Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

نموذج من حر نقل الأنسجة: الجرذ شرسوفي الحرة رفرف

doi: 10.3791/55281 Published: January 15, 2017

Introduction

وقد استخدمت نقل الأنسجة الحرة على نحو متزايد في الممارسة السريرية لإعادة إعمار الأنسجة المفقودة منذ 1970s 1-5. وقد سمح ذلك إعادة بناء العيوب المعقدة وغير قابل للعلاج إلا الناجمة عن الورم استئصال، والصدمات النفسية، والالتهابات، والتشوهات أو حروق 1-7. اللوحات خالية من هذا النوع هي مفيدة بشكل خاص لإعادة إعمار المناطق التشريحية معقدة للغاية، كتلك الموجودة في الرأس والرقبة، واليد، والقدم، والعجان 1،4.

ومع ذلك، وحتى اليوم هي في كثير من الأحيان نغرق المتدربين الجراحية التي تعقد عدة خطوات تشارك في رفع ونقل وinsetting رفرف الحرة مع استخدام تقنيات وأدوات 8،9 المجهرية. وبالإضافة إلى ذلك، فمن المقبول على نطاق واسع أن لتصبح microsurgeon يتقن، والممارسة التجريبية واسعة في نموذج حيواني إلزامي 4،8-13.

وعلاوة على ذلك، الأساسي ومتعدية البحوثفي مجال نقل الأنسجة الحرة على جانب كبير من 8،14-16 إمكانية السريرية. ورغم ذلك، كثيرا ما يردع الباحثين من استخدام نماذج المجهرية نقل الأنسجة بسبب نقص المعلومات فيما يتعلق بالجوانب الفنية المشاركة في الإجراءات 4،8-14 المنطوق. الفئران هو نموذج حيواني جيد للبحث والتدريب المجهرية، كما أنها غير مكلفة نسبيا، وسهلة للحفاظ على، وقابلة للتلاعب المتكرر 8،11،13،14،17،18.

وعلى الرغم من وصفت عدة العظام الحرة والعضلات والجلد اللوحات في الفئران 18-24، وشرسوفي رفرف fasciocutaneous الحر هو الأكثر استخداما على نطاق واسع لأغراض التدريس 9،12،13،18،25. وقد وصفت هذه رفرف مجانية لأول مرة في عام 1967 من قبل Strauch وموراي واكتسب شعبية متزايدة منذ ذلك الحين، وذلك بسبب عدة عوامل، وعلم التشريح وهي المستمر الأوعية الدموية، والسهولة النسبية لتشريح والأوعية المغذية كبيرة، والتكرار من الجلد في منطقة المانحة، ذوي الخوذات البيضاءالتراث الثقافي غير المادي يسمح إغلاق الرئيسي للخلل الناتج عن ارتفاع رفرف في 4،9-11،13،17،18،25-28.

رفرف علم التشريح وعلم الأنسجة
ويتم تزويد رفرف شرسوفي من الشريان الشرسوفي السطحي والوريد (الشكل 1). هذه السفن تأتي من وتصب في شريان الفخذ والوريد، على التوالي. في المتوسط عيار الوريد الشرسوفي السطحي هو 0،6-0،8 مم، المتناقضة مع 0،3-0،5 ملم من الشريان الشرسوفي السطحي (الشكل 2) 17،18. الشريان الشرسوفي السطحي يعطي قبالة فرعين رئيسيين: الوحشي وفرع وسطي وهذا بدوره تقسيم عدة مرات، تنشأ شبكات الشعرية التي تغذي معظم إهاب المنطقة شرسوفي. استنزاف هذه الشعيرات الدموية في روافد الأوردة شرسوفية السطحية التي لديها مسار مواز للشجرة الشرايين (الشكل 2) 13،17،18. الرسم البياني في الشكل (3) إعادةيعرض منطقة جدار البطن بطناني توفيره من قبل سفن شرسوفي السطحية التي يمكن تعبئتها في رفرف شرسوفي. هذا رفرف يمكن أن تصل إلى 5 سم في الطول و 3 سم في 13،17،18 العرض.

تشريحيا، ويتكون رفرف من إهاب التي تغطي البطنية الوحشية عضلات جدار البطن (الشكل 4) 13،17،18. وهو يحتوي على الطبقة السطحية من الجلد، والتي شكلتها الأدمة والبشرة. تحت الجلد هناك طبقة من الأنسجة الدهنية اسمه السبلة شحمية. تحت هذه الطبقة هناك طبقة أخرى من العضلات المخططة المعروفة باسم السبلة العضلية 18،28،29. تحت عضلية السبلة هناك الأنسجة الهالي فضفاضة وهي سطحية إلى اللفافة العميقة التي تغطي عضلات البطن أكبر. وبالتالي، فإن رفرف هو كتلة مركب من الأنسجة، والتي تحتوي على جميع هذه الطبقات، باستثناء اللفافة العضلية العميقة (الشكل 5) 13،17،18،27-31.

Protocol

وقد وافق جميع الإجراءات التي تجرى على الحيوانات من قبل لجنة الحيوان الرعاية المؤسسية واستخدام واللجنة الأخلاقية في كلية الطب في جامعة نوفا، لشبونة، البرتغال (08/2012 / CEFCM).

1. إجراء العمليات الجراحية مجموعة المتابعة ملاحظات

  1. استخدام فئران ويستار الكبار وزنها 250-350 غرام.
  2. الحفاظ على الفئران مع الغذاء والماء بالمال وبالشهرة أيضا الإعلان مع دورات ضوء الظلام 12 ساعة 7 أيام قبل الجراحة.
  3. وزن الفئران من أجل تحديد كمية من مخدر المطلوبة.
  4. الأوتوكلاف جميع الأدوات الجراحية قبل الجراحة.
  5. تخطيط كافة المستلزمات والأدوات الجراحية اللازمة لإجراء العملية (انظر جدول المواد).
  6. إجراء الجراحة تحت المجهر التشغيل باستخدام الأدوات التقليدية والمجهرية.
  7. ضع بطانية homeothermic، التحقيق المستقيم، ومصباح الحرارة.
  8. مكان واحد 20 مل قارورة معقمة تحتوي على 0.9٪ المالحة في حمام مائي درجة حرارة ل37 درجة مئوية.
  9. ارتداء قفازات معقمة لتطهير جميع الأسطح من الإعداد التشغيل مع حل الكحولية. إزالة القفازات.
  10. وضع سقف فرك وقناع.
  11. تطهير اليدين بالماء والصابون وارتداء زوج آخر من قفازات معقمة.
  12. ارتداء ثوب الجراحية المعقمة.

2. التخدير وتحضير الجلد

ملاحظة: هل لديك مساعدة مساعد مع الخطوات الأربعة التالية، كما ثوب معقمة ويتم ارتداؤها قفازات.

  1. تخدير الفئران مع خليط من الكيتامين والديازيبام نظرا البريتونى. الجرعة هي 5 ملغ / كغ من الكيتامين و 0.25 ملغم / كغم من الديازيبام. الحكم على عمق التخدير عن طريق قرصة اصبع القدم ومراعاة معدل التنفس في جميع أنحاء الإجراء بأكمله 8،14،15،32.
  2. تطبيق هلام العيون على السطح الأمامي من العين لتجنب خدش القرنية.
  3. إزالة الشعر على السطح البطني من البطن مع كريم مزيل الشعر. بعد ازالتها الشعرالقاعدة وإزالة كريم مزيل الشعر مع المياه المالحة الدافئة.
  4. رش كمية كبيرة من محلول كحولي على الموقع المنطوق. ترك المنتج على الموقع المنطوق وليس محوها. الانتظار لا يقل عن 15 ثانية. كرر الطلب 3 مرات. ترك وقت الاتصال من 2 دقيقة على الأقل قبل الشروع في عملية جراحية. وحدات بحثية أخرى تستخدم بروتوكولات أخرى لمنع عدوى موضع الجراحة.
  5. ارتداء قفازات معقمة، ضع 2 الستائر الجراحية على كلا الجانبين من الفئران.

3. المانحة الموقع الإجراءات الجراحية

  1. تعيين حدود رفرفة شرسوفي تتراوح ما يقرب من 5 سم في الطول و 3 سم عرض.
    1. باستخدام علامة الجلد الجراحية، ورسم خط من عملية الخنجري من القص إلى الارتفاق العانة، وذلك بمناسبة خط الوسط على السطح البطني للبطن فأر.
    2. على الجانب الأيسر من الفئران، وذلك باستخدام علامة الجلد الجراحية، رسم خطين متعامدين إلى السطر الأول: علىالبريد يعبرون الذيلية على الفور إلى القفص الصدري، وآخر مواز لهذا الأخير وفقط في الجمجمة إلى حظيرة الفخذ (أرقام 3 و 6).
    3. بمناسبة شق الجانبي مع علامة الجلد الجراحية مع خط مواز لخط الوسط وحوالي 3 سم وبصرف النظر عن ذلك.
  2. حصاد رفرف
    1. شق الجلد مع مشرط شفرة رقم 15 حتى تصل إلى طبقة السبلة العضلية.
    2. أعمق إلى الطائرة عضلية السبلة، وجعل شق مع الكي الكهربائي حتى وصلت لفافة العضلات.
    3. رفع رفرف من الإنسي إلى الوحشي ومن الجمجمة لعجزي، وفضح عنيق رفرف ل.
    4. بعناية ligate وتقسيم السفن تثقيب القادمة ارتفاعا من طبقة العضلات العميقة والخوض سطح العميق رفرف ل.
    5. وضع ضام في الجانب الذيلية للرفرف وتشريح عنيق رفرف لبحذر بواسطة إغاظة بلطفبعيدا عن الأنسجة المحيطة بها فضفاضة (الشكل 7).
    6. Ligate وتقسيم الجانبي الشريان المنعطف الفخذ والوريد باستخدام 9/0 نايلون لالأربطة.
    7. عزل الشريان الفخذي والوريد. عندما تكون موجودة، ligate (باستخدام 9/0 نايلون) وتقسيم فروع هذه السفن إلى العضلات المجاورة.
    8. أولا، استخدام المشبك الأوعية الدموية مزدوج لكبح الجانب القريب من الوريد الفخذي. المشبك في وقت لاحق جانبها البعيدة. ثم، المشبك الجانب البعيد من الشريان الفخذي وأخيرا جانبها الداني.
    9. المشبك الجانب البعيد من الشريان الفخذي وأخيرا جانبها الداني.
    10. وضع المشبك الأوعية الدموية واحد في الوريد الشرسوفي السطحي واحد آخر في الشريان الشرسوفي السطحي. استخدام زوج من مقص المجهرية على التوالي لقطع الشريان الشرسوفي السطحي والوريد في أصلها وإنهاء الخدمة، على التوالي.
    11. غزير لري تجويف هذه السفن مع محلول ملحي heparinized 10 وحدة دولية / مل، حتى يروا أي دم أو الحطام داخل التجويف السفن "33.
    12. سحب وتقليم صفعة من البرانية على مقربة من مواقع قسم الأوعية الدموية.
    13. نقل رفرف شرسوفي في الرقبة باستخدام ملقط أديسون (الشكل 8).
    14. إغلاق المانحة مع تحت البشرة توقف 5/0 غرز للامتصاص.
    15. إغلاق الجلد مع انقطاع 5/0 غرز نايلون.

4. مستلم الموقع الإجراءات الجراحية

  1. تعرض سفن مستلم الموقع
    1. باستخدام علامة الجلد الجراحية، رسم خط عبر الحدود وسطي للعضلة القصية الترقوية الخشائية اليسرى (SCM).
    2. باستخدام علامة الجلد الجراحية، ورسم خط آخر الجمجمة مباشرة وبالتوازي مع الترقوة اليسرى. يجب أن هذين الخطين تتلاقى في المفصل القصي الترقوي الأيسر.
    3. شق الجلد باستخدام مشرط شفرة رقم 15.
    4. استخدام الكي الكهربائي لقطع طريق subcutaneouالصورة الأنسجة.
    5. استخدام زوج من مقص تشريح لأصبح هيكل الوريد الوداجي الخارجي الجانبي لعضلة المجلس الاعلى للقضاة.
    6. عزل وligate روافد الوداجي الخارجي في هذا (الشكل 9).
    7. Ligate الوريد الوداجي الخارجي أسفل الفك السفلي مع 9/0 النايلون خياطة.
    8. وضع المشبك الوريدي واحد تحت ربط الأخير وقطع حبل الوريد الخارجي الوريد باستخدام زوج من مقص المجهرية على التوالي.
    9. غسل تجويف الوريد مع محلول ملحي heparinized في تركيز 10 وحدة دولية / مل.
    10. عزل الهامش وسطي من العضلات المجلس الاعلى للقضاة وسحب هذه العضلات أفقيا، مما يعرض الشريان السباتي والعصب المبهم (الشكل 10).
    11. جعل شق عرضي في الثلث الأوسط من عضلة SCM باستخدام الكي الكهربائي.
    12. وضع ضام بين سطح العميق للعضلة المجلس الاعلى للقضاة وعضلات حزام.
    13. ندف بعيدا العصب المبهم من الشريان السباتيالشريان، مع الحرص على عدم تلف هذه الهياكل.
  2. مفاغرة الأوعية الدموية
    1. وضع المشبك الشرايين ضعف في الشريان السباتي.
    2. ضع 9/0 نايلون غرزة في الجانب الوحشي من الشريان السباتي، واستخدام هذه غرزة لسحب هذا الجزء من جدار الوعاء الدموي.
    3. استخدام زوج من مقص المجهرية على التوالي لإنتاج الافتتاح في هذه المنطقة من جدار الوعاء الدموي.
    4. يستخدم توقف 10/0 خيوط النايلون إجراء مفاغرة-termino الجانبي بين الشريان الشرسوفي السطحي للرفرف والشريان السباتي على مستوى فتح الشريان السباتي الذي أنشئ مؤخرا.
    5. الاقتراب من الجذع القريب من الوريد الوداجي الخارجي والوريد الشرسوفي السطحي وتفتيش عيار هذه الأوردة اثنين.
      1. إذا كان الاختلاف في حجم ضئيل إلى معتدل، وتمدد لمعة من نهاية قطع الوريد الشرسوفي السطحي باستخدام ملقط تمدد.
      2. إذا كان الفرق العيار هو ضمير جداounced، بالإضافة إلى ملقط تمدد، شطبة نهاية الوريد الشرسوفي السطحي في زاوية 30-45 درجة.
      3. إجراء مفاغرة وريدية، وذلك باستخدام توقف 11/0 خيوط النايلون.
    6. إزالة المشابك واحدة وضعت على متن سفن رفرف ل.
    7. إزالة المشبك المزدوج المتمركزة في الوريد الفخذي.
    8. إزالة المشبك المزدوج وضعها في الشريان الفخذي.
  3. تقييم المباح وكفاءة مفاغرة
    1. تحقق ما إذا كان الشريان رفرف والوريد وتمدد بشكل كامل ويتم احترام أي نزيف كبير بعد 3 دقائق من إزالة المشابك الأوعية الدموية (الشكل 11).
      1. إذا كان هناك نزيف خلال هذه الفترة وضع الشاش المالحة رطبة على مفاغرة وتطبيق ضغط لطيف.
      2. إذا نزيف من مفاغرة لا يتوقف بعد 3 دقائق، إضافة إضافي 11/0 نايلون توقف خياطة الجروح، وبعد وضع المشبك الأوعية الدموية، حسب الحاجة.
    2. انتظر لمدة 10 دقيقة مع رفرف متصلا الأوعية العنق وملفوفة بواسطة شاش مبلل في المياه المالحة الدافئة.
    3. تقييم نضح والرقبة الجرح الارقاء رفرف ل. تفقد مفاغرة لعلامات نزيف، تخثر الدم أو الجر الزائد.
    4. تأمين رفرف في موقع المتلقي بدءا من 5/0 تحت البشرة خيوط متقطعة.
    5. إغلاق الجلد مع 5/0 نايلون تنقطع خيوط (الشكل 12).

