हम खुबानी की परागण आवश्यकताओं को स्थापित करने के लिए एक पद्धति प्रस्तुत करते हैं(प्रूनस आर्मेनियाका एल.) ऐसी खेती जो पीसीआर विश्लेषण द्वारा एस-जीनोटाइप की पहचान के साथ फ्लोरेसेंस माइक्रोस्कोपी द्वारा आत्म-(इन) अनुकूलता के निर्धारण को मिलाकर है।
रोसासी में आत्म-असंगति एक गेमटोफाइटिक सेल्फ-इनकंकेटिबिलिटी सिस्टम (जीएसआई) द्वारा निर्धारित की जाती है जो मुख्य रूप से मल्टीलेलिक लोकस एस द्वारा नियंत्रित होती है। खुबानी में, आत्म-और अंतर-और अंतर-अनुकूलता संबंधों का निर्धारण तेजी से महत्वपूर्ण है, क्योंकि एक महत्वपूर्ण संख्या में नई खेती जारी करने के परिणामस्वरूप अज्ञात परागण आवश्यकताओं के साथ खेती में वृद्धि हुई है। यहां, हम एक ऐसी पद्धति का वर्णन करते हैं जो पीसीआर विश्लेषण द्वारा एस-जीनोटाइप की पहचान के साथ हाथ-परागण और माइक्रोस्कोपी द्वारा आत्म-(इन)अनुकूलता के दृढ़ संकल्प को जोड़ती है। स्व-(में) अनुकूलता निर्धारण के लिए, प्रत्येक खेती से गुब्बारे के चरण में फूल क्षेत्र में एकत्र किए गए थे, प्रयोगशाला में हाथ से परागण, निश्चित, और फ्लोरेसेंस माइक्रोस्कोपी के तहत पराग ट्यूब व्यवहार के अवलोकन के लिए एनीलिन नीले रंग के साथ दाग। खेती के बीच असंगति संबंधों की स्थापना के लिए, प्रत्येक खेती से डीएनए युवा पत्तियों से निकाला गया था और पीसीआरद्वारा एस-एलील्स की पहचान की गई थी । यह दृष्टिकोण असंगति समूहों की स्थापना और खेती के बीच असंगति संबंधों को स्पष्ट करने की अनुमति देता है, जो नए बगीचों के डिजाइन में उपयुक्त परागणकों का चयन करने और प्रजनन कार्यक्रमों में उपयुक्त माता-पिता का चयन करने के लिए एक मूल्यवान जानकारी प्रदान करता है।
आत्म-असंगति आत्म-परागण को रोकने और आउटक्रॉसिंग1को बढ़ावा देने के लिए फूलों के पौधों की एक रणनीति है। रोसासी में, यह तंत्र एक गेमटोफाइटिक सेल्फ-इनकंकेटिबिलिटी सिस्टम (जीएसआई) द्वारा निर्धारित किया जाता है जो मुख्य रूप से मल्टीलेलिक लोकस एस2 द्वारानियंत्रितहोता है। शैली में, RNase जीन एस-एसtylar निर्धारक, एक RNase3,जबकि एक एफ बॉक्स प्रोटीन, जो एसपराग निर्धारक निर्धारित करता है, SFB जीन4द्वारा संहिताबद्ध है । आत्म-असंगति बातचीत ओव्यूल5,,6के निषेचन को रोकने वाली शैली के साथ पराग ट्यूब विकास के अवरोध के माध्यम से होती है।
खुबानी में, पिछले दो दशकों में दुनिया भर में एक किस्म का नवीकरण किया गया है7,8। विभिन्न सार्वजनिक और निजी प्रजनन कार्यक्रमों से नई खेती की एक महत्वपूर्ण संख्या की इस शुरूआत के परिणामस्वरूप अज्ञात परागण आवश्यकताओं के साथ खुबानी खेती की वृद्धि हुई है8।
खुबानी में परागण आवश्यकताओं को निर्धारित करने के लिए विभिन्न तरीकों का उपयोग किया गया है। क्षेत्र में, बंदी वृक्षों या नपुंसक फूलों में नियंत्रित परागण द्वारा आत्म-(इन) अनुकूलता स्थापित की जा सकती है और बाद में फल सेट9,10, 11,,,12के प्रतिशत को रिकॉर्ड किया जा11सकताहै। इसके अलावा, प्रयोगशाला में फूलों की अर्ध-इन वीवो संस्कृति और फ्लोरेसेंस माइक्रोस्कोपी,,8,,13, 14, 15, 16,,14,17के तहत पराग ट्यूब व्यवहार के विश्लेषण द्वारानियंत्रितपरागण किए गए हैं।17 हाल ही में, पीसीआर विश्लेषण और अनुक्रमण जैसी आणविक तकनीकों ने आरएनएनई और एसएफबी जीन18, 19,19के अध्ययन के आधार पर असंगति संबंधों के लक्षण वर्णन की अनुमति दी है। खुबानी में, 33 एस-एलील्स(एस1,से एस20,एस,22 से एस S30,एस52, एस53, एसवी,22 एस, एसएक्स)की सूचना दी गई है,जिसमें स्व-अनुकूलता(एससी)12, 18, 20,21,,2122,,2023, 24से संबंधित एक एलील शामिल हैं।,,24 अब तक, एस– जीनोटाइप 8 ,9, 17 , 25 , 26 ,,,278केअनुसार इस प्रजाति में,1726असंगति समूहों को स्थिर किया गया है ।26 एक ही एस-एलील्सके साथ खेती अंतर-असंगत हैं, जबकि कम से कम एक अलग एस-एलीलके साथ खेती और, नतीजतन, विभिन्न असंगत समूहों में आवंटित, अंतर-संगत हैं।
खुबानी खेती की परागण आवश्यकताओं को परिभाषित करने के लिए, हम एक पद्धति का वर्णन करते हैं जो खुबानी खेती में पीसीआर विश्लेषण द्वारा एस-जीनोटाइप की पहचान के साथ फ्लोरेसेंस माइक्रोस्कोपी द्वारा आत्म-(इन)अनुकूलता के दृढ़ संकल्प को जोड़ती है। यह दृष्टिकोण असंगति समूहों की स्थापना और खेती के बीच असंगति संबंधों को स्पष्ट करने की अनुमति देता है ।
परंपरागत रूप से, अधिकांश वाणिज्यिक खुबानी यूरोपीय खेती स्वयं संगत३६थे । फिर भी, पिछले दशकों में प्रजनन कार्यक्रमों में माता-पिता के रूप में उत्तरी अमेरिकी आत्म-असंगत खेती के उपयोग के परिणामस…
The authors have nothing to disclose.
इस शोध को मिनिस्टरियो डी सिन्सिया, इनोवासिओन वाई यूनीवर्सिडेस-यूरोपियन रीजनल डेवलपमेंट फंड, यूरोपियन यूनियन (AGL2016-77267-R, और AGL2015-74071-JIN द्वारा वित्त पोषित किया गया था); इंस्टीट्यूटो नैसिनल डी इन्वेस्टिगासिओन वाई टेक्नोलोगिया एगरिया वाई एलिमेंटेरिया (RFP2015-00015-00, RTA2017-00003-00); गोबिएर्नो डी अरगोन-यूरोपियन सोशल फंड, यूरोपियन यूनियन (ग्रुपो कंसोलिडाडो A12_17R), फंडासिओन बायोडाइवर्सिड, और एग्रोसेगुरो एसईए
Agarose D1 Low EEO | Conda | 8010.22 | |
BIOTAQ DNA Polymerase kit | Bioline | BIO-21060 | |
Bright field microscope | Leica Microsystems | DM2500 | |
CEQ System Software | Beckman Coulter | ||
DNeasy Plant Mini Kit | QIAGEN | 69106 | |
dNTP Set, 4 x 25 µmol | Bioline | BIO-39025 | |
GenomeLab DNA Size Standard Kit – 400 | Beckman Coulter | 608098 | |
GenomeLab GeXP Genetic Analysis System | Beckman Coulter | ||
GenomeLab Separation Buffer | Beckman Coulter | 608012 | |
GenomeLab Separation Gel LPA-1 | Beckman Coulter | 391438 | |
HyperLadder 100bp | Bioline | BIO-33029 | |
HyperLadder 1kb | Bioline | BIO-33025 | |
Image Analysis System | Leica Microsystems | ||
Molecular Imager VersaDoc MP 4000 system | Bio-Rad | 170-8640 | |
NanoDrop One Spectrophotometer | Thermo Fisher Scientific | 13-400-518 | |
pH-Meter BASIC 20 | Crison | ||
Phusion High-Fidelity PCR Kit | Thermo Fisher Scientific | F553S | |
Power Pack P 25 T | Biometra | ||
Primer Forward | Isogen Life Science | ||
Primer Reverse | Isogen Life Science | ||
Quantity One Software | Bio-Rad | ||
Stereoscopic microscope | Leica Microsystems | MZ-16 | |
Sub-Cell GT | Bio-Rad | ||
SYBR Safe DNA Gel Stain | Thermo Fisher Scientific | S33102 | |
T100 Thermal Cycler | Bio-Rad | 1861096 | |
Taq DNA Polymerase | QIAGEN | 201203 | |
Vertical Stand Autoclave | JP Selecta |