Name: Elastomerik PGS Arter Doku Mühendisliği Yapı iskeleleri (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-04-08T11:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 35 s
Description: Öğrenin, biyobozunur elastomerler kullanarak damarsal doku mühendisliği için gözenekli tübüler iskelelerin nasıl üretileceğini. Bu yöntem, vasküler düz kas hücreleriyle kültür ve dinamik mekanik kondisyonlama ile fonksiyonel doku geliştirmeyi sağlar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Yazar Dr. Jin PGS sentezi, biyoreaktör kurulum Dr anlayışlı tartışma için Dr. Peter Crapo Gao teşekkürler. Muhammed Ezzelarab ve babun karotis arterler explanting Wu Wei. Bu çalışma Ulusal Sağlık Enstitüleri (R01 HL089658) bir hibe ile desteklenmiştir.

1. Boru İskele malzeme üretim <ol><li> Iskele için bir kalıp olarak, cam tüp (Küçük Parçalar, Miramar, FL uzunluğu = 70 mm, dış çapı = 9.0 mm, duvar kalınlığı = 1.0 mm) hazırlayın </li><li> HA 100 mg 10 ml deiyonize su içine eriterek 1,0 wt / vol% hyaluronik asit (HA) (Sigma-Aldrich, St Louis, MO) hazırlayın. Çözelti içinde hiç hava kabarcığı kalmamasına kadar bir gecede rotator kullanarak karıştırın. </li><li> % 1,0 HA çözeltisi cam boru üst içine dökün. Kalıp iç duvar boyunca yavaş yavaş akmasına izin verin. Çözüm rotator kullanarak kalıp alt ulaştığında tüp ters çevirin ve kalıp iç duvarına çözüm eşit kaplıdır kadar bu adımı tekrarlayın. </li><li> Kaplama tamamlandıktan sonra, 24 saat tüm cam borulama kuru vakum fırını 37 ° C </li><li> Grind ve elek tuz partikülleri (boyutu = 25-32 mikron) porogens olarak kullanılır. </li><li> (% 1.0 HA çözüm içinde ile kaplı) bir cam boru, mandrel (PTFE tüp paslanmaz çelik ile kaplı), ısı shrinkable (HS) kol ve PTFE halkası olarak daha önce 8 açıklanan birleştirin. </li><li> Cam kalıp, silikon kauçuk huni ile bir spatula ile istenilen büyüklükte tuz parçacıkları ekleyin. Tuz partikülleri bile dağılımını sağlamak için kalıp hafifçe dokunun. Yan spatula kullanarak kalıp üst kısmında aşırı tuz partikülleri kazıyın. </li><li> Melezleşme inkübatör tuz dolu kalıp aktarmadan önce 30 dakika çevirin. Melezleşme inkübatör kapatın ve tuz füzyon için melezleşme inkübatör içine tuz dolu kalıp koyun. </li><li> Melezleşme inkübatör kalıpları çıkarın ve 37 elektrikli fırın içine kuru ° C 24 saat </li><li> Tuz dolu kalıpları, vakum fırın çıkartın ve oda sıcaklığında soğumasını bekleyin. Paslanmaz çelik mandrel PTFE halka tutarak aşağı doğru iterek çıkarın. Mandrel kalıp çok sıkı ise, onu dışarı çekmek için iğne pense kullanın. PTFE halka kalıp alttan çıkarın. </li><li> 120 ° C 'de 5 dakika süreyle HS kol küçültmek için kalıpları fırına koyun. HS kol daralmış olup olmadığını kontrol edin. HS kol tuz dolu kalıplar çıkartın ve oda sıcaklığında soğumasını bekleyin. Desikatöre kalıpları kullanılır kadar tutun. </li><li> 20 wt / vol% çözüm oluşturmak için 15 ml tetrahidrofuran (THF) (Sigma-Aldrich, St Louis, MO) içine PGS 3 g eriterek PGS çözüm hazırlayın. </li><li> Hume kaputu spoid kullanarak bırakarak tuz dolu kalıp lümen PGS çözüm ekleyin. 