العناية 5. بعد العملية

  1. ترك الفئران على استعادة داخل قفصه الفردية في حق وموقف استلقاء الجانبي. إبقاء الحارة قفص من خلال وضع وسادة الحرارة الكهربائية تعيين على أدنى تحت. ضع قطعة قماش خفيفة بين القفص ولوحة الحرارة الكهربائية لتجنب ارتفاع الحرارة.
  2. مشاهدة حيوان يتحول باستمرار إلى أن استلقاء الجانبي المعاكس كل 5 دقائق، حتى يستأنف الاستلقاء القصية وأنها قادرة على ambulate.
  3. بيت الفئران بشكل فردي حتى إزالة رانه غرز جراحية بعد أسبوعين من إجراء العمليات الجراحية.
  4. إعطاء مضاد للالتهابات المخدرات 1 ملغ / كغ تحت الجلد مرة واحدة في اليوم لمدة 3 أيام بعد الجراحة، لتسكين الألم بعد العملية الجراحية.

6. تقييم رفرف

  1. تقديم علاج الطعام على رأسه من الفئران وتقييم الجدوى رفرف من خلال الفحص البصري.
  2. إذا تعرض غير كاف باستخدام الخطوة السابقة، لديك مساعد تطبيق لمسة رقيقة على المنطقة بين الكتفين من الفئران، في حين أن دراسة رفرف.
  3. استخدام التصوير الرقمي والبرمجيات يماغيج لتقييم كمي مجالات تفزر الجرح، البشرة رفرف، احتقان، احتقان و / أو نخر، كما هو موضح بالتفصيل في تروخيو وآخرون. 15.

Representative Results

وفقا لأصحاب الخبرة من أكثر من عشر سنوات باستخدام رفرف الحرة شرسوفي كنموذج للنقل الأنسجة الحرة على حد سواء في سياق الدورات المجهرية ولأغراض البحث، فإن معدل البقاء على قيد الحياة رفرف يعتمد إلى حد ما على البراعة وخبرة الجراح . عموما، إذا ما أخذت الجوانب التقنية المذكورة أعلاه في الاعتبار، وهو معدل البقاء على قيد الحياة كاملة تقريبا (<10٪ من نخر رفرف) حوالي 70٪ من اللوحات أمر متوقع. حوالي 10٪ من اللوحات تمثل نخر جزئي (10-50٪). حوالي 20٪ من اللوحات تعاني نخر كامل. تم الحصول على 80٪ معدل البقاء على قيد الحياة شبه كاملة في إجراءات ال 20 الماضية التي يؤديها صاحب البلاغ الأول (DC) (الشكل 13).

خلال اليومين الأولين بعد الجراحة، ورفرف شرسوفي مجانا في كثير من الأحيان ذمي، ويقدم بعض درجة من الاحتقان الوريدي. هذه عادة بوتح تهدأ تدريجيا بين 3 و 5 أيام بعد الجراحة. عادة، خلال الأسبوع الأول، والفئران يزيل معظم الغرز الخارجية وجزء من الغرز تحت البشرة، وغالبا ما يؤدي في مناطق متفرقة من تفزر الجرح طفيف (الشكل 14). بعد 10 يوما، والشعر يبدأ ببطء لتنمو على سطح اللوحة ل. في نهاية الشهر الأول بعد الجراحة، ورفرف عادة مغطاة الشعر أقصر قليلا من الجلد المجاور. شهرين بعد العمل الجراحي، وبشرت وجود رفرف من قبل كتلة طفيف، وندبة غير واضحة نسبيا حول هوامش رفرف في (الشكل 14). أكل لحوم البشر السيارات من رفرف هو الاكتشاف النادر أن في أصحاب الخبرة، ويحدث بشكل حصري تقريبا في حالات من إجمالي نخر رفرف.

