzida por isoflurano eo tempo de wash-out relativamente longo deste anestésico após anestesia profunda, não usamos uma câmara de anestesia stand-alone para a indução. Em vez disso, tal como referido em pormenor acima, os animais são guiados directamente para o cone de anestesia.......
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Divulgações
Os autores não têm nada a divulgar.
Agradecimentos
Este trabalho foi apoiado por bolsas do NIH HL111121 (JDM) e TR000954 (JDM).
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Máquina de ultrassom de alta resolução | VisualSonics, Fujifilm | Vevo 2100 | |
| Difusor de isoflurano (capaz de fornecer 1% a 1,5% de isoflurano misturado com 1 L/min 100% O2 | VisualSonics, Fujifilm | N/A | |
| Transdutores para camundongos pequenos (550D) ou camundongos maiores (400) | MicroScan, VisualSonics, Fujifilm | MS 550D, MS 400 | |
| Animal platform | VisualSonics, Fujifilm | 11503 | |
| Unidade | avançada de monitoramento fisiológicoVisualSonics, Fujifilm | N/A | |
| Isoflurano | Terrell | NDC 66794-019-10 | |
| Cone de nariz e tubulação conectados ao difusor de isoflurano e 100% O2 | Custom Engineered in-house | -- | |
| Hair razor | Andis Super AGR+ vet pack clipper | AD65340 | |
| Ultrasound gel | Parker Laboratories | REF 01-08 | |
| Gel de eletrodo | Parker Laboratories | REF 15-25 | |
| Fitas adesivas | Fisher Laboratories | 1590120B | |
| Toalhas de |
Referências
- Ngo, D. T., et al. Determinants of occurrence of aortic sclerosis in an aging population. JACC Cardiovasc Imaging. 2, 919-927 (2009).
- Nkomo, V. T. Epidemiology and prevention of valvular heart diseases and infective endocarditis in Africa. ....
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Reimpressões e permissões