45 ° cam kalıp Yalın ve yavaş yavaş kalıp dönen iç lümenine PGS damla. PGS çözüm kalıp duvar boyunca aşağı doğru akar olmadığını kontrol edin. Kuru yerinde görülürse, daha fazla çözüm ekleyin. </li><li> PGS çözüm ekledikten sonra, THF buharlaşan için en az 30 dakika Hume kaput kalıplara yerleştirin. </li><li> MTorr 100 ve 150 ° C kür PGS için, önceden belirlenmiş kuruma süresi boyunca vakum fırın (örneğin 24 / 36 / 48 saat) kalıplar koyun. </li><li> Kür sonra, kalıplar çıkarın ve oda sıcaklığında soğuması için koyun. Her kalıp dikey pozisyonda yavaş deiyonize suya batırın. Hızlı suyun içine hava kabarcıkları iskele gözyaşı neden olabilir, çünkü onları dalış yapmayın. </li><li> Su banyosu dikkatle kalıpları transferi ve HA kolayca çözmek için silikon tüp kullanarak 1 saat süreyle bir açıyla yerleştirin. HA kalıp çözülmüş olup olmadığını kontrol edin. HA kalıp bırakılırsa, yavaş yavaş spatula ile kalıp çıkarmak için iskele bir ucunu itin. Iskelenin diğer ucunda bu adımı tekrarlayın ve su banyosu içinde yavaş yavaş, ileri geri kalıp sallayın. Iskele kalıp içinde hareket olup olmadığını kontrol edin. </li><li> Karıştırıcı ile dikkatli bir şekilde başka bir su banyosu iskele aktarın. Iskele çatlak olabilir sıkıca iskele, almayın. Tuz partikülleri çözerek yemeğe karışmasına su ile en az 3 gün boyunca su banyosu iskele yerleştirin. </li><li> Tuz partikülleri liç sonra deiyonize su ile doldurulmuş 15 ml santrifüj tüpüne her iskele transferi ve dondurmak için 1 saat süreyle kuru buz kutusuna koyun. Santrifüj tüplerine lyophilizer (tüp kabinler açılmalıdır) içine koyun ve 2 gün boyunca onları lyophilize. </li><li> Desikatöre kadar önce bütün iskeleleri koyun. </li></ol> 2. Hücre Yayımlama İskele hazırlanması <ol><li> Desikatöre iskeleleri dışarı atın ve uzunluğu 25-30mm olarak bunları kesmek. </li><li> Iki silikon kauçuk tıpa (çapı = 20 mm, duvar kalınlığı = 6,35 mm, orta delik çapı = 3 mm) hazırlayın ve iki PTFE borulama (dış çapı = 3,97 mm, iç çapı bağlamak = 2.38 mm, duvar kalınlığı = 0,79 mm, uzunluğu = her stoper, orta deliklerden 60 mm ve 40 mm). </li><li> HS halka uzunluğu 1.5 mm olarak kesin ve bir ucunu iskele üstüne koymak. Mümkün olduğunca küçük bir örtüşen kısmı olarak iskele bir ucunu bir PTFE tüp (silikon lastik tıpa bağlı) itin. </li><li> 120 ° C 'de 10 dakika süreyle HS halka küçültmek için iskele ve PTFE tüp fırına koyun. HS halka küçüldüğünü ve iskeleleri PTFE tüp sıkıca bağlı olmadığını kontrol edin. </li><li> Iskele ve PTFE tüp dışarı atın ve oda sıcaklığında soğuması için koyun. Iskele-PTFE boru montaj polikarbonat tüp (dış çapı = 15.5 mm, iç çapı = 9 mm, uzunluğu = 50 mm) biyoreaktör odası olarak içine koyun. </li><li> Adımları 2.3) ve 2.4) olarak iskele PTFE boru başka bir ucunu. </li><li> Kendi iç yüzeylerinde polikarbonat tüp her iki ucuna takmak için iki silikon kauçuk tıpa ayarlayın. (Genişlik = 20 mm, uzunluk = 70 mm, kalınlığı = 6,35 mm alt ve üst) iki adet alüminyum alaşımlı plakalar hem de dış yüzeylerinde silikon kauçuk tıpa takın. Plaka yan deliğe iki dişli çubuklar koyun ve plaka üzerinde parmak somun vida sıkma plakaları polikarbonat tüp (İskele içinde bulunan) düzeltmek. </li><li> Seedable her iskele uzunluğu (iki HS halkaları arasında bir uzunluk) ölçün ve hücre tohumlama için her iskele iç yüzey alanı (π x iç çap x seedable uzunluğu) hesaplamak. </li><li> Wrap bir biyoreaktör odasına alüminyum folyo ile birim ve 120 ° C'de 30 dakika otoklav ile sterilize edin. Biyoreaktör her bir parçası (orta rezervuar, pompa boru, gaz değiştiriciler, manifoldlar ve iğne vana) 120 ° C'de 30 dakika otoklavlanarak sterilize ve hücre kültürü kaputu içinde bir araya. </li><li> Ön tedavi ve iskeleler bir perfüzyonları serisi (70, 50, ve% 25 etanol, 1 saat boyunca tuzlu su (PBS fosfat tamponlu ile yıkayın; kullanarak 24 saat Mediatech, Herndon, VA) 2 saat ve SMC kültür ortamı 1.0 ml / dak akım devresi peristaltik bir pompa. </li></ol> 3. Hücre Yayımlama ve Kültür <ol><li> Juvenil erkek Habeş maymunları (Papio Anubis) karotid arterlerin primer arteriyel düz kas hücreleri (SMC'lere) izole etmek ve Pasajlanması ve daha önce 9 açıklandığı gibi ekim öncesi iki boyutlu (2D) kültüründe onları karakterize. </li><li> Expand MCDB 131 orta (Mediatech, Herndon, VA) kullanarak% 10 fetal sığır serumu (Lonza, Walkersville, MD),% 1 L-glutamin (Mediatech), 50 mg / ml askorbik asit (Fisher Scientific, Fair Lawn, SMC'lere NJ) ve antibiyotik (10.000 IU / ml penisilin, 10.000 mg / ml streptomisin ve 25 mg / ml amfoterisin B; Mediatech) antimikotik çözüm. </li><li> Biyoreaktör akım devresi her biyoreaktör odasına çıkarın. 5 ml şırınga ile süspansiyon (giriş) abluminal ve luminal (çıkış) akışlarını keserek sonra iskele lümen içine enjekte edilerek, 2x10 6 hücre / cm 2 yoğunluğu ile iskele Tohum SMC'lere (geçit 4-6) . </li><li> 37 ° C'de tüm biyoreaktör odaları melezleşme inkübatör içine koyun ve hücrelerin düzgün iskele yaymak için izin 4 saat için 2 rpm onları döndürmek. </li><li> Biyoreaktör odaları Kaputun biyoreaktör devre akışı melezleşme inkübatör iliştirmeniz onları çıkarın. Tüm biyoreaktör sistemi hücre kültürü kuvöz içine aktarın. </li><li> Kıkırdak peristaltik pompa, pompa hortumu (iç çapı = 1.6 mm) bağlayın ve rezervuar taze kültür orta yük. 1.0 ml / dk, sadece luminal akışını takip 15 dakika boyunca duvar perfüzyon (abluminal için luminal) başlayın. </li><li> 1 - 14.2 ml / dk (15.3 dynes / cm 2) ve 21. günde 120 mmHg ve 20 mmHg günü: 1.0 ml / dk (1.1 dynes / cm 2 luminal kayma gerilmesi) yavaş yavaş akış hızı ve basınç artırın. Günde 4 pompa boru (iç çapı = 3.2 mm) ve orta haftada bir değiştirin. </li></ol> 4. Doku Hasat ve Analizi için Numune Hazırlama <ol><li> 21-günlük kültür sonra, orta rezervuar pompa ve kelepçe borulama (giriş ve çıkış) dur. Kaput içine peristaltik pompa ve transfer biyoreaktör sistemi kıkırdak pompası hortumu çıkarın. </li><li> Kelepçe her biyoreaktör odasının giriş ve çıkış borulama ve akışı döngü ayırmak. Giriş boru açın ve çıkış boru polikarbonat tüp içinde kültür ortamı toplamak için bir Petri yemek hazırlamak. Yavaş yavaş çıkış boru açın ve odanın orta çıkarmak. </li><li> Odasından abluminal iğne ve luminal silikon tüp ayırın ve parmak vidalar serbest alüminyum plakalar ayırmak. Polikarbonat tüp çıkarın ve PTFE tüp inşa doku bir ucunu ayırın. </li><li> 10 ml PBS ile dolu bir petri yemek hazırlayın ve PTFE tüp yapı diğer ucunu ayırın. PBS içine inşa etmek ve üç defa çalkalayın koyun. </li><li> 5 mm uzunluk olarak bir tıraş bıçağı ile inşa kesin. Biyokimyasal tayini için -80 ° C derin dondurucuda dondurun veya 5 ml taze orta Doku-Tek optimum kesim sıcaklık bileşik (Sakura Finetek A.Ş., Torrance, CA içine mekanik test veya ek bileşeni dondurma dolu 15 ml santrifüj tüpüne transfer histoloji / immunoflu) içinorescence boyama. </li></ol> 5. Temsilcisi Sonuçlar: Tübüler PGS iskeleler, tuz füzyon yöntemi (Şekil 1A) tarafından biyolojik olarak parçalanabilen elastomer kullanılarak imal edildi. Her biyoreaktