Summary

El análisis por inmunotransferencia

Published: June 20, 2008
doi:

Summary

Inmunotransferencia (Western Blot) es un ensayo rápido y sensible para la detección y caracterización de proteínas que funciona mediante la explotación de la especificidad inherente en el reconocimiento antígeno-anticuerpo. Este video ofrece protocolos de separación de proteínas, las proteínas en las membranas de secante, immunoprobing y visualización utilizando sustratos cromogénicos o quimioluminiscencia.

Abstract

Inmunotransferencia (Western Blot) es un ensayo rápido y sensible para la detección y caracterización de proteínas que funciona mediante la explotación de la especificidad inherente en el reconocimiento antígeno-anticuerpo. Se trata de la solubilización y separación electroforética de las proteínas, glicoproteínas, o lipopolisacáridos por electroforesis en gel, seguido de la transferencia cuantitativa y unión irreversible a nitrocelulosa, PVDF, o de nylon. La técnica de inmunotransferencia ha sido útil en la identificación de antígenos específicos reconocidos por los anticuerpos policlonales o monoclonales y es altamente sensible (1 ng de antígeno puede ser detectado). Esta unidad dispone de protocolos para la separación de proteínas, las proteínas en las membranas de secante, immunoprobing y visualización utilizando sustratos cromogénicos o quimioluminiscencia.

Protocol

El protocolo de texto completo de este enfoque experimental está disponible en Current Protocols in Molecular Biology

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Play Video

Cite This Article
Gallagher, S., Chakavarti, D. Immunoblot Analysis. J. Vis. Exp. (16), e759, doi:10.3791/759 (2008).

View Video