شكل 1
الشكل 1: تشريح الأوعية الدموية من رابطة العمل المنصف الحرة شرسوفيص.
تظهر هذه الصورة المنطقة شرسوفي اليسرى من الفئران المحقونة سابقا مع حل لاتكس الحمراء في نظام الشرايين ومع حل لاتكس الأزرق في الجهاز الوريدي. ومن الممكن أن نلاحظ أن تتلقى المنطقة شرسوفي إمدادات الدم المحوري من الشريان الشرسوفي السطحي والوريد. هذه السفن تأتي من وتصب في شريان الفخذ والوريد، على التوالي. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 2
الشكل 2: المسح صورة المجهر الإلكتروني من يلقي تآكل الأوعية شرسوفية سطحية تظهر المجهري تدفق الدم في الأوعية الدموية للرفرف الحرة شرسوفي.
هذه الصورة المجهر الإلكتروني من يلقي تآكل superfiسفن شرسوفي CIAL من الفئران تبين أن الوريد لديه العيار الثقيل أن الشريان. في المتوسط ​​عيار الوريد الشرسوفي السطحي هو 0،6-0،8 ملم، مقارنة مع 0،3-0،5 ملم من الشريان الشرسوفي السطحي. يظهر هذه الصورة أيضا بأن الشريان الشرسوفي السطحي ينشأ فرعين رئيسيين: الوحشي وفرع وسطي وهذا بدوره تقسيم عدة مرات، تنشأ شبكات الشعرية التي تغذي معظم المنطقة شرسوفي. استنزاف هذه الشعيرات الدموية في روافد الوريد الشرسوفي السطحي التي لديها مسار مواز للشجرة الشرايين. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل (3)
الشكل (3): المنطقة المحتملة لرفرف الحرة شرسوفي الأيسر في الفئران.
هذا المخطط ممثلى أعضاء sents منطقة جدار البطن التي قدمتها سفن شرسوفي سطحية والتي يمكن تعبئتها في رفرف شرسوفي. هذا رفرف يمكن أن تصل إلى 5 سم في الطول و 3 سم في العرض. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل (4)
الشكل 4: الصورة من قسم الملون يوزين hematoxilin رفرف شرسوفي.
ويظهر هذا المقطع يوزين hematoxilin الملون في المنطقة شرسوفي أن رفرف شرسوفي يتكون من إهاب من هذه المنطقة التي تغطي عضلات جدار البطن. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

= "1"> الرقم 5
الرقم 5: تكوين النسيجي للرفرف شرسوفي.
الصورة على الجانب الأيسر يمثل الجزء الملون يوزين hematoxilin من رفرف شرسوفي، في حين تم الحصول على صورة على الجانب الأيمن من قسم ثلاثي الألوان وماسون في هذا رفرف. هاتين الصورتين توضح أن رفرف شرسوفي من الفئران هو كتلة مركب من الأنسجة. وهو يحتوي على الطبقة السطحية من الجلد، والتي شكلتها الأدمة والبشرة. تحت الجلد هناك طبقة من الأنسجة الدهنية اسمه السبلة شحمية. تحت هذه الطبقة هناك طبقة من العضلات المخططة المعروفة باسم عضلية السبلة. تحت عضلية السبلة هناك اللفافة العميقة التي تغطي عضلات البطن أكثر اتساعا وعمقا. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل (6)
الشكل 6. علامات الجلد قبل العملية على السطح البطني من الفئران قبل الجراحة.
توضح هذه الصورة علامات الجلد للشقوق المستخدمة لرفع رفرف شرسوفي الأيسر وبعد ذلك أقحم هذا رفرف في الجانب البطني من منطقة عنق الرحم اليسرى.

الرقم 7
الرقم 7. التشريح الجراحي للسفن المغذيات رفرف شرسوفي تحت المجهر التشغيل (10X التكبير).
تظهر هذه الصورة الشريان الشرسوفي السطحي والوريد مصدره وتصب في شريان الفخذ والوريد، على التوالي. الجانبي الفخذ الشريان المنعطف عادة ما تنشأ من الجانب الذيلية للبرنامج التحصين الموسع سطحيةالشريان المعدي. في المنعطف الفخذي الجانبي الوريد لديه مسار مماثل، وعادة ما ينتهي في الوريد الشرسوفي السطحي. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

شكل 8
الرقم 8. رفرف شرسوفي خارج الحي pedicled على سفنها المغذيات (الشريان الشرسوفي السطحي والوريد - A، V، على التوالي). الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الرقم 9
الرقم 9. عرض التشغيل للتشريح الوريد المتلقي، أي حبل الوريد الخارجي، وعلى الجانب الأيسر من الرقبة (6X التكبير).
فمن الممكن لمراقبة الدورة تحت الجلد من الخارج الوحشي حبل الوريد لعضلة القصية الترقوية الخشائية. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الرقم 10
الرقم 10. عرض للعمليات في تشريح الشريان المانحة، أي السباتي المشترك، وعلى الجانب الأيسر من الرقبة (التكبير 10x).
ويتعرض الشريان والعصب المبهم المصاحب بعد التراجع في القصية الترقوية الخشائية والعضلات تحت اللامية، كما هو مبين. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من رشخصية له.

الرقم 11
الرقم 11. صورة من مفاغرة الأوعية الدموية بين السفن رفرف والأوعية المتلقي في الرقبة، كما يرى تحت المجهر التشغيل (التكبير 10x).
تظهر هذه الصورة مفاغرة-termino الجانبي بين الشريان السباتي المشترك والشرايين شرسوفية سطحية. ومن الممكن أيضا لمراقبة مفاغرة-termino محطة بين شرسوفي سطحية وعروق الوريد الخارجية. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الرقم 12
الرقم 12. الصورة من الجانب البطني من immedi الفئران ¢ الأمر بعد الجراحة.
لاحظ أن المنطقة المانحة وأغلقت بسهولة في المقام الأول. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الرقم 13
الرقم 13. شرسوفي بقاء رفرف مجانا في 20 الفئران متتالية تعمل على مقدم البلاغ الأول (DC).
قدمت خمس الفئران (20٪) كامل رفرف نخر (الحالات 1 و 4 و 8 و 13 و 15، ممثلة في النقط الحمراء). تم تحديد مناطق النخر رفرف باستخدام يماغيج البرمجيات الحرة، كما هو موضح بالتفصيل في تروخيو وآخرون. 15. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

14 "SRC =" / ملفات / ftp_upload / 55281 / 55281fig14.jpg "/>
الرقم 14. صور من رفرف شرسوفي وضعت على الجانب البطني من الرقبة 4 و 14 و 60 يوما بعد العمل الجراحي.
بعد أربعة أيام من الجراحة، هناك عادة بعض تفزر الجرح، كما الفئران يزيل الغرز. ومع ذلك، لا تزال رفرف عادة في المكان. فمن الممكن لدراسة رفرف يوميا عن طريق التفتيش البصري البسيط. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Acknowledgments

تلقى واحد من المؤلفين (ديوغو كاسال) على منحة من برنامج للتعليم الطبي المتقدم، الذي ترعاه فونداساو كالوست كولبنكيان، فونداساو Champalimaud، MINISTERIO دا Saúde ه فونداساو الفقرة على Ciência الإلكترونية بحوث والتكنولوجيا، البرتغال.

فإن الكتاب أود أن أشكر مساعدة تقنية من السيد ألبرتو سيفيرينو في تصوير وتحرير الفيديو. الكتاب ممتنون أيضا للسيد اوكتافيو Chaveiro، السيد ماركو كوستا والسيد كارلوس لوبيز لمساعدتهم في إعداد العينات الحيوانية الواردة في هذه الورقة.

وأخيرا، فإن الكتاب أود أن أشكر السيدة Gracinda مينيزيس لمساعدتها في جميع الجوانب اللوجستية المتعلقة اقتناء الحيوانات والصيانة.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Skin Skribe Surgical Skin Marker Moore Medical 31456 https://www.mooremedical.com/index.cfm?/Skin-Skribe-Surgical-Skin-Marker/
&PG=CTL&CS=
HOM&FN=ProductDetail&
PID=1740&spx=1
Micro retractor Fine Science Tools RS-6540 http://www.finescience.de
Graeffe forceps 0.8 mm tips curved Fine Science Tools 11052-10 http://www.finescience.de
Acland clamps Fine Science Tools 00398 V http://www.merciansurgical.com/aclandclamps.pdf
Clamp applicator Fine Science Tools CAF-4 http://www.merciansurgical.com/acland-clamps.pdf
High-Temperature Cautery Fine Science Tools AA03 http://www.boviemedical.com/products_aaroncauteries_high.asp
Micro-vessel dilators 11 cm 0.3 mm tips 00124 Fine Science Tools D-5a.2 http://www.merciansurgical.com
Micro Jewellers Forceps 11cm angulated 00109 Fine Science Tools JFA-5b http://www.merciansurgical.com
Micro Jewellers Forceps 11 cm straight 00108 Fine Science Tools JF-5 http://www.merciansurgical.com
Acland Single Clamps B-1V (Pair) Fine Science Tools 396  http://www.merciansurgical.com
Micro Scissors Round Handles 15 cm Straight Fine Science Tools 67  http://www.merciansurgical.com
Iris Scissors 11.5 cm Curves EASY-CUT Fine Science Tools EA7613-11  http://www.merciansurgical.com
Mayo Scissors 14 cm Straight Chamfered Blades EASY-CUT Fine Science Tools EA7652-14  http://www.merciansurgical.com
Derf Needle Holders 12 cm TC Fine Science Tools 703DE12  http://www.merciansurgical.com
Monosyn 5-0 B.Braun 15423BR http://www.mcfarlanemedical.com.au/
15423BR/
SUTURE-MONOSYN-5_or_0-16MM-70CM-(C0023423)-BOX_or_36/pd.php
Ethilon 5-0 Ethicon W1618 http://www.farlamedical.co.uk/category_Ethilon-Suture-1917/Ethilon-Sutures/
Dafilon 10-0 B.Braun G1118099 http://www.bbraun.com/cps/rde/xchg/bbraun-com/hs.xsl/products.html?prid=PRID00000816
Veet Sensitive Skin Hair Removal Cream Aloe Vera and Vitamin E 100 ml Veet http://www.veet.co.uk/products/creams/creams/veet-hair-removal-cream-sensitive-skin/
Instrapac - Adson Toothed Forceps (Extra Fine) Fine Science Tools 7973 http://www.millermedicalsupplies.com
Castroviejo needle holders Fine Science Tools 12565-14 http://s-and-t.ne
Straight mosquito forcep Fine Science Tools 91308-12 http://www.finescience.de
Cutasept F skin disinfectant Bode Chemie http://www.productcatalogue.bode-chemie.com/products/skin/cutasept_f.php
Lacri-lube Eye Ointment 5g Express Chemist LAC101F http://www.expresschemist.co.uk/lacri-lube-eye-ointment-5g.html
Normal saline for irrigation Hospira, Inc. 0409-6138-22 http://www.hospira.com/en/search?q=sodium+chloride+irrigation%2C+usp&fq=contentType%3AProducts
Heparin Sodium Solution (5,000 IU/ml) B.Braun http://www.bbraunusa.com/products.html?prid=PRID00006982
Meloxicam Metacam Boehringer Ingelheim http://www.bi-vetmedica.com/species/pet/products.html
Heat Lamp HL-1 Harvard Apparatus 727562 https://www.harvardapparatus.com/webapp/wcs/stores/servlet/
haisku3_10001_11051_39108_-1_
HAI_ProductDetail_N_
37610_37611_37613
Homeothermic Blanket System with Flexible Probe Harvard Apparatus 507220F https://www.harvardapparatus.com/webapp/wcs/stores/servlet/
haisku3_10001_11051_39108_-1_
HAI_ProductDetail_N_
37610_37611_37613
Dry heat sterilizer Quirumed 2432 http://www.quirumed.com/pt/material-de-esterilizac-o/esterilizadores
Surgical drapes Barrier 800430 http://www.molnlycke.com/surgical-drapes/
Biogel Surgical Gloves Medex Supply 30465 https://www.medexsupply.com
Operating microscope Leica Surgical Microsystems 10445319 http://www.leica-microsystems.com/products/surgical-microscopes/

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Morain, W. D. Plastic Surgery. Mathes, S. J. 1, Saunders. 27-34 (2006).
  2. Christoforou, D., Alaia, M., Craig-Scott, S. Microsurgical management of acute traumatic injuries of the hand and fingers. Bull Hosp Jt Dis. 71, (1), 6-16 (2013).
  3. Santoni-Rugiu, P., Sykes, P. J. A History of Plastic Surgery. Santoni-Rugiu, P., Sykes, P. J. Springer. 3 79-119 (2007).
  4. Tamai, S. Experimental and Clinical Reconstructive Microsurgery. Tamai, S., Usui, M., Yoshizu, T. Springer-Verlag. Ch. 1 3-24 (2003).
  5. Bettencourt-Pires, M. A., et al. Anatomy and grafts - From Ancient Myths, to Modern Reality. Arch Anat. 2, (1), 88-107 (2014).
  6. Casal, D., Gomez, M. M., Antunes, P., Candeias, H., Almeida, M. A. Defying standard criteria for digital replantation: A case series. Int J Surg Case Rep. 4, (7), 597-602 (2013).
  7. Gomez, M. M., Casal, D. Reconstruction of large defect of foot with extensive bone loss exclusively using a latissimus dorsi muscle free flap: a potential new indication for this flap. J Foot Ankle Surg. 51, (2), 215-217 (2012).
  8. Plenter, R. J., Grazia, T. J. Murine heterotopic heart transplant technique. J Vis Exp. (89), (2014).
  9. Pichierri, A., et al. How to set up a microsurgical laboratory on small animal models: organization, techniques, and impact on residency training. Neurosurg Rev. 32, (1), 101-110 (2009).
  10. Klein, I., Steger, U., Timmermann, W., Thiede, A., Gassel, H. J. Microsurgical training course for clinicians and scientists at a German University hospital: a 10-year experience. Microsurgery. 23, (5), 461-465 (2003).
  11. Fukui, A. Experimental and Clinical Reconstructive Microsurgery. Tamai, S., Usui, M., Yoshizu, T. Springer-Verlag. Ch. 1 35-43 (2004).
  12. Ad-El, D. D., Harper, A., Hoffman, L. A. Digital replantation teaching model in rats. Microsurgery. 20, (1), 42-44 (2000).
  13. Ruby, L. K., Greene, M., Risitano, G., Torrejon, R., Belsky, M. R. Experience with epigastric free flap transfer in the rat: technique and results. Microsurgery. 5, (2), 102-104 (1984).
  14. Edmunds, M. C., Wigmore, S., Kluth, D. In situ transverse rectus abdominis myocutaneous flap: a rat model of myocutaneous ischemia reperfusion injury. J Vis Exp. (76), (2013).
  15. Trujillo, A. N., Kesl, S. L., Sherwood, J., Wu, M., Gould, L. J. Demonstration of the rat ischemic skin wound model. J Vis Exp. (98), (2015).
  16. Siemionow, M. Z. Plastic and Reconstructive Surgery: Experimental models and research designs. Siemionow, M. Z. Springer - Verlag. Ch. 1-7 3-67 (2015).
  17. Petry, J. J., Wortham, K. A. The anatomy of the epigastric flap in the experimental rat. Plast Reconstr Surg. 74, (3), 410-413 (1984).
  18. Tamai, S., Usui, M., Yoshizu, T. Experimental and Clinical Reconstructive Microsurgery. 6, Springer-Verlag. Ch. 6 111-114 (2004).
  19. Zhang, F., et al. Microvascular transfer of the rectus abdominis muscle and myocutaneous flap in rats. Microsurgery. 14, (6), 420-423 (1993).
  20. Tonken, H. P., et al. Microvascular transplant of the gastrocnemius muscle in rats. Microsurgery. 14, (2), 120-124 (1993).
  21. Miyamoto, S., et al. Free pectoral skin flap in the rat based on the long thoracic vessels: a new flap model for experimental study and microsurgical training. Ann Plast Surg. 61, (2), 209-214 (2008).
  22. Nasir, S., Aydin, A., Kayikcioglu, A., Sokmensuer, C., Cobaner, A. New experimental composite flap model in rats: gluteus maximus-tensor fascia lata osteomuscle flap. Microsurgery. 23, (6), 582-588 (2003).
  23. Coskunfirat, O. K., Islamoglu, K., Ozgentas, H. E. Posterior thigh perforator-based flap: a new experimental model in rats. Ann Plast Surg. 48, (3), 286-291 (2002).
  24. Ozkan, O., et al. A new flap model in rats: iliac osteomusculocutaneous flap. Ann Plast Surg. 47, (2), 161-167 (2001).
  25. Padubidri, A. N., Browne, E. Modification in flap design of the epigastric artery flap in rats--a new experimental flap model. Ann Plast Surg. 39, (5), 500-504 (1997).
  26. Strauch, B., Murray, D. E. Transfer of composite graft with immediate suture anastomosis of its vascular pedicle measuring less than 1 mm. in external diameter using microsurgical techniques. Plast Reconstr Surg. 40, (4), 325-329 (1967).
  27. Green, C. E. Anatomy of the Rat. First edn. Hafner Publishing Company. 124-153 (1968).
  28. Greene, E. C. Anatomy of the rat. Hafner. New York. (1959).
  29. Langworthy, O. R. A morphological study of the panniculus carnosus and its genetical relationship to the pectoral musculature in rodents. Am J Anat. 35, (2), 283-302 (1925).
  30. Popesko, P., Ratjová, V., Horák, J. A Colour Atlas of the Anatomy of Small Laboratory Animals. 2, Saunders. 13-104 (1992).
  31. Brown, S. H., Banuelos, K., Ward, S. R., Lieber, R. L. Architectural and morphological assessment of rat abdominal wall muscles: comparison for use as a human model. J Anat. 217, (3), 196-202 (2010).
  32. Harder, Y., et al. Ischemic tissue injury in the dorsal skinfold chamber of the mouse: a skin flap model to investigate acute persistent ischemia. J Vis Exp. (93), e51900 (2014).
  33. Cox, G. W., Runnels, S., Hsu, H. S., Das, S. K. A comparison of heparinised saline irrigation solutions in a model of microvascular thrombosis. Br J Plast Surg. 45, (5), 345-348 (1992).
  34. Gurunluoglu, R., Siemionow, M. Z. Plastic and Reconstructive Surgery: Experimental models and research designs. Siemionow, M. Z. Spronger. Ch. 6 53-62 (2015).
  35. Nasir, S. Plast Reconstr Surg. Springer. 227-236 (2015).
  36. Parsa, F. D., Spira, M. Evaluation of anastomotic techniques in the experimental transfer of free skin flaps. Plast Reconstr Surg. 63, (5), 696-699 (1979).
  37. Dunn, R. M., Huff, W., Mancoll, J. The Rat Rectus Abdominis Myocutaneous Flap: A True Myocutaneous Flap Model. Ann Plast Surg. 31, (4), 352-357 (1993).
  38. Özkan, Ö, et al. A new flap model in rats: iliac osteomusculocutaneous flap. Ann Plast Surg. 47, (2), 161-167 (2001).
  39. Ozkan, O., Koshima, I., Gonda, K. A supermicrosurgical flap model in the rat: a free true abdominal perforator flap with a short pedicle. Plast Reconstr Surg. 117, (2), 479-485 (2006).
  40. Dorsett-Martin, W. A. Rat models of skin wound healing: a review. Wound Repair Regen. 12, (6), 591-599 (2004).
  41. Ghali, S., et al. Treating chronic wound infections with genetically modified free flaps. Plast Reconstr Surg. 123, (4), 1157-1168 (2009).
نموذج من حر نقل الأنسجة: الجرذ شرسوفي الحرة رفرف
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Casal, D., Pais, D., Iria, I., Mota-Silva, E., Almeida, M. A., Alves, S., Pen, C., Farinho, A., Mascarenhas-Lemos, L., Ferreira-Silva, J., Ferraz-Oliveira, M., Vassilenko, V., Videira, P. A., Gory O'Neill, J. A Model of Free Tissue Transfer: The Rat Epigastric Free Flap. J. Vis. Exp. (119), e55281, doi:10.3791/55281 (2017).More

Casal, D., Pais, D., Iria, I., Mota-Silva, E., Almeida, M. A., Alves, S., Pen, C., Farinho, A., Mascarenhas-Lemos, L., Ferreira-Silva, J., Ferraz-Oliveira, M., Vassilenko, V., Videira, P. A., Gory O'Neill, J. A Model of Free Tissue Transfer: The Rat Epigastric Free Flap. J. Vis. Exp. (119), e55281, doi:10.3791/55281 (2017).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter