Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

Análise immunoblot

doi: 10.3791/759 Published: June 20, 2008

Summary

Immunoblotting (western blot) é um ensaio rápido e sensível para a detecção e caracterização de proteínas que funciona através da exploração da especificidade inerente reconhecimento antígeno-anticorpo. Este vídeo fornece protocolos para separação de proteínas, proteínas blotting em membranas, immunoprobing e visualização usando substratos cromogênicos ou quimioluminescente.

Abstract

Immunoblotting (western blot) é um ensaio rápido e sensível para a detecção e caracterização de proteínas que funciona através da exploração da especificidade inerente reconhecimento antígeno-anticorpo. Envolve a solubilização e separação eletroforética de proteínas, glicoproteínas, ou lipopolissacarídeos por eletroforese em gel, seguido por transferência quantitativa e irreversível ligação a nitrocelulose, PVDF, ou nylon. A técnica de immunoblotting foi útil na identificação de antígenos específicos reconhecidos por anticorpos monoclonais ou policlonais e é altamente sensível (1 ng de antígeno pode ser detectado). Esta unidade fornece protocolos para separação de proteínas, proteínas blotting em membranas, immunoprobing e visualização usando substratos cromogênicos ou quimioluminescente.

Protocol

O protocolo de texto completo para essa abordagem experimental está disponível em protocolos atuais em Biologia Molecular

Análise immunoblot
Play Video
PDF DOI

Cite this Article

Gallagher, S., Chakavarti, D. Immunoblot Analysis. J. Vis. Exp. (16), e759, doi:10.3791/759 (2008).More

Gallagher, S., Chakavarti, D. Immunoblot Analysis. J. Vis. Exp. (16), e759, doi:10.3791/759 (2008).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter