Trypanosoma cruzi agent for Chagas sygdom producerer langvarig asymptomatiske infektioner, der pludselig udvikler sig til klinisk anerkendte patologi. Følgende forskning protokol beskriver en kort sigt familie-baserede epidemiologisk undersøgelse for at optrævle T. cruzi infektionen overføres seksuelt fra forældre til afkom.
Amerikansk trypanosomiasis overføres til mennesker af triatomine bugs via indtagelse af forurenede fødevarer, ved blodtransfusioner eller tilfældigt i hospitaler og forskningslaboratorier. Derudover Trypanosoma cruzi infektionen overføres medfødt fra en chagasic mor til hendes afkom, men den mandlige partner bidrag i livmoderen kontaminering er ukendt. Resultaterne af reder og klumper af amastigotes og trypomastigotes i theca celler i æggestokkene, i goniablasts og i lumen af seminiferous tubules tyder på, at T. cruzi infektioner overføres seksuelt. Forskning protokol heri præsenterer resultaterne af en familie undersøgelse befolkning viser parasit nukleare DNA i diploide blod mononukleære celler og i de haploide kønsceller af forsøgspersoner. Således, tre uafhængige biologiske prøver, der opsamlet et år fra hinanden bekræftet, at T. cruzi infektioner var seksuelt overførte til afkommet. Interessant, specifikke T. cruzi antistof var fraværende i fleste af familiens afkom, der bar immuntolerance til parasit-antigen. Immuntolerance blev demonstreret i kylling refraktære over for T. cruzi efter den første uge af embryonale vækst, og kyllinger udklækket af flagellat-podes æggene var ude af stand til at producere det specifikke antistof. Derudover ejakulerer instillation af den menneskelige sæd intraperitoneal eller ind i skeden af naive mus viste T. cruzi amastigotes i bitestiklen, seminiferous tubulus, sædlederen og æggelederen med fravær af inflammatoriske reaktioner i immunsystemet privilegeret organer af reproduktion. Opdræt af T. cruzi-inficerede mandlige og kvindelige mus med naive kammerater resulterede i erhvervelse af de infektioner, som blev senere overført til afkommet. Derfor er en solid uddannelse, information og kommunikation program, der involverer befolkning og sociale organisationer anses for nødvendig for at forhindre Chagas sygdom.
Protozo parasit Trypanosoma cruzi tilhører familien Trypanosomatidae gennemgår trypomastigote og amastigote livscyklus stadier i pattedyr værter og findes som epimastigotes i insekt-vektor (Reduviid: Triatominae) gut og i axenic kultur. I de seneste årtier, har flere undersøgelser vist tilstedeværelsen af Chagas sygdom i lande på fire kontinenter betragtes som triatomine fejl fri1,2,3,4,5, 6 , 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 , 13; spredningen af amerikanske trypanosomes blev i første omgang henføres til latinamerikanske indvandrere til den nordlige halvkugle, men muligheden for, at nogle er autoktont tilfælde af Chagas sygdom kan ikke længere blive nægtet3,4 , 5 , 6 , 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 , 13 , 14. kun genkendelige endogene kilden til T. cruzi transmission har været tilskrevet chagasic mors overførsel af parasitten til afkom i ca. 10% af graviditeter15; den mandlige partner bidrag til i livmoderen infektioner gennem sæd ejakulerer forblevet ukendt.
Mere end et århundrede siden, efterforskere16,17 observeret intracellulære T. cruzi amastigotes i theca celler i æggestokkene og kimen linje celler i testiklerne i akutte tilfælde af Chagas sygdom. Reder og klumper af T. cruzi trypomastigotes og amastigotes i theca celler i æggestokkene, i goniablasts og i lumen af seminiferous tubules (figur 1) dødelig akut Chagas sygdom tilfælde udvikle immun privilegium i organer reproduktion i mangel af inflammatoriske infiltrerer18,19. I de seneste årtier, et par eksperimentelle studier har vist reder af de runde amastigote former for T. cruzi i seminiferous tubulus, epididymis og vas deferens såvel som i livmoderen, rør og æggestok theca celler i akut inficerede mus 1,20,21,22. Desuden, i løbet af familie undersøgelser at dokumentere overførsel af protozo mitokondrie-DNA fra forældrenes Chagas patienter at deres efterkommere, T. cruzi nukleare DNA (nDNA) blev bekræftet i humane haploide Kim linje celler23, og parasit livscyklus faser blev observeret i ejakulerer chagasic mus24. Disse resultater er i overensstemmelse med rapporter om immuntolerance opnået af afkommet af T. cruzi –inficerede værter i mangel af specifikke antistof1,25,26. Derudover epidemiologiske betænkninger, der foreslog spredning af endemiske Chagas sygdom til andre kontinenter3,4,5,6,7,8 ,9,10,11,12,13 understøttes nu af eksperimentelle undersøgelser viser at Chagas sygdom kan overføres seksuelt1 . Undersøgelsen præsenterer en epidemiologisk familie undersøgelse protokol og viser, at T. cruzi infektion overføres ved samleje.
Heri, vi diskuterer en familie-baseret forskning protokol, der svarede på spørgsmålet om hvorvidt menneskelig Chagas sygdom stammer fra seksuelt overførte intraspecies T. cruzi infektioner. Tidlige studier kunne ikke fremlægge dokumentation for seksuel overførsel af T. cruzi infektioner, sandsynligvis fordi de tilgængelige data og oplysninger om Chagas sygdom blev indhentet separat fra de enkelte3,4, 5<…
The authors have nothing to disclose.
Vi anerkender laboratoriefaciliteter og Izabela Dourado, Carla Araujo, og klog Gomes kritiske bemærkninger og den tekniske bistand fra Bruno Dalago og Rafael Andrade. Vi er forgældede til fundament til fremme af videnskab (FAPDF), The National Research Council, Ministeriet for videnskab og teknologi (CNPq/MCT) og agenturet for uddannelse menneskelige ressourcer, Undervisningsministeriet (KAPPER / mig), Brasilien, for at støtte disse undersøgelser.
BCIP and NBT redox system | Sigma-Aldrich | 681 451 001 | |
Blood DNA Purification columns | Amersham Biosciences | 27-9603-01 | |
d-ATP, [α-32P], 250 µCi. | Perkin Elmer | BLU012H | |
DNA, Solution Salt Fish Sperm | AMRESCO | 064-10G | |
dNTP Set, 100 mM Solutions | GE Healthcare | 28-4065-51 | |
Eco RI | Invitrogen | 15202-021 | |
Goat anti-human IgG- alkaline phosphatase conjugated | Southern Biotech | 2040-04 | |
Goat anti-human IgG- FITC conjugated | Biocompare | MB5198020 | |
Hybond – N+ nylon membrane | GE Healthcare | RPN303B | |
Hybridization oven | Thomas Scientific | 95-0031-02 | |
Micro imaging software cell Sens software | Olympus, Japan | ||
Molecular probes labeling System | Invitrogen | 700-0030 | |
Nsi I | Sigma-Aldrich | R5584 1KU | |
Plasmid Prep Mini Spin Kit | GE Healthcare | 28-9042-70 | |
Plate reader | Bio-Tek GmBH | 2015 | |
Rabbit anti-chicken IgG-alkaline phosphatase conjugated | Sigma-Aldrich | A9171 | |
Rabbit anti-chicken IgG-FITC conjugated | Sigma-Aldrich | F8888 | |
Rabbit anti-mouse IgG- alkaline phosphatase conjugated | Sigma Aldrich | A2418 | |
Rabbit anti-mouse IgG-FITC conjugated | Biorad | MCA5787 | |
Spin Columns for radio labeled DNA purification, Sephadex G-25, fine | Sigma-Aldrich | G25DNA-RO | |
Taq DNA Polymerase Recombinant | Invitrogen | 11615-010 | |
Thermal cycler system | Biorad, USA | 1709703 | |
Vector Systems | Promega | A1380 |