여기, 우리는 조사 설치류 동물 모델의 불안 수준에서 변경 하는 프로토콜을 제시. 높은 플러스 미로 (EPM) 테스트, 추적 소프트웨어, 비디오와 함께 사용 전 임상 실험실 시나리오에서 다양 한 잠재적인 완화 치료의 효과를 신뢰할 수 있는 방법을 제공 합니다.
이 연구의 전반적인 목표는 상승의 방법론을 설명 하는 소프트웨어를 추적 하는 비디오와 함께에서 미로 (EPM) 테스트 플러스. 메서드의 목적은 실험실 쥐 모델에 다양 한 잠재적인 완화 치료의 효과 문서화 하는 것입니다. EPM 테스트 보호, 밀폐 된 어두운 공간과 열린 공간 및 높이, 그리고 소설 환경 탐험 그들의 타고 난 강한 동기 부여의 무조건된 두려움으로 설치류의 proclivity를 기반으로 합니다. EPM 테스트 동작에 영향을 미칠 것으로 알려진 약물을 주어진 설치류의 완화 또는 anxiogenic 응답을 조사에 대 한 널리 사용된 행동 테스트가입니다. 닫힌된 팔, 팔, 닫힌 무기 항목의 감소 된 수 그리고 EPM 테스트에 의해 측정 하는 팔을 열고 항목의 높은 수에 소요 된 시간 증가 비율에 시간의 감소 비율을 보여주는 관측 감소 반영 될 수 있습니다. 불안 수준입니다. 이 메서드를 사용 하 여 불안 관련 행동에 외 인 케 톤 보충의 효과 Sprague Dawley (SPD) 쥐에서 테스트 됩니다. 외 인 케 톤 보충은 만성 또는 subchronically 83 일 동안 쥐에 고 심하게 구두 gavaged EPM을 수행 하기 전에 7 일 동안 매일 테스트. 행동 데이터 수집 수행 됩니다 스마트 비디오 추적 시스템을 사용 하 여 치료의 끝에 멀게 관찰자. 주요 연구 결과 나타냅니다 EPM 테스트 케 톤 보충 유도 완화 효과 검출 하는 효과적인 방법 이며, 약물 또는 대사 기반 요법과 관련 된 불안 행동의 변화를 평가 하는 중요 한 측정 이라고 여겨질 수 있다.
이 기사의 목적은 불안 관련 행동의 변화 및 실험실 쥐 모델에서 새로운 치료 모니터링 하기 위해 추적 소프트웨어 비디오와의 조합에서 EPM 테스트 방법론을 설명 하는 것입니다. EPM 테스트 약물 치료1적용 후 불안 행동 수준 및 쥐의 불안 반응 측정의 조사를 위해 개발 된 상대적으로 간단한 행동 평가 방법 이다. 실제로, 그것은 EPM 테스트의 설치류1,2의 불안 수준 변화 조사에 대 한 널리 사용 되 고 효과적인 행동 분석은 입증 되었습니다. 동봉, 어두운 공간 (접근)으로 그들의 경향의 오픈 공간 / (회피), 무조건된 공포와 탐험 소설 타고 난 동기 부여의 그들의 높은 수준의 기반으로 하는 설치류 동물 (주로 쥐 및 쥐)에서 EPM 테스트의 적용 환경입니다. 따라서, EPM 테스트 접근-회피 갈등2,3에 따라 확고 방법론입니다.
EPM는 더하기 모양의 기구 이다 높은 팔, 구성 된 Handley 및 Mithani4 (그림 1)에 의해 기술 되었다 하 고 2 개의 반대 팔을 폐쇄 하는 반면 환경 (들고)에 열려 있는 2 개의 반대 팔의 구성 (닫힌된 팔) 벽을 갖추고 있습니다. 치료 후, 증가 시간에 두 팔을 벌려 보냈다 경우 오픈 팔 항목 (치료) 동물을 통제에 비해 증가 수는 EPM에서 검색 되 면이 완화 효과2,3나타냅니다. 가장 강력한 회피 응답 EPM 분석 결과5;의 시작 (EPM의 4 개의 팔의 교차점에 쥐의 배치) 후 첫 번째 5 분에서 입증 되었습니다. 따라서, 치료 후 어떤 행동 든 지 일반적으로 EPM에 5 분에 대 한 기록 됩니다. 불안 수준의 추가 조치, 헤드 딥, 투우사 (세로 서 2 개의 뒷 다리에 쥐의), 지저분한 boli 뿐만 아니라 총 팔 수가 항목 (자발적인 모터 활동)와 다른 자세 스트레칭 (냉동), 또한 기록 될 수 있습니다. EPM2. 따라서, 불안 관련 행동의 포괄적인 평가 제공 하기 위해 여러 행동 매개 변수를 컴파일할 수 있습니다.
위해서는 결과의 유효성을 높이고, 2 ~ 3 행동 분석 실험 일반적으로 함께 사용 됩니다, 빛-어둠 선택 시험, 사회적 상호 작용 시험, 등 그리고 다른 동물의 불안 수준을 측정 하기 위해 EPM 테스트 모델6. 설치류에서 혼자 수행 EPM 분석 결과 다른 마약7의 완화 또는 anxiogenic 효과 조사 하는 적당 한 방법 이기도 합니다. EPM 테스트는 다이아 형 불안 완화 제 (예, 다이아 제 팜)8, 뿐만 아니라,에 뿐만 아니라 다른 사람, 사이 아미노 산, monoamine, peptidergic 및 nucleosidergic 화합물 (예를 들어, N-메 틸-D-aspartate (NMDA) 적으로 민감한 AP7, α-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic 산 (AMPA) 적 CNQX, μ-opioid 수용 체 주 작동 근 모 르 핀, NPY1 적 BIBP3226, 물질 P, 렐, 옥 시 토 신, 세로토닌 수용 체 주 작동 근 및 8-오-DPAT 같은 길 항 근 및 WAY-100635, 및 β1-아드레날린 길 항 근 betaxolol)9,10,,1112. 따라서, 설치류에 EPM 분석 결과 적합 하 고 민감한 방법 완화 효과 (예를 들어, 편도 체, 해 마, 및 변 지역)에 관련 된 뇌 영역에 영향을 주는 다른 치료의 영향을 조사 하 고 불안2에 내포 된 행동 (예를 들어, serotonergic, GABAergic, 및 adenosinergic 시스템)의 메커니즘. 이러한 EPM 연구에서 테스트 에이전트 외 인 케 톤 보충 뇌 행동 변화를 감지 하는 민감한 방법 필요할 수 있는 미묘한 방법으로 신호를 변경 하는 포함 됩니다.
이 문서에서는, 우리는 실험적인 바이어스를 제거 하는 데 도움이 하 고 수집 및 행동 변경 소설 완화 치료에 대 한 응답에서의 분석을 용이 하 게 소프트웨어를 추적 하는 비디오와 함께 사용 하는 EPM 테스트를 설명 합니다.
일반적으로 몇 가지 일반적으로 사용 테스트, 같은 빛 어두운 선택 테스트, 사회적 상호 작용 시험, EPM 테스트 사용 됩니다 다른 동물 모델에서 불안 수준을 측정 하. 그러나, 혼자 EPM 분석 결과 조사 하는 적당 한 방법은, 설치류의 불안 수준18,20외 인 케 톤의 효과 보충 하는 예를 들어.
EPM 방법의 주요 장점은 무조건된 고소 공포와 녹지의 어두운, 밀폐 된 공간으로 설치류의 본능적 경향에 의존. 다른 한편으로, 불안 같은 동작을 연구 하는 데 사용 하는 다른 방법은 행동 응답 특정 유해 자극, 전기 충격, 음식/물 부족, 시끄러운 소리, 등 노출 프레데터 냄새3을 기반으로 합니다. 이러한 테스트 일반적으로 귀 착될 조건부 응답 EPM 또한 더 자비 롭 대안을 나타내는 반면. 또한, EPM 서로 다른 뇌 영역 (예:변 지역, 해 마)와 기본 메커니즘의 관련 연구를 유용한 도구가 될 수 있습니다 (예를 들어, GABA, 글루타민 산 염, 세로토닌, 아데노신) 불안 행동2.
때 잠재적인, 미묘한 완화 효과 평가 하는 경우에 특히 동물 (예를 들어,는 구강), 모든 동물 같은 방식으로 처리 하는 것이 중요 하다와 같은 사람에 의해 아주 스트레스는 치료를 적용 합니다. 가능 하면 식 수 또는 통해 는 입에 마약/화합물의 도입을 ‘치료’ 하는 것은 선호 하는 방법 있을 수 있습니다. 같은 금액은 각 동물에 관리 되도록는 구강을 사용할 수 있습니다. 화합물의 pharmacokinetic 속성을 기반으로, 그것은 일반적으로 gavaging 후 1 시간 이내 EPM에 동물을 테스트 하는 것이 좋습니다. 실험 과목을 선택할 때 그것은 중요 한 목표에 따라 그들의 긴장, 섹스, 발 정기 주기, 및 나이로 몸 무게를 고려 하 고 테스트 물질2. 나이에 관계 EPM 연구 설계 및 해석 데이터, 그것을 고려해 야 그 때 오픈 팔 항목의 백분율 선형 나이21 와 증가 하 고 EPM 행동의 노화와 관련 된 변화는 스트레인 전용22.
EPM 테스트를 할 때, 잠재적인 문제가 해결 될 필요가 있다. 때로는 동물 때문에 국외 자 성향 분석에서 제외할 필요 (예를 들어, 동물 떠날 수 없어 배치 위치 지역 거의 폭포는 기구에서 소음 또는 장치 외부 이벤트에 의해 산만). EPM 테스트 추가 합병증 치료 이러한 유형의 효과 평가 통해 EPM 매개 변수 될 필요가 있기 때문에 진정 또는 과다 발생을 포함할 수 있습니다.
두 팔을 벌려에서 활동 감소 때문에 한 번만 EPM 테스트에 동물을 노출 하는 것이 중요 하다 고 중앙 플랫폼에 대 한 지출 감소 총 시간 EPM 에 첫 번째 노출에 비해 설치류의 두 번째 (반복된) 노출에 설명 되었다 14,15. 따라서, EPM 테스트에 설치류의 단일 노출이 좋습니다. 그러나, 경우 최소 3 주 EPM 첫 번째 및 두 번째 노출 사이 EPM 설정 다른 룸 (다른 환경) 이동, 동물 EPM에 의해 조사 될 수 있습니다 테스트2번 이상.
EPM은 다른 물자, 크기 (예를 들어, 마우스 또는 쥐에 대 한), 그리고 주제를 공부 하는 색상을 선택할 때 고려 되어야. 그것은 장치에 이전 동물 남긴 냄새 후속 동물의 동작을 변경할 수 있습니다 염두에 두어야 하는 것이 중요. 따라서, 아크릴 유리 (투명 하지), 세탁 후 냄새를 유지 하지 않는 같은 정리 하기 쉬운 재료의 만든는 EPM을 사용 하는 것이 좋습니다. 나무로 만든 EPM 장치를 하지 마십시오. 가급적, EPM (예를 들어, 검은 흰색 동물 테스트 하는 경우)에서 테스트 하는 동물의 색과에서는 다른 매트 색상을 사용 합니다. 더 나은 동물 및 인클로저, 더 사이 대조는 동물 및 높은 신뢰성의 검색과 결과의 정밀도 획득 (덮여 거리, 속도, 추적) 무광택 회색 소재로 만든 EPM 기구는 흰색, 검은색, 그리고 흰색과 검은색 동물 유용 합니다.
비디오 추적 시스템의 추가 이용은 EPM, 뿐만 아니라 그것은 다양 한 물 미로, 오픈 필드, 플러스/레이디얼 팔/T-Y 미로, 행동 테스트 장소 특혜, 수영을 강제로 설정 하는 유연 하 고 쉬운 방법을 제공합니다 그리고 서 스 펜 션 테스트 꼬리.
요약,이 문서의 목표는 수집 하 고 분석 소설 완화 치료에 대 한 응답에서 행동 변경 추적 소프트웨어 비디오에 사용 하는 EPM 테스트를 설명 하는입니다. EPM의 가능한 응용 프로그램의 불안 관련 장애의 치료에 대 한 새로 개발된 된 약리 에이전트 prescreening 포함 됩니다. 완화 및 anxiogenic 에이전트 뿐만 아니라 다른 호르몬의 행동 효과 및 약물 남용의 수 또한 조사. 노화와 각종 스트레스에 노출의 영향 또한 평가 수 있습니다. 이 연구는 적절 한 조치는 때 EPM 사용 하 여 케 톤 보충18,20와 관련 된 행동 변화를 평가 하는 중요 한 방법 것을 입증 했다 결론 지었다.
The authors have nothing to disclose.
이 작품 (아래 부여 번호 헝가리의 국가 개발 기관에 의해 ONR 그랜트 N000141310062와 GLUT1D의 기초는 부여 #6143113500 (도미 닉 피 다 봉 agostino)에 의해 지원 되었다 TIOP-1.3.1.-07/2-2F-2009-2008; Zsolt 마스) 하 고는 학과의 재향 군인 담당 (Kindy 표시)에 의해. 저자 (Csilla 아리)에이 주제에 지속적인 연구를 지원 하기 위한 퀘스트 영양 LLC를 감사 하 고 싶습니다.
Elevated Plus Maze for mice and rats | Coulbourn Instruments | H10-35-EPM | |
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