Summary

Akupunktur i en rottemodell av astma

Published: August 25, 2020
doi:

Summary

En høy plattform kan fikse rotter uten begrensning og helt avsløre akupunktene på ryggen under akupunkturmanipulasjon. Denne artikkelen beskriver metoder for fabrikasjon av den høye plattformen, etablerer en rottemodell av astma og måler endringer i åndedrettsfunksjonen ved hjelp av et ikke-invasivt og sanntids plethysmografisystem (WBP).

Abstract

En høy plattform kan fikse rotter uten begrensning og helt avsløre akupunktene på ryggen under akupunkturmanipulasjon. Denne artikkelen beskriver metoder for fabrikasjon av den høye plattformen, etablerer en rottemodell av astma og måler endringer i åndedrettsfunksjonen ved hjelp av et ikke-invasivt og sanntids plethysmografisystem (WBP).

Introduction

Astma er en kronisk sykdom preget av bronkokonstriksjon og luftveis hyperrespons1. Omtrent 339,4 millioner mennesker over hele verden er diagnostisert med astma2. Utbredelsen av astma øker globalt, med 100 millioner nye tilfeller forventet i løpet av det neste tiåret3. Inhalerte kortikosteroider og langtidsvirkende β2-agonisterkontrollerer ikke effektivt symptomene til alle pasienter4. Derfor har bruk av alternative terapier som akupunktur for å behandle astma fått økt oppmerksomhet5. En effektiv metode for behandling av astma er å nåle GV14 (Dazhui), bilateral BL12 (Fengmen) og bilateral BL13 (Feishu)6. Akupunktur reduserer nivåene av sekretorisk immunoglobulin A (SIgA) betydelig i spytt og nesesekretjoner av pasienter med allergisk astma og reduserer perifere blodeosinofiler med en total effektiv hastighet på 85%6. Akupunktur ved BL13 og ST36 (Zusanli) hos mus med kronisk astma reduserer nivået av IL-17 med 40% og reduserer den glatte muskeltykkelsen med 33% sammenlignet med ovalbumingruppen (OVA), og lindrer dermed betennelsessymptomer7,8. Imidlertid er mekanismen for akupunkturbehandling for astma ikke helt klar.

Dyremodeller er et viktig verktøy for astmaforskning9 fordi dyremodellen kan brukes til kontinuerlig måling av åndedrettsfunksjon for å vurdere effektiviteten av astmabehandlingen10. I mellomtiden krever studier av patofysiologien til astma testprøver, inkludert prøver fra luftrøret, lunge og bronkoalveolar lavage for å verifisere endringer i nivåene av nøkkelfaktorer11. Rottemodeller av astma brukes ofte til å vurdere astma patofysiologi fordi de produserer langvarige luftveisresponser og viser umiddelbare og senfase luftveisresponser12. På grunn av gjentatt eksperimentell stimulering blir rottene imidlertid ofte irritabel. Derfor er det nødvendig med en passende metode for å fikse rotter. Vanlige metoder for rottefiksering inkluderer anestesi og binding13. Selv om anestesimetoden gir bedre eksponering av akupunktene, kan det påvirke nerveledning og til slutt påvirke de eksperimentelle resultatene14. Bindingsmetoden induserer ikke de samme fysiologiske effektene som anestesi, men begrensede rotter vil oppleve skjelettmuskulaturspenning. Nålen kan heller ikke lett nå den angitte posisjonen15. Her introduserer vi en høy plattform som kan brukes til å fikse rotter uten å begrense dem og fullt ut eksponere akupunktene på baksiden. Rottene kan plasseres på den høye plattformen under administrering av akupunktur. Den høye plattformen er i stand til å imøtekomme rotten bare mens den står, og da den er plassert en viss avstand fra bakken, vil rottene ikke bevege seg på grunn av frykt for høyder16.

Denne artikkelen beskriver i detalj fabrikasjonen av den høye plattformen, etableringen av en rottemodell av astma, driften av å trenge en rotte på den høye plattformen og måling av åndedrettsfunksjon ved hjelp av et helkropps plethysmografi (WBP) system.

Protocol

Alle dyreforsøk ble gjennomgått og godkjent av Komiteen for etikk for dyreforsøk ved Shanghai University of Traditional Chinese Medicine (Etisk klareringsnummer PZSHUTCM190308020). 1. Fabrikasjon av den høye plattformen Sett lengden og bredden på støtteenheten til 86 cm x 17 cm (Figur 1). Fest tilkoblingsenheten vertikalt til støtteenheten. Tilkoblingsenheten skal være ca. 30 cm lang for å forhindre a…

Representative Results

Med akupunktur på GV14, bilaterale BL12 og bilaterale BL13-poeng opprettholder rotten en utsatt posisjon. Rotten kan bare vri hodet til utsiden og ikke innsiden fordi en retning er blokkert med et trebrett (figur 5). Etter hvert som methacholinekonsentrasjonen økte, viser Penh en økende trend og vekstraten øker gradvis. Ved konsentrasjoner på 3,125 mg/ml, 6,25 mg/ml, 12,5 mg/ml, 25 mg/ml og 50 mg/ml økte Penh med 18,40 % ± 10,70 %, 27,55 % ± 26,30 %, 88,10…

Discussion

GV14, bilaterale BL12 og bilaterale BL13-akupunkter som brukes i denne studien ligger på baksiden, og dermed er den høye plattformen egnet for å fikse rotter. I andre studier bør en tilstrekkelig fikseringsmetode velges i henhold til posisjonen til akupunktene15. For akupunkter på magen kan rotten plasseres nedover i en svart kjegle (ligner en konditorpose som brukes av bakere)17. En kjede er festet til selvbeherskelseskjeglen for fiksering, og bakbenet på rotten er o…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Dette arbeidet ble støttet av National Natural Science Foundation of China (nr. 81922076, 81973951, 81873373), Byggeprosjekt for samarbeidsinnovasjon av shanghai (Nei. ZYJKFW201811010, ZYJKFW201701005).

Materials

0.3 mm x 13.0 mm acupuncture needle China Suzhou Medical Device Factory
Al(OH)3 American Thermo 77161
Compression nebulizer Jiangsu Lude Medical Electronics Co., Ltd. NB-212C
Fine Pointe V2.0 American Buxco
Laboratory gas drying unit American Drierite 26800
Methacholine American Sigma MKCF6054
Ovalbumin American Sigma A5503-25G
Phosphate Buffer solution (1x) Gelifesciences SH30256.01
Seal box IRIS Corporation of Japan
Whole-body plethysmography respiratory function measurement system American Buxco

References

  1. Papi, A., Brightling, C., Pedersen, S. E., Reddel, H. K. Asthma. Lancet. 391 (10122), 783-800 (2018).
  2. . Global strategy for asthma management and prevention Available from: https://ginasthma.org/gina-reports/ (2019)
  3. Enilari, O., Sinha, S. The Global Impact of Asthma in Adult Populations. Annals of Global Health. 85 (1), (2019).
  4. . Global strategy for asthma management and prevention Available from: https://ginasthma.org/gina-reports/ (2020)
  5. Zhuang, Y., Xing, J. J., Li, J., Zeng, B. Y., Liang, F. R. History of acupuncture research. International Review of Neurobiology. 111, 1-23 (2013).
  6. Yang, Y. Q., et al. Considerations for use of acupuncture as supplemental therapy for patients with allergic asthma. Clinical Reviews in Allergy & Immunology. 44 (3), 254-261 (2013).
  7. Nurwati, I., et al. Reduction of interleukin-17 level by acupuncture at Feishu (BL13) is strengthened by acupuncture at Zusanli (ST36) in a mouse model of chronic asthma: An experimental study. Medical Acupuncture. 27 (4), 278-282 (2015).
  8. Nurwati, I., et al. Improvement in inflammation and airway remodelling after acupuncture at BL13 and ST36 in a mouse model of chronic asthma. Acupuncture in Medicine. 37 (4), 228-236 (2019).
  9. Reddy, A. T., Lakshmi, S. P., Reddy, R. C. Murine model of allergen induced asthma. Journal of Visualized Experiments. (63), e3771 (2012).
  10. Zhou, D. D., et al. Metallothionein-2 is associated with the amelioration of asthmatic pulmonary function by acupuncture through protein phosphorylation. Biomedicine & Pharmacotherapy. 123, 109785 (2020).
  11. Yin, L. M., et al. Transgelin-2 as a therapeutic target for asthmatic pulmonary resistance. Science Translational Medicine. 10 (427), (2018).
  12. Shin, Y. S., Takeda, K., Gelfand, E. W. Understanding asthma using animal models. Allergy Asthma & Immunology Research. 1 (1), 10-18 (2009).
  13. Cui, K. M., et al. Electro-acupuncture relieves chronic visceral hyperalgesia in rats. Neuroscience Letters. 376 (1), 20-23 (2005).
  14. Tobin, J. R., Martin, L. D., Breslow, M. J., Traystman, R. J. Selective anesthetic inhibition of brain nitric oxide synthase. Anesthesiology. 81 (5), 1264-1269 (1994).
  15. Dimitrov, N., Sivrev, D., Atanasova, D. Method of rat immobilization during experimental acupuncture. Scripta Scientifica Medica. 45, 105-108 (2013).
  16. Aguilar, R., et al. emotional reactivity and fear of heights: a factor analytic map from a large F(2) intercross of Roman rat strains. Brain Research Bulletin. 57 (2), 17-26 (2002).
  17. Lai, X., et al. Proteomic response to acupuncture treatment in spontaneously hypertensive rats. PloS One. 7 (9), 44216 (2012).
  18. Niu, C., et al. A novel uni-acupoint electroacupuncture stimulation method for pain relief. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2011, 209879 (2011).
  19. McFadden, E. R., Luparello, T., Lyons, H. A., Bleecker, E. The mechanism of action of suggestion in the induction of acute asthma attacks. Psychosomatic Medicine. 31 (2), 134-143 (1969).
  20. Savov, J. D., et al. Ozone-induced acute pulmonary injury in inbred mouse strains. American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 31 (1), 69-77 (2004).

Play Video

Cite This Article
Zhou, D., Zhang, G., Zhao, Q., Cheng, M., Lu, J., Wang, Y., Xu, Y., Chen, Y., Yang, Y., Yin, L. Acupuncture in a Rat Model of Asthma. J. Vis. Exp. (162), e61762, doi:10.3791/61762 (2020).

View Video