Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove

Medicine

إنشاء نموذج العين الجافة الشديدة باستخدام استئصال الددريوادادينال الكامل في الأرانب

doi: 10.3791/60126 Published: January 8, 2020

Summary

يتم تقديم نهج جديد للحث علي امراض العين الجافة المزمنة في الأرانب عن طريق أزاله جميع الغدد الدمعية المدارية جراحيا. هذه الطريقة ، متميزة عن تلك التي سبق الإبلاغ عنها ، تنتج نموذجا مستقرا وقابلا للتكرار من العين الجافة ناقصه مائيا مناسبه تماما لدراسة فسيولوجيا المسيل للدموع والفيزيولوجيا المرضية والمداواة العين.

Abstract

مرض العين الجافة (الدائرة) هو مرض معقد مع مسببات متعددة واعراض متغيرة ، وجود التهاب سطح العين كما الخطوة المرضية الرئيسية. وعلي الرغم من التقدم في فهمنا لدائره النهوض بالذات ، لا تزال هناك فجوات معرفيه كبيره. والسلف محدوده جزئيا بسبب نقص النماذج الحيوانية المعلوماتية. وقد ابلغ المؤلفون مؤخرا عن طريقه الدائرة التي يسببها حقن جميع انسجه الغدة الدمعية المدارية (LG) مع يكتين concanavalin a. هنا ، نقوم بالإبلاغ عن نموذج جديد من الدائرة التي تعاني من نقص مائي علي أساس الاستئصال الجراحي لجميع الانسجه المدارية من ال جي. كلا الأسلوبين استخدام الأرانب بسبب تشابهها للعيون البشرية من حيث حجم وهيكل سطح العين. بعد أسبوع واحد من أزاله غشاء nictitating ، تمت أزاله ال جي المدارية المتفوقة جراحيا تحت التخدير ، تليها أزاله ال جي المتفوقة جفني ، وأخيرا أزاله lg السفلي. الناجمة عن استئصال القاعدة الحاده ، والتي يدل عليها انخفاض ملحوظ في التمزق المسيل للدموع حتى اختبار الوقت واختبار Schirmer المسيل للدموع ، وزيادة كبيره في المسيل للدموع والدموع وارتفع تلطيخ البنغال. وقد استمرت النتيجة التي تسببت بها الدائرة في ثمانيه أسابيع علي الأقل. لم تكن هناك مضاعفات والحيوانية التسامح الاجراء جيدا. ويمكن إتقان هذه التقنية بسهوله نسبيا من قبل أولئك الذين لديهم خبره جراحيه كافيه والتقدير لتشريح الأرانب ذات الصلة. وبما ان هذا النموذج يلخص ملامح الإنسان الذي يعاني من نقص مائي ، فهو مناسب للدراسات المتعلقة بالتوازن السطحي للعين ، والدائرة ، والتداوي المرشح.

Introduction

الدموع مطلوبه لحماية سطح العين وللحفاظ علي الخصائص البصرية للقرنية. وهي تتكون من ثلاث طبقات: طلاء الميوسين الداخلية ، ومكون مائي الأوسط ، وتراكب الدهون1. يتم إنتاج طبقه الميوسين في الغالب في الخلايا القدح من الملتحمة ، ومكون مائي في الغالب في الغدد الدمعية (lgs) ، وطبقه الدهون في الغالب في الغدد meibomian1،2. و LGs المدارية هي المصدر الرئيسي للمكون مائي من الدموع النسبة للكثير من البروتينات التي تحمي السطح من الهجوم البكتيري3. وتنشا امراض سطح العين عندما ينخفض إنتاج المسيل للدموع المائي دون مستوي حرج ، مما يحرم الأسطح الظهاريه للعين من المكون المائي ومكونات المسيل للدموع الحاسمة بما في ذلك عوامل النمو ، lysozyme ، و lactoferrin. في حالات انخفاض إنتاج المسيل للدموع من قبل LGs ، والملتحمة وانسجه القرنية تخضع للتكيف للتعويض عن البيئة المتغيرة.

فهم مساهمه مكون المسيل للدموع المستمدة من LGs المدارية واليات التعويضية سطح العين عندما يكون هذا النقص يؤثر علي تقديرنا لفسيولوجيا والفيزيولوجيا المرضية للجزء الامامي من العين ، وعلي نطاق أوسع ، من الصحة والمرض في العالم بأسره. ويتطلب النهج التجريبي لهذه القضايا نموذجا حيوانيا زاخرا بالمعلومات. ونتيجة لذلك ، حاولت عده مجموعات تطوير نماذج حيوانيه يتم فيها أزاله ال LGs المدارية ، مما يسهل تقييم دور الدموع في صحة العين. تم الإبلاغ عن أحد هذه النماذج مؤخرا للماوس4. الأرنب يقدم ، ومع ذلك ، العديد من المزايا المتميزة علي نماذج القوارض بما في ذلك الهياكل التشريحية والنسيجية مماثله من LG ، وربما الأهم من ذلك ، حجم مماثل ومساحة السطح من القرنية والانسجه الملتحمته بالمقارنة مع نظرائهم البشرية3.

ان إنشاء امراض العين الجافة الناقصة المائية عن طريق الاستئصال الجراحي لأنسجه ال جي في الأرانب ليست جديده. وتصف العديد من التقارير استئصال انسجه ال جي بنجاح متفاوت ينعكس في التغيرات المتغيرة في إنتاج المسيل للدموع مقيسة باختبار المسيل للدموع schirmer5,6,7,8. فهم شامل لتشريح ذات الصلة من الأرنب ووضوح حول المصطلحات التشريحية مفيده جدا في استنساخ هذه الطريقة. ويرد أدناه عرض عام شامل لكلاهما.

تشريح الغدد الدمعية

الأرنب لديه اثنين من LGs المدارية: LG السفلية أكبر (ILG) وأصغر متفوقة LG (SLG; الشكل 1). يمتد ILG علي طول الجانب السفلي والخلفي من الحافة المدارية. باستثناء حجم متغير ، الجزء الامامي من ILG لديه مظهر بولبوس موحد إلى حد ما يمكن ان ينظر اليه علي انه البروز في الجلد تحت الكره الارضيه (الشكل 2). بسبب مظهره مميزه [أين رلايشن تو] الاستراحة من الغدة, أحلت هو ك ال "راس" من ال [ايلغ]. يلتف جزء من الراس حوله ويقع علي السطح الخارجي لعظم الزجوماتيك. هذا بمثابه معلما مفيدا علي الموجات فوق الصوتية مناظير لتوجيه الحقن في ILG. المتبقي من الراس يتواجد أكثر [مديلي]9 في المدار.

نظرا لمظهر مميز من الجزء المتبقي من ILG ، والتي هي طويلة ورقيقه ، ويشار إلى هذا الجزء باسم "الذيل". ويمتد الذيل علي طول الحافة المدارية السفلية ، من راس ILG إلى الحافة المدارية حيث ينتهي بتشريح متغير في الحافة المدارية السفلية والخلفية (الشكل 3ا). يكذب الذيل عميقة ([انسي]) إلى العظمة [زيجومتيك] يفصل من المحتويات مداريه بفرقه [فف# ل] ل كثير من مسلكه حتى هو يصل الحافة خلفيه من المدار حيث هو ثانيه يمدد خارجا علي السطح خارجيه من العظمة [زيجومتيك]. يتلقى ال [ايلغ] دمه إمداد تموين من فروع من الشريان سباتية.

ال [سلغ] يتلقى اثنان عناصر مماثله إلى الإنسان. واحد هو متفوقة جفني LG (pslg) ، الذي يقيم في الجفن الخلفي العلوي الإنسي إلى لوحه الرصغي. يبدو بولبوس في الطبيعة ولها العديد من الفتحات التي تستنزف السائل المسيل للدموع المائية التي ينظر اليها بسهوله أكبر عندما غطت مع 2 ٪ فلوريسئين (الشكل 3ب).

والثانية هي المتفوقة المدارية LG (OSLG) ، والتي تعيش في وضع الإنسي في المدار العلوي (الشكل 3ج). نظرا لموقعها بالقرب من خط منتصف الجمجمة ، كان من المستحيل التعرف عليها بنجاح باستخدام النهج الجراحية الخارجية من المدار الزمني أو السفلي. في العينات الجديدة أو الحالات الجراحية ، يمكن ان تكون هذه الغدة ساقطه من خلال القواطع الخلفية الموجودة في السطح الظهري لجمجمة عندما يتم تطبيق الضغط الإنسي اللطيف علي الكره الارضيه. يمكن توثيق تدلي هذا النسيج الغديه مع مناظير الموجات فوق الصوتية.

و PSLG و OSLG هي الهياكل المتجاورة. و OSLG هو بنيه الأنابيب التي تتحد العمارة الاقنيه في القناة الرئيسية الفضلات. تمر هذه القناة تحت الحافة فوق المدارية وتعمل في انسجه الغطاء العلوي التي تنتهي في PSLG. علي طول القناة الاخراجيه ، تم تحديد الانسجه الغديه متسقة مع الأوصاف الاصليه من ديفيس10 (الشكل 3د).

مذكره بشان المصطلحات

الأوصاف التشريحية الممتازة والشاملة تستخدم مصطلحات مختلفه أيضا. التشريح المداري الكلاسيكية من قبل ديفيس يعرف فقط العلوي والسفلي LG10. ومع ذلك ، وصف له من LG العلوي تفاصيل بوضوح أجزاء أكثر تحديدا هنا باسم PSLG و OSLG ، في حين وصف له من اقل تفاصيل LG الأجزاء المحددة هنا كراس وذيل ILG. وهناك أكثر حديثه وشامله أطلس التشريحية11 يعرف هذه الانسجه والغدة الغرسات الوجنيه والتبعي LG. يتم استخدام مصطلح "الغدة الدمعية" هنا لتشمل PSLG المذكورة أعلاه و OSLG. وهذه المصطلحات أكثر ملاءمة لاستنساخ هذه الطريقة دون التباس لا مبرر له.

Protocol

واستكملت جميع دراسات الفقاري الحيوانية وفقا لجميع المبادئ التوجيهية التنظيمية والمؤسسية ذات الصلة والامتثال لها. تمت الموافقة علي جميع الدراسات من قبل مجلس المراجعة المؤسسية لجامعه ستوني برؤاك وأجريت وفقا لبيان جمعيه البحوث في الرؤية وطب العيون (ARVO) لاستخدام الحيوانية في بحوث العيون والبصر.

1-الماشية والمساكن

  1. استخدام الأرانب البيضاء النيوزيلندية (NZW) وزنها 2 − 3 كجم.
  2. منزل الأرانب بشكل فردي في بيئة تسيطر عليها بدقه: درجه الحرارة (65 ± 5 درجه فهرنهايت) ، والرطوبة (45 ± 5 ٪) ، والاضاءه (12 ساعة علي/قباله دوره).
    ملاحظه: نظرا للسلوك العدواني غالبا ما عرضت بين الأرانب التي هي مجموعه الماوي ، والحفاظ علي الماشية في أقفاص الفردية لمنع أصابه العين غير مقصود.
  3. إعطاء الأرانب وصول غير محدود إلى الأرنب القياسية الطعام والماء.
  4. لا تقدم اي ثراء غذائية أخرى لمنع مكملات فيتامين A غير المقصودة التي قد تؤثر علي جفاف العين.
  5. التاقلم مع الأرانب قبل أسبوعين علي الأقل من تسجيل معلمات الدائرة.

2. أزاله غشاء nictitating

ملاحظه: بالنسبة للبساطة ، يتم وصف التقنية الخاصة بالعين اليمني أدناه. إكمال هذا الاجراء علي العين اليسرى بطريقه متطابقة.

  1. أزاله غشاء nictitating علي الصعيد الثنائي خلال فتره التاقلم (عاده في الأسبوع الأول).
  2. ضع الأرنب في حقيبة تقييديه بحجم مناسب.
  3. أداره حقنه تحت الجلد من اسيبرومازين (1 مغ/كغ) علي الكتفين باستخدام حقنه 1 سم مكعب و 26 G ابره لتتسرب الأرنب. نقطه النهاية لهذا التخدير الخفيف هو عندما يحافظ الحيوانية علي موقف رئيس مريحه دون حركات المسح الطبيعي وأذانها لم تعد تستقيم تماما.
  4. استخدام الماصة المجهرية ، وتطبيق 25 μL من ليدوكائين خاليه من الحافظة (1 ٪) إلى العين. ادراج منظار غطاء السلك بين الجفون.
  5. فهم غشاء nictitating في قمته مع 0.3 ملقط (أو ما يعادلها) وتسحبه علي سطح القرنية. حقن 1 ٪ ليدوكائين مع 1:100000 أدرينالين في الفضاء الملتحمة من غشاء nictitating باستخدام ابره 26 G. حقن حوالي 0.3 مل لتشكيل فقاعه متواضعة الحجم علي غشاء nictitating. كميات حقن أكثر من 1 مل جيدا ضمن نطاق جرعه أمنه للأرانب (2 − 4 مغ/كغ).
  6. أزاله منظار السلك. انتظر حوالي 5 دقائق لليدوكائين والأدرينالين نافذ المفعول. خلال هذا الوقت ، وتنفيذ نفس الاجراء في عين زميل.
  7. استبدل منظار الغطاء السلكي. امسك ومدد الغشاء الذي يزيد من سطح القرنية باستخدام ملقط 0.3. قطع الغشاء في قاعدته مع مقص بضع أو ما يعادلها.
    ملاحظه: النزيف عاده ما يكون الحد الأدنى ، ولكن الحفاظ علي درجه حرارة عاليه وحده البطارية في مكان قريب واستخدامها حسب الحاجة للحد من النزيف. ويمكن أيضا الضغط المباشر علي قاعده قطع من غشاء nictitating يمكن استخدامها لوقف نزيف صغير إذا حدث ذلك.
  8. أزاله منظار غطاء السلك. وضع مرهم المضادات الحيوية الموضعية (نيوميسين ، بوليميكسين ، باكيتراسين ، والهيدروكورتيزون) علي سطح القرنية.
  9. تنفيذ اجراء مماثل للعين زميل كما هو مبين في البروتوكول.
  10. وضع الماشية مره أخرى في أقفاص الفردية والسماح للشفاء لمده أسبوع واحد علي الأقل ، أو حتى السطح الملتحمة قد شفي تماما من وجهه نظر سريريه ، قبل اجراء اي فحوصات أخرى أو التدخلات.
    ملاحظه: يتم الاشاره إلى الشفاء السريري الكامل من خلال عدم وجود اي تورم أو حقن أو إفرازات من الأسطح الملتحمته. يجب علي الحيوانية ان تبقي أعينها مفتوحة بشكل طبيعي ، دون وجود تدلي واقيه.

3. قياس معلمات العين الجافة وجمع عينات المسيل للدموع

  1. قياس المعلمات التالية الدائرة ، حسب الاقتضاء للبروتوكول التجريبي: المسيل للدموع التمزق ، والمسيل للدموع الوقت الفاصل ، واختبار Schirmer المسيل للدموع ، والبنغال وارتفع تلطيخ. تنفيذها كما هو موضح سابقا12، مع فريق من اثنين علي الأقل من المحققين.
    ملاحظه: يسمح فريق من اثنين علي الأقل من المحققين لقياس كفاءه مجموعات أكبر من الحيوانية (6 أو أكثر) حول نفس وقت الساعة التالي منع الاختلاف البيولوجية المحتملة من التاثير علي النتائج.

4. التحضير الجراحي والتخدير

  1. الحيوانية الخفيفة وضعت في كيس تقييد مع اسيبرومازين تحت الجلد علي النحو الوارد أعلاه (1 مغ/كغ).
  2. أزاله كل الفراء علي الوجه والسطح الظهري لجمجمة لتصور المعالم الجراحية.
    1. تقليم الفراء مع قطع المقص ترك الفراء غرامه المتبقية حوالي 1 ملم في الطول (الشكل 4ا، اليسار).
    2. أزاله جميع الفراء المتبقية باستخدام كريم مزيل الشعر معتدل اتباع تعليمات الشركة المصنعة (الشكل 4ا، الحق).
  3. وضع علامة علي مواقع الشق الجراحي بقلم جراحي.
    1. حدد موقع الشق علي القواطع الخلفية من خلال تطبيق الضغط الإنسي علي الكره الارضيه مما تسبب في انتفاخ صغير ليتطور في الجلد فوق القواطع الخلفية من تدلي ال OSLG.
    2. جعل علامة خطيه 2 سم في الاتجاه الامامي/الخلفي علي الجلد علي السطح الظهري لجمجمته مباشره فوق هذا الموقع مع قلم العلامات الجراحية.
    3. عند التخطيط لشق لأزاله ilg ، ووضع علامة طويلة ، خط أضلاع حول العين (1 سم من هامش الغطاء السفلي والزماني) تمتد من المدار الخلفي (الزماني) إلى الامامي (الإنسي) canthus. جعل الوسم تمتد علي طول المدار الخلفي إلى مستوي الإنسي التالي أو متفوقة فقط علي هذا (الشكل 4ب). في بعض الأجزاء ، سيتم توصيل الشقوق لأزاله OSLG و ILG.
      ملاحظه: عند اجراء الجراحة الثنائية ، ضع علامة علي كلا المدارين في هذا الوقت.
  4. تقليم رقعه من الفراء 2 إلى 3 سم واسعه مع المقصات علي السطح الجانبي لكل فخذ للسماح بوضع صفيحه الأحادي القطب.
    1. تطبيق هلام الموجات فوق الصوتية لضمان الاتصال الكهربائي جيده مع الصفيحة الاحاديه القطب.
  5. ضع قسطرة وريديه 25 جرام في واحده من الاورده الهامشية للاذن لأداره الادويه أو السوائل إذا لزم الأمر.
  6. إعطاء اكسيليازين تحت الجلد (1 مغ/كغ) والكيتامين الرابع (15 مغ/كغ) لتحريض الاولي من التخدير (من خلال الوصول الرابع).
    ملاحظه: إذا تم تخدير الأرنب مسبقا مع اسيبرومازين كافيه للاحتفاظ نقطه النهاية الموصوفة في الخطوة 2.3 ، استخدم التخدير قناع الغاز مع ايزوفلونان كبديل.
  7. ضع قناع الحنجرة الهوائي الذي يقام في مكان باستخدام شريط مطاطي أو سلسله لتامين والحفاظ علي مجري الهواء.
    1. توصيل القناع إلى اله التخدير مع تدفق الأكسجين تعيين في 1 لتر/دقيقه.
    2. تعيين ايزوفلواني في 5 ٪ في البداية ومن ثم تقليل كما التسامح علي أساس مستوي التخدير الحيواني.
    3. الحفاظ علي ايزوفلواني عند أو فوق 2 ٪ حتى إغلاق الجرح النهائي.
      ملاحظه: تقييم مستوي التخدير عن طريق رصد معدل التنفس والحركات استجابه للمؤثرات الجراحية أو المؤلمة. زيادة عمق التخدير إذا زاد معدل التنفس فوق 10 الأنفاس في الدقيقة الواحدة ، إذا بدا الأرنب مضغ علي المشرف علي مجري التنفس ، أو إذا لوحظت اي حركات استجابه لمحفزات مؤلمه.
  8. مراقبه مقياس التاكسج النبض ، والتصوير الشعاعي ، وضغط الدم ، ودرجه حرارة الجسم المستقيم ومعدل ضربات القلب باستخدام جهاز مراقبه متعدد المعلمات أو الاجهزه المناسبة الأخرى.
    1. راقب الحيوية باستمرار خلال العملية وسجل كل 10 إلى 15 دقيقه.
  9. وضع الأرنب علي غرفه العمليات (OR) الجدول علي وساده التدفئة لمنع انخفاض حرارة الجسم. أماله الجدول في موقف Trendelenburg العكسي في حوالي 30 درجه للتقليل من النزيف.
  10. اعداد المنطقة الجراحية مع محلول povidone اليود المخفف إلى نصف القوه مع الماء المعقم وثني وذلك للحفاظ علي حقل معقم.

5. استئصال اللحمية الجراحية الكاملة

ملاحظه: وقد تم استئصال داكريوادادينال الجراحية كامله ، كما هو موضح هنا ، باستخدام ملقط الانسجه 0.3 ، مقص بضع ، وملقط الانسجه غير مسننه ، ومقص. هذه الاداات يمكن ان تكون متداخلة مع الصكوك المماثلة التي تؤدي نفس الوظيفة استنادا إلى تفضيل الجراح.

  1. أزاله OSLG أولا.
    1. التسلل إلى مواقع الشق (خطوط القلم الجراحية وسم والغطاء الخلفي العلوي) مع خليط 50:50 من 2 ٪ ليدوكائين مع 1:100000 أدرينالين و 0.5 ٪ بوبيفاكايين باستخدام حقنه 5 سم مكعب مع ابره 30 G (الشكل 5ا).
      ملاحظه: الحقنه وحجم ابره ليست حرجه.
    2. استخدام ابره كولورادو متصلة بوحدة الجراحة الكهربية لجعل شقوق الجلد علي طول العلامات الجراحية. يمكن ان تختلف الإعدادات استنادا إلى الاستجابة السريرية وعاده ما تكون بين 10 إلى 15 وحده لكل من القطع والتخثر (الشكل 5ب).
    3. تطبيق التوتر المتعارضة عبر شق الجلد لفصل الانسجه وفضح ألياف العضلات الاساسيه الجبهية.
    4. تطبيق الضغط الإنسي علي الكره الارضيه للمساعدة في التصور من OSLG ، ينظر اليه علي انه انتفاخ الانسجه الموجودة فقط الإنسي أو العميق للياف العضلات الجبهية. إذا لزم الأمر ، نقل هذه ألياف العضلية إلى الجانب من أجل فضح القاطعة الكامنة.
    5. مع ملقط مسنن (0.3) ومقص محفظه ، وسحب بلطف وقطع الكبسولة الليفية الفوقية OSLG. OSLG عاده ما يكون لون تان شاحب (الشكل 5ج).
    6. باستخدام ملقط مسننه أو غير مسننه ، وفهم الانسجه الغدة OSLG وسحب بلطف من خلال القاطعة متفوقة باستخدام تقنيه "اليد علي يد". قطع صغيره ، والعصابات الليفية باستخدام مقص محفظه لتحرير الغدة من وضعها في المدار (الشكل 5د).
      ملاحظه: كما يتم أزاله الانسجه الغدة OSLG ، وسوف تبدا في الاندماج في هيكل كبير مثل أنبوب (القناة الرئيسية الفضلات).
    7. عندما تمت أزاله الغدة تماما قدر الإمكان ، واستخدام الحذر السخي مع ابره كولورادو لإنشاء شار الانسجه ، واقتطاع الغدة داخل القاطعة بعمق ممكن. سيكون هذا في وقت لاحق بمثابه معلم تاكيدي اثناء أزاله PSLG.
  2. أزاله PSLG.
    1. Evert الجفن العلوي باستخدام قضيب يميل القطن. وعاده ما تكون النهاية المنتفخة لل PSLG مرئية بسهوله.
      ملاحظه: في بعض التشوات التشريحية ، قد يكون من الممكن تصور القناة الرئيسية الإفرازات كبنيه خطيه شاحبه حول 1 أو 2 ملم واسعه.
    2. الانخراط في pslg مع ملقط مسننه (0.3) والتراجع عنه من سطح الجفن اثناء استخدام مقص محفظه لقطع حول قاعدته فصلها عن طرسوس الكامنة (الشكل 6ا).
    3. السيطرة علي النزيف المعتدل مع الحذر الأحادي.
    4. تطبيق الجر المستمر علي الانسجه المفصولة للحفاظ علي مستوي الانسجه لتشريح. وهذا سيسمح للقناه الرئيسية إخراج SLG لأزالها كذلك (الشكل 6ب).
      ملاحظه: كما يتم اجراء تشريح ، فانه سوف تتقدم عاده إلى الحافة المدارية متفوقة حيث انه من الممكن ان نري علامات الحذر تركت وراءها من أزاله الأكثر متفوقة والوسيطة الموجودة OSLG.
  3. Resect ILG.
    1. السماح علي الأقل 5 دقيقه للتخدير الموضعية نافذه المفعول.
    2. Incise الجلد ، والعضلات الاكتئاب من palpebra السفلي ، والجزء zygomaticolabial من العضلات الغرسات الوجنيه ، والعضلات اوربيكولاريس مع ابره التشريح المجهري كولورادو ومنفصلة عن oslg في القسم 5.1.
    3. الحفاظ علي الأرقاء مع الحذر الأحادي.
    4. كما يتم تنفيذ الشق أعمق من خلال وسم الجلد ، والبحث عن لمعان الطائرة الفاسية فوق العظم الزغوماتيك أو جزء سطحي من العضلات ماستر. عند هذه النقطة ، والحفاظ علي الطائرة الانسجه وحملها متفوقة نحو الحافة المدارية باستخدام ابره كولورادو للقطع (الشكل 7ا).
      ملاحظه: لغرض تحديد ILG ، فانه من الأسهل لتنفيذ هذا الجزء من تشريح علي راس ILG الذي هو عاده ادني من الحاجز الامامي للعين.
    5. بعد تحديد والبحث عن الكبسولة المحيطة ILG ، وتحديد الانسجه تان من ILG. فقط الجزء الامامي من الراس ILG ستكون مرئية (الشكل 7ب). ومع ذلك ، يمكن ان يتبع الراس انسيه كما انه يمر تحت القوس الغرسات الوجنيه والتحولات في الذيل (الشكل 7ج).
    6. استخدم مقص شق البطن لقطع الحاجز المداري علي طول الحافة السفلية للكشف عن الجزء الخلفي الأكثر من ذيل ILG. مره واحده يتم تحديد الطائرة النسيجية ، وتمديد تشريح اللاحقة علي طول خط شق كامل (الشكل 7د).
      ملاحظه: تمر قناه ILG من خلال الانسجه الضامة الليفية السفلية للدخول إلى الفضاء الملتحمة السفلي في الجانب الزمني للغطاء. في الحافة الخلفية ، يمكن ان يكون ذيل ILG تكوينات تشريحيه متفاوتة. أحيانا ينهي هو سفليه إلى الخلفية (جانبيه) [كنثوس], بينما في أخرى [ديسسربل] يمدد هو أكثر [سوبريورلي] حول المدار مؤقته.
    7. استخدام العناية القصوى لمنع الضرر غير المقصود لإمدادات الدم ، والتي تتلقاها ILG من فروع الشريان السباتي. ويمكن رؤية إمدادات الدم خلال هذا الجزء من التشريح (الشكل 7ه).
    8. في الحالات التي ينتهي الذيل تحت الخلفي (الجانبي) canthus ، قد يكون من الضروري ان شطر الجزء الزمني من العضلات الاماميه لفضح ذيل ilg ، والتي تقع علي طول العظم الغرسات الوجنيه.
    9. بعد ان تم عزل ILG بأكمله وفضحها ، ازالته. نظرا لحجمها الكبير ، فمن الأفضل في كثير من الأحيان لقطع الغدة في نصف مع مقص وأزاله الراس بشكل منفصل عن الذيل.
    10. المضي قدما بحذر شديد عند أزاله راس ILG لأنها تقع علي الفور المتاخمة لجيب وريدي كبير في المدار. علي الرغم من ان النزيف من هذا الهيكل اثناء العمليات الجراحية لم يحدث ، لديها المساعدات الأرقاء وافره الحالية للتخفيف من هذه المخاطر.
    11. بعد أزاله جميع انسجه الغدد ، وإغلاق الطائرة النسيج الضام العميق مع عده توقفت 5-0 الخيوط الإيثيلين تيريفثاليت. إغلاق العضلات السطحية والجلد مع تشغيل 6-0 polyglactin 910 خياطه (الشكل 7و) باستخدام الملقط الانسجه 0.3 وسائق ابره.

6-الرعاية اللاحقة للإجراءات

  1. ثني الماشية وتطهير المواقع الجراحية بالماء المعقم.
  2. تطبيق المضادات الحيوية الموضعية العيون ومرهم الستيرويد (نيوميسين ، بوليميكسين ، باكيتاسين ، وهيدروكورتيزون) إلى الشقوق. تابع هذا التطبيق مرتين يوميا لمده يومين.
  3. إعطاء حقنه تحت الجلد من 20 مل المالحة العادية علي شفرات الكتف باستخدام ابره 26 G.
  4. إعطاء بوبرينورفين تحت الجلد 0.01 مغ/كغ أو كيتوبروفين 3 مغ/كغ للسيطرة علي الم باستخدام حقنه 1 سم مكعب و 30 G ابره.
    ملاحظه: يجب علي الحيوانية العودة إلى المدخول الغذائي العادي والانشطه في غضون 1 − 2 أيام. وينبغي تقييم الأرانب أسبوعيا علي الأقل للعلامات السريرية للعدوى كما يتضح من التورم التدريجي ، والم ، وحمامي ، أو الإفرازات القيحية أو صديدي علي مواقع الشق. يجب أيضا ملاحظه الكائنات أليفه للتاكد من انها لا تبدا في خدش مواقع الشق/خطوط الخياطة. قد يكون من المفيد في هذا الصدد تقليم جميع المخالب قبل استئصال داكريوادادينانا. إذا لوحظ خدش خطوط الشق ، يمكن استخدام الياقات الواقية القياسية لمنع أصابه النفس.
  5. عكس التخدير.
    1. قم بازاله مشرف المجري الهوائي بعد ان يستجيب الحيواني للمؤثرات ويبدا في إظهار المضغ العفوي ولكن قبل ان يتمكن مشرف المجري الهوائي من التلف.
    2. راقب الماشية لمده 1 − 2 ساعة تقريبا أو حتى تتعافي تماما من التخدير كما يتضح من الحركة العفوية في أقفاصها.
    3. تقييم الحيوانية للألم وعلاجها بشكل مناسب.
  6. السماح للحيوانات بالتعافي لمده أسبوع واحد علي الأقل بعد الجراحة قبل اتخاذ اي إجراءات سريريه في الدائرة.

Representative Results

تم تنفيذ الطريقة الكاملة الموصوفة هنا علي 8 الحيوانية. يتطلب درجه معتدله من المهارة الجراحية. متوسط الوقت الجراحي حوالي 2.2 h للجراحة الثنائية ، باستثناء أزاله الغشاء nictitating ، الذي تم القيام به بشكل منفصل والمطلوبة < 10 دقيقه. لم يكن هناك الوفاات أو مضاعفات داخل العملية والأرانب لا تتطلب اي مساعده الأرقاء غير الحذر متواضعة.

نهجنا الجراحية بنجاح الناجمة عن جفاف العين في كل العينين. وقد تاكد ذلك من خلال لوحه من العلامات السريرية والمختبرية لدائره الصحة التابعة (الجدول 1). وخلال الأسابيع الثمانية للملاحظة ، تم قمع المعدل المتوسط بنسبه تزيد عن 75 في المائة من مستويات ما قبل الجراحة (p < 0.0001 لجميع النقاط الزمنيه). المثل ، انخفض اختبار المسيل للدموع Schirmer بنسبه 50 ٪ تقريبا ، المتبقية حتى لمده 8 أسابيع من المراقبة ؛ ولم يظهر اي اتجاه للانتعاش خلال فتره المتابعة. بعد الجراحة ، أظهرت الدموع المسيلة للدموع زيادة بنسبه 10% بما يتفق مع الدائرة ، واستمرت لمده 8 أسابيع علي الأقل بعد الجراحة. ارتفع تلطيخ البنغال من القرنية أيضا ولم تظهر علامات الانتعاش خلال 8 أسابيع من المتابعة (الشكل 8). وأظهرت جميع العيون التي تمر باستئصال الددريوادادينكلي انخفاض ملحوظ في أرقام الخلايا القدح والتغييرات الظهاريه متسقة مع جفاف العين (الملتحمة الانطباع الخلايا).

Figure 1
الشكل 1: تشريح الغدة الدمعية الأرنب (العين اليمني). وتتالف الغدة الدمعية العلوية المدارية (OSLG) من جزء مداري أكبر ومكون أصغر حجما. وتتالف الغدة الدمعية السفلية الأكبر (ILG) من الأجزاء الاماميه/الراس والخلفية/الذيل. وتبين المحاور الاحداثيه المصطلحات المستخدمة لجميع أوصاف التوجيه المستخدمة في النص. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 2
الشكل 2: موقع رئيس المجموعة. المنظر الجانبي للوجه الأيمن بعد أزاله الفراء. انتفاخ في كفاف الجلد (المشار اليها بواسطة السهام السميكة) ادني من المدار الامامي يشير إلى موقع رئيس ilg التي تقع علي السطح الخارجي للعظام الغرسات الوجنيه في هذا الموقع. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 3
الشكل 3: الغدد الدمعية المدارية. (ا) الغدة الدمعية السفلية اليمني (ilg) بعد تلطيخ مع الصبغة الزرقاء ايفانز تظهر علي مقربه من ذيل ilg (السهم الأحمر) فقط الإنسي إلى العظم الغرسات الوجنيه (السهم الأسود) واقل من الكره الارضيه. (ب) الإنتاج المسيل للدموع من الغدة الدمعية المتفوقة بالبيبراال (PSLG). الصور الفاصلة الزمنيه الماخوذه بعد التطبيق الموضعي لفلوريسئين 2%. السائل المائي المنبعث من PSLG يخفف من صبغه اللون الأزرق الداكن أو الأسود الفلوريسئين في البداية ويتحول إلى اللون الأخضر الأصفر الفاتح (علي غرار اختبار سيبيل). (ج) موقف slg المداري (oslg) في جمجمة الأرنب ، والكذب علي مقربه من خط الوسط من الجمجمة (خط منقط) داخل القاطع الخلفي (السهم). تم حقن ايفانز الصبغة الزرقاء في oslg و جفني الغدة الدمعية متفوقة. (د) قسم الانسجه من خلال قناه الإخراج الرئيسية لل oslg محاطه بكميه صغيره من الانسجه الغديه (السهم) وينظر في هذا المقطع العرضي الملطخة الملونة مع الاصباغ الهيوسين والصبغات الماخوذه من خلال الجانب الخلفي (الزماني) من الجفن الأيمن العلوي. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 4
الشكل 4: اعداد الموقع الجراحي. (ا) اللوحة اليسرى العليا: أزاله الفراء الطويل مع المقصات. يتم أزاله جميع الفراء الناعمة المتبقية في وقت لاحق مع كريم مزيل الشعر خفيف. اللوحة اليمني العلوية: المظهر النهائي بعد أزاله الفراء الكاملة التي تسمح بالوسم الجراحي والموجات فوق الصوتية عاليه الجودة من ILG التي سيتم تنفيذها. (ب) تبين العلامات الجراحية المناسبة للمنطقة التي توجد فيها المدارية الصحيحة ؛ في هذا المثال ، تم توصيل الشقوق لأزاله OSLG و ILG لإنشاء شق واحد طويل الأضلاع. يتم الاشاره إلى موقع القاطعة الخلفية بعلامة تجزئه صغيره علي موقع شق المنحني (السهم). يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 5
الشكل 5: أزاله ال OSLG. (ا) يتم اختراق المواقع الجراحية مع مخدر باستخدام مزيج 50:50 من 2 ٪ ليدوكائين مع 1:100000 أدرينالين و 0.5 ٪ bupivacaine ، الذي يتم حقنه في الغطاء العلوي وعلي طول خطوط شق للحد من عدم الراحة اثناء العملية. (ب) يتم استخدام ابره التشريح المجهري كولورادو لشق الجلد وطبقات العضلات السطحية علي طول مواقع الشقوق الجراحية التي تم وضع علامة عليها مسبقا. يتم تطبيق الجر لطيف عبر الجرح للمساعدة في إنشاء الطائرة تشريح. تم اجراء الحروق الصغيرة (السهم) مع ابره كولورادو في نقاط متساوية البعد علي طول خط الشق للمساعدة في أعاده محاذاة الانسجه علي الوجه الأمثل اثناء إغلاق الجرح. (ج) يتم عرض oslg بعد ان تم تعبئة الانسجه الفوقية القواطع الخلفية (السهم). تم التحريض علي كبسوله الغدة. ويمكن لل OSLG ان تسقط من خلال تطبيق الضغط الإنسي علي العالم مما يسهل ازالته. (د) يتم استخدام ملقط لاشراك oslg وبلطف ازالته من وضعها أعمق داخل المدار من خلال القاطع الخلفي. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 6
الشكل 6: أزاله الغدة الدمعية العلوية الشاحبة (PSLG) والقناة الاخراجيه. (ا) بعد النزول من الجفن العلوي ، يتم اشراك الجزء المنتفخ من pslg مع ملقط وتشريح قباله طرسوس باستخدام مقص. الجر المطبق علي PSLG مع ملقط أمر بالغ الاهميه للحفاظ علي الطائرة الجراحية. (ب) يتم تشريح PSLG والقناة الدمعية الرئيسية متفوقة نحو الحافة المدارية باستخدام تشريح حاد والجر المستمر علي الغدة والانسجه اللاصقة للحفاظ علي الطائرة الجراحية المناسبة. تشريح ينبغي المضي قدما إلى النقطة التي تم أزاله OSLG. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 7
الشكل 7: أزاله ال ILG. (ا) يتم التحريض علي الجلد والعضلات السطحية حتى يتم الوصول إلى السطح المنبسط لعظم الزغاتيك أو الجزء السطحي من العضلة المستره. رئيس ILG عاده ما يكون واضحا بوضوح كانتفاخ صغير يقع تحت الحاجز الامامي. (ب) الكبسولة الليفية لل ilg هي المنقوشة مع مقص تعريض ilg. بمجرد الانتهاء من الكبسولة ، يمكن أزاله الأجزاء الأعمق من الغدة بسهوله. (ج) وقد تعرض معظم الجزء الخارجي من راس ilg الذي يقع علي عظم الزجوماتيك وينعكس في الجانب الامامي الذي يظهر العظم الزجوماتيك الأساسي. (د) يؤدي شق الحاجز المداري علي طول الحافة السفلية إلى الكشف عن ذيل ال ilg. (ه) فرع من الشريان السباتي الخارجي يغذي ذيل ilg (السهم). (و) المظهر بعد إغلاق الشقوق الجلدية بعد استئصال القولون الكامل. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 8
الشكل 8: البنغال الوردي تلطيخ سطح القرنية. صوره خارجيه تظهر تلطيخ بارز ، أبرزها علي الربع الأنفي. وضعت جميع العيون التي تمر بعمليه استئصال الغدد اللحمية الكاملة تغييرات مماثله التي كانت واضحة من قبل 1 أسبوع بعد الجراحة واستمرت لمده 6 أسابيع علي الأقل. من الملاحظة ، يظهر منعكس الضوء من فلاش الحلقة تشوه من سطح العين الجافة مما يدل علي مدي جفاف العين يمكن ان تؤثر سلبا علي الرؤية. يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

استئصال الغدة اللحمية
يعني ± SEM; ن = 16 عيون
الاساس الأسبوع الثاني
المسيل للدموع الوقت الفاصل ، ق 60.0 ± 0.0 4.5 ± 1.2
ص < 0.0001
المسيل للدموع الدموع ، mOsm 291.2 ± 3.7 315.3 ± 5.5
ع = 0.001
[سكهمر] دمع اختبار, [م] 18.3 ± 1.3 10.5 ± 1.6
ع = 0.0006
ارتفع بنغال, يعدل [ني] نتيجة 0.0 ± 0.0 4.28 ± 0.6
ص < 0.0001
تعمل مقابل. الخط القاعدي: استئصال الغدة اللحمية: tbut لكن, p < 0.0001; المسيل للدموع اومولريتي ، ص < 0.001 [سكهمر] دمع اختبار, [ب] < 0.0006); وارتفع البنغال.

الجدول 1: المعلمات جفاف العين في الأسبوع بعد الجراحة 2.

Discussion

تصنف الدائرة إلى مجموعتين رئيسيتين علي أساس التاثير علي استقرار الغشاء المسيل للدموع: نقص مائي (انخفاض إنتاج المكون المائي للفيلم المسيل للدموع ؛ ~ 20 ٪ من الدائرة الخاصة) والتبخر (زيادة تبخر الفيلم المسيل للدموع ؛ ~ 50 ٪ من الدائرة). ويظهر حوالي 30% من المرضي الذين يعانون من الدائرة المختلطة (DED). التهاب اليه أساسيه من [دد] إلى اي ه مختلفه مسببات تلاقيت13,14. لدينا نماذج طريقه مائية ناقصه الدائرة.

كما ذكر سابقا ، الخطوات الاولي الهامه في أعاده إنتاج طريقتنا هي تقدير للنقاط الدقيقة لتشريح الغدد الدمعية المدارية (LGs) من الأرنب وتجنب الارتباك من قبل المصطلحات التشريحية المتنوعة والمتضاربة في بعض الأحيان. الأطلس التشريحي بواسطة Popesko وآخرون11 هو دقيق للغاية. بالنسبة لأولئك اقل راحة مع تشريح الأرنب ، وتشريح العينات بالحبال يوفر الفه سهله مع هذه الهياكل والإيدز ازالتها الجراحية في العينات الحية.

وقد قدمت المشورة النقدية بشان السكن الحيواني والتاقلم في المنشور المصاحب لنا12. وتقدم المادة نفسها أيضا تعليقات مفيده لقياس بارامترات الدائرة المستخدمة في كلا الأسلوبين.

علي النقيض من الطريقة السابقة12، وهذا واحد يتطلب مستوي اعلي من المهارات الجراحية بسبب مدي وطبيعة أكثر الغازية من التقنيات اللازمة لأزاله lgs. أكبر خطر خلال هذه الاكتشافات هو النزيف الكارثي الناجم عن أصابه السفن الرئيسية التي هي علي مقربه من LGs مثل فروع الشريان السباتي. يتم تجنب ذلك عن طريق تصور بشكل كاف كل LG وهوامشها داخل المجال الجراحي. وأخيرا ، يمكن ان يؤدي الإفراط في أزاله الغشاء nictitating إلى تدلي الغدة الحرديريان ، والتي يمكن ان تعطل تقييم الفيلم المسيل للدموع.

يجب الحرص علي تقليل كميه الاضطراب الملتحمة مع أزاله PSLG ، وهو جانب جديد من أسلوبنا الذي يحسن استنساخ ويعزز شده الدائرة. فمن المدهش ان من السهل إنشاء الطائرة تشريح وحملها مره أخرى إلى التلال المدارية متفوقة طالما يتم تطبيق الجر علي الانسجه. ومن المطمئن ان تكون قادره علي رؤية علامات الحذر من اقتطاع OSLG; انها تؤكد أزاله كامله من القناة الرئيسية الإفرازات من الغدة.

ويطرح أزاله المجموعة الكاملة من التحديات أيضا. عزل راس الغدة أولا ، لان هذا هو الجزء الأسهل لتصور. يفصل الراس كامله من الغدة نسيج بسهوله من الانسجه محيط; ومع ذلك ، يجب ان تستخدم بعض الرعاية لمنع الاضرار التي لحقت الجيوب الانفيه الوريدية الكبيرة ، والتي تقع الإنسي لرئيس ILG. الذيل من ال [ايلغ] يستطيع بعد ذلك كنت تبعت إلى الخلف بما ان هو يمر تحت العظمة [زيجومتيك]. معظم الذيل من السهل عزل. ومع ذلك ، فان الجانب الخلفي الأكثر من الذيل يمكن ان يكون أكثر تحديا بسبب التشريح المتغير وقربه من فرع متوسط الحجم من الشريان السباتي. تشريح دقيق ينبغي ان تسمح لجميع هوامش ILG ان ينظر اليها بوضوح ، مما يسهل ازالته كامله. وينبغي ان يكون المحقق علي استعداد لحمل تشريح أكثر متفوقة في الحالات التي ينتهي فيها ذيل الغدة تحت canthus الجانبية ، كما هو موضح في المناقشة السابقة لتشريح الغدد الدمعية. ومن الجدير بالذكر ان المؤلفين لم يتمكنوا أبدا من تحديد اي جزء من ال OSLG عند تشريح ال ILG من خلال شق الطريق المائل علي طول العالم الصدغي والسفلي. علي الرغم من ان هذا قد يكون من الممكن من الناحية الفنية ، وهذا النهج الجراحي يحمل خطرا كبيرا جدا لنزيف خطير. الاقتراب من OSLG من خلال القاطع الخلفي يثبت أكثر أمانا.

ويمكن رؤية القناة الاخراجيه من ILG اختراق من خلال الطائرة السفلية الفاسية كما انه يمر في الملتحمة fornix السفلي. في بعض الأحيان ، ينظر إلى اللوصات الصغيرة من الانسجه التي تظهر غدا هنا أيضا ويمكن ازالتها بعناية.

ومن المفيد جدا للحفاظ علي ترتيب من LG استئصال كما هو مبين هنا. ان ال [ايلغ] يكون أزلت اولي, يصبح العزلة من ال [اسLG] تقنيا أكثر جدا يصعب. والسبب الرئيسي هو انه ، بعد أزاله ILG ، لا يمكن لل OSLG ان تسقط بسهوله التالي يتم تحديدها.

ميزه كبيره من نموذجنا هو انه يمكن ان يكون "وحدات". وبعبارة أخرى ، يمكن معايره درجه الدائرة التي يسببها استئصال داكريونوادانا لخدمه الاحتياجات التجريبية. علي سبيل المثال ، فان استئصال جميع LGs يسبب القصوى دائره الخدمة الخاصة ، ولكن استئصال فقط من SLG من شانه ان يسبب أخف شكل من دائره الخدمة الخاصة واستئصال فقط من ILG من شانه ان يولد المرض من شده المتوسطة.

نهجنا ، الذي يلخص الحدث الباثولوجي المتميز لانخفاض إنتاج المسيل للدموع يوفر مزايا اضافيه مقارنه بالطرق المبلغ عنها بالفعل. لفتره وجيزة ، لا نموذج الجراحية الأخرى القضاء علي الإنتاج المسيل للدموع من قبل جميع lgs المدارية5،6،7،15،16؛ بما في ذلك [برموموتيك] [دغرميل] من ال [لغس]17, وإخماد دوائية من دمع إنتاج18,19, مع المتاخره اثنان يتلقى هم [وب-ردف] تاثيرات بما ان [مربكه] مهمة. وأخيرا ، فان هذا النموذج يقلل من التحيز الرئيسي الذي يعتمد علي المحقق ، اي الاستئصال غير المكتمل لل LGs ، حيث ان التقنية الجراحية تتيح لهم التصور الكامل ؛ ويساعد هذا من حقيقة انه لا الأرقاء ، بخلاف الحذر ، مطلوب.

وينبغي ان يكون المحقق مدركا ان الاستئصال الكامل لجميع المدارات المدارية لا يولد غيابا كاملا للدموع ، وعلي سبيل المثال ، لا ينبغي توقع قيم الاختبار المسيل للدموع التي تقترب من الصفر في Schirmer. ويرجع ذلك إلى حقيقة ان هناك دائما مصادر أخرى من السائل المسيل للدموع مثل lgs التبعي من وولفرينج و krause والبلازما تسرب من السفن الملتحمة20,21,22. من وجهه نظر تجريبية ، وهذا ينبغي ان ينظر اليه علي انه جانب إيجابي من الأسلوب كما انه يحافظ علي سطح العين. ان الجفاف الكامل سيدمر تماما القرنية التي تبطل فائده النموذج. الاضافه إلى ذلك ، يوفر هذا النموذج ، في تجسيده الحالي ، فرصه ممتازة لدراسة هذه أليات التعويضية ونقل السوائل عبر هذه المقصورات الصغيرة.

في الختام ، المعروضة هنا هي تفاصيل طريقه جديده ومتعددة الاستعمالات لحمل الدائرة التي تعاني من نقص مائي والتي تفسح الفرصة لدراسة فسيولوجيا المسيل للدموع ، والتسبب في الدائرة ودراسة العوامل العلاجية التي يتم تطويرها لهذا المؤشر.

Disclosures

ويعلن المؤلفون عدم وجود مصالح متنافسة باستثناء BR الذي لديه مركز الأسهم في Medicon الصيدلة ، وشركه Apis التداوي ، LLC ؛ و LH ، وهو موظف في Medicon الصيدلة ، وشركه مع مركز الأسهم في Apis التداوي ، LLC.

Acknowledgments

ونحن نعترف بالدعم المالي من منحه الفرص البحثية المستهدفة من مدرسه جامعه ستوني برؤاك للطب ومنحه بحثيه من Medicon الصيدلة ، وشركه ، Setauket ، NY. نشكر ميشيل ماكتيرن لدعم التحرير.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
acepromazine, Aceproinj Henry Schein Animal Health, Dublin, OH NDC11695-0079-8 0.1ml/kg subcutaneously injection for rabbit sedation
anesthesia vaporizer VetEquip, Pleasanton, CA Item # 911103 Protocol 4.8
animal restraining bag Henry Schein Animal Health, Dublin, OH Jorvet J0170 Use appropriately sized bag.
bupivacaine, 0.5% Hospira Inc, Lake Forest IL NDC: 0409-1162-02 Mixed 50:50 with 2% lidocaine with 1:100,000 epinephrine for infiltration of incision sites, protocol 5.1
buprenorphine Henry Schein Animal Health, Dublin, OH 0.01 mg/kg, for postprocedural care, 6.1.4
cautery unit, high-temperature, battery-powered Medline Industries Inc, Northfield, IL REF ESCT001 Keep on hand in case of bleeding, protocol 2.7
clipper, Wahl Mini Arco Henry Schein Animal Health, Dublin, OH No. 022573 Cordless shears for fur removal, protocol 4.2
Colorado needle Stryker Craniomaxillofacial, Kalamazoo, MI N103A Use with electrosurgical unit to make incisions, protocol 5.1 & 5.3
electrosurgical unit with monopolar cautery plate Valleylab, Boulder, CO Force FXc Use with electrosurgical unit to make incisions, protocol 5.1 & 5.3
fluorescein, Ak-Fluor 10% AKRON, Lake Forest, IL NDC17478-253 Dilute to 0.2% with PBS to measure TBUT, measurement of dry eye parameters, protocol 3.1
foceps, curved dressing Bausch and Lomb (Storz), Bridgewater, NJ Storz E1406 delicate serrated dressing forceps
forceps, 0.3 Bausch and Lomb (Storz), Bridgewater, NJ ET6319 For removal of nictating membrane, protocol 2.5
forceps, Bishop Harmon Bausch and Lomb (Storz), Bridgewater, NJ E1500-C Use toothed forceps for dacryoadenectomy, protocol 5.1 & 5.2
hair remover lotion, Nair Widely available Softening Baby oil Dipilitory cream for sensitive skin, protocol 4.2
isoflurane Henry Schein Animal Health, Dublin, OH 29405 Possible alternative sedation, protocol 4.7
IV catheter, Terumo Surflo ETFE 24-gauge Terumo, Tokyo, Japan; available from Fisher Sci., VWR, McKesson, etc. SR-OX2419CA 25-gauge for smaller rabbits; protocol 4.6
ketamine Henry Schein Animal Health, Dublin, OH NDC 11695-0701-1; NADA 200-055 15 mg/kg, protocol 4.7
ketoprofen Hospira, Inc., Lake Forest, IL 3 mg/kg, for postprocedural care, 6.1.4
laryngeal mask airway Docsinnovent Ltd, London, UK Vgel R3 Protocol 4.8
lid speculum, wire Bausch and Lomb (Storz), Bridgewater, NJ Barraquer SUH01 For removal of nictating membrane, protocol 2.4
lidocaine 2% with epinephrine 1:100,000; 50:50 mixture Hospira Inc, Lake Forest IL NDC 0409-3182-02 Pre-treat before removal of nictating membranes, protocol 2.4
lidocaine, preservative-free Sigma-Aldrich, St. Louis, MO L5647 1% in PBS for anesthesia agent, for application to eye, protocol 2.4
micropipette Eppendorf Research Plus 100 uL For application of preservative-free lidocaine to eye, protocol 2.4
micropipette tips World Wide Medical Products 41071052 For application of preservative-free lidocaine to eye, protocol 2.4
monitoring device, multi-parameter SurgiVet, Waukesha, WI V9201 For monitoring of vitals, protocol 4.9
needle, 26-gauge BD, Franklin Lakes, NJ REF 305115 For injection of lidocaine/epinephrine, protocol 2.3 & 2.5
needle, 30-gauge BD, Franklin Lakes, NJ REF 305106 For infiltration of incision sites; syringe and needle size are not critical, protocol 5.1
osmolarity tips TearLab Corp., San Diego, CA #100003 REV R Measure tear osmolarity measurement of dry eye parameters, protocol 3.1
osmometer, TearLab TearLab Corp., San Diego, CA Model#200000W REV A Measure tear osmolarity, measurement of dry eye parameters, protocol 3.1
povidone-iodine solution Medline Industries Inc, Northfield, IL PVP Prep Solution, NDC: 53329-939-04, REF MDS 093944 To maintain sterile field, protocol 4.11
rabbit, New Zealand White Charles River Labs, Waltham, MA (NZW) 2-3 kg Research animals
Rose bengal stain Amcon Laboratories Inc., St. Louis, MO NDC51801-004-40 1% in PBS, for staining the ocular surface, measurement of dry eye parameters, protocol 3.1
saline, normal B. Braun Medical, Irvine, CA REF R5200-01 For postprocedural care, protocol 6.1.3
Schirmer Tear Test strips Eaglevision, Katena products. Denville, NJ AX13613 Measure tear production, measurement of dry eye parameters, protocol 3.1
scissors, Vannas McKesson Medical-Surgical, San Francisco, CA Miltex 2-130 Capsulotomy scissors for dacryoadenectomy, protocol 5.1 & 5.2
scissors, Westcott tenotomy McKesson Medical-Surgical, San Francisco, CA Miltex 18-1480 For removal of nictating membrane, protocol 2.7
sedation gas mask DRE Veterinary, Louisville, KY #1381 Possible alternative sedation, protocol 4.7
surgical marking pen Medical Action Industries, Arden, ND REF 115 Protocol 4.2
sutures, 5-0 Mersilene Ethicon US, LLC Ethylene terephthalate sutures, used for deep connective tissue closure, protocol 5.3.11
sutures, Vicryl 6-0 Ethicon US, LLC Polyglactin 910 sutures, used for superficial muscle and skin closure, protocol 5.3.11
syringe, 1 cc BD, Franklin Lakes, NJ ref 309659 For injection of lidocaine/epinephrine, protocol 2.3 & 2.5
syringe, 5 cc BD, Franklin Lakes, NJ REF 309603 For infiltration of incision sites; syringe and needle size are not critical, protocol 5.1
tissue forceps, 0.8mm Graefe Roboz Surgical Store, Gaithersburg, MD RS-5150 Curved Weck forceps
topical antibiotic ointment (neomycin, polymyxin, bacitracin, and hydrocortisone) Bausch and Lomb, Tampa, FL NDC 24208-785-55 Applied after removal of nictating membrane, protocol 2.8, and for postprocedural care, protocol 6.1.2
ultrasound gel Parker Laboratories, Inc., Fairfield, NJ Aquasonic 100 To ensure electrical contact with monopolar cautery plate, protocol 4.5
xylazine Henry Schein Animal Health, Dublin, OH NADA: 139-236 1 mg/kg, protocol 4.7

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Gillan, W. D. H. Tear biochemistry: A review. South African Optometrist. 69, (2), 100-106 (2010).
  2. Conrady, C. D., Joos, Z. P., Patel, B. C. Review: The Lacrimal Gland and Its Role in Dry Eye. Journal of Ophthalmology. 2016, 7542929 (2016).
  3. Schechter, J. E., Warren, D. W., Mircheff, A. K. A lacrimal gland is a lacrimal gland, but rodents' and rabbits' are not human. Ocular Surface. 8, (3), 111-134 (2010).
  4. Shinomiya, K., Ueta, M., Kinoshita, S. A new dry eye mouse model produced by exorbital and intraorbital lacrimal gland excision. Scientific Reports. 8, (1), 1483 (2018).
  5. Bhattacharya, D., et al. Tear Production After Bilateral Main Lacrimal Gland Resection in Rabbits. Investigative Ophthalmology and Visual Science. 56, (13), 7774-7783 (2015).
  6. Chen, Z. Y., Liang, Q. F., Yu, G. Y. Establishment of a rabbit model for keratoconjunctivitis sicca. Cornea. 30, (9), 1024-1029 (2011).
  7. Li, N., et al. Establishment of the mild, moderate and severe dry eye models using three methods in rabbits. BioMed Central Ophthalmology. 13, 50 (2013).
  8. Honkanen, R., et al. A New Rabbit Model of Chronic Dry Eye Disease Induced by Complete Surgical Dacryoadenectomy. Current Eye Research. 1-10 (2019).
  9. Nisha, S., Deepak, K. An Insight Into Ophthalmic Drug Delivery System. International Journal of Pharmaceutical Studies and Research. 3, (2), 9-13 (2012).
  10. Davis, F. A. The Anatomy and Histology of the Eye and Orbit of the Rabbit. Transactions of the American Ophthalmological Society. 27, (1929).
  11. Popesko, P., Rajitova, V., Horak, J. Rabbit - Guinea Pig. A Colour Atlas of the Anatomy of Small Laboratory Animals. 1, Saunders. Philadelphia, PA. (1992).
  12. Honkanen, R. A., Huang, L., Rigas, B. A rabbit model of aqueous-deficient dry eye disease induced by concanavalin A injection into the lacrimal glands: Application to drug efficacy studies. Journal of Visualized Experiments. e59631 (2019).
  13. Wei, Y., Asbell, P. A. The core mechanism of dry eye disease is inflammation. Eye & Contact Lens. 40, (4), 248-256 (2014).
  14. Pflugfelder, S. C., de Paiva, C. S. The Pathophysiology of Dry Eye Disease: What We Know and Future Directions for Research. Ophthalmology. 124, (11S), S4-S13 (2017).
  15. Gilbard, J. P., Rossi, S. R., Gray, K. L. A new rabbit model for keratoconjunctivitis sicca. Investigative Ophthalmology and Visual Science. 28, (2), 225-228 (1987).
  16. Odaka, A., et al. Efficacy of retinol palmitate eye drops for dry eye in rabbits with lacrimal gland resection. Clinical Ophthalmology. 6, 1585-1593 (2012).
  17. Toshida, H., Nguyen, D. H., Beuerman, R. W., Murakami, A. Evaluation of novel dry eye model: preganglionic parasympathetic denervation in rabbit. Investigative Ophthalmology and Visual Science. 48, (10), 4468-4475 (2007).
  18. Burgalassi, S., Panichi, L., Chetoni, P., Saettone, M. F., Boldrini, E. Development of a simple dry eye model in the albino rabbit and evaluation of some tear substitutes. Ophthalmic Research. 31, (3), 229-235 (1999).
  19. Xiong, C., et al. A rabbit dry eye model induced by topical medication of a preservative benzalkonium chloride. Investigative Ophthalmology and Visual Science. 49, (5), 1850-1856 (2008).
  20. Shiue, M. H., et al. Pharmacological modulation of fluid secretion in the pigmented rabbit conjunctiva. Life Science. 66, (7), 105 (2000).
  21. Li, Y., et al. Rabbit conjunctival epithelium transports fluid, and P2Y2(2) receptor agonists stimulate Cl(-) and fluid secretion. American Journal of Physiology: Cell Physiology. 281, (2), C595-C602 (2001).
  22. Dartt, D. A. Regulation of mucin and fluid secretion by conjunctival epithelial cells. Progress in Retinal and Eye Research. 21, (6), 555-576 (2002).
إنشاء نموذج العين الجافة الشديدة باستخدام استئصال الددريوادادينال الكامل في الأرانب
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Honkanen, R. A., Huang, L., Huang, W., Rigas, B. Establishment of a Severe Dry Eye Model Using Complete Dacryoadenectomy in Rabbits. J. Vis. Exp. (155), e60126, doi:10.3791/60126 (2020).More

Honkanen, R. A., Huang, L., Huang, W., Rigas, B. Establishment of a Severe Dry Eye Model Using Complete Dacryoadenectomy in Rabbits. J. Vis. Exp. (155), e60126, doi:10.3791/60126 (2020).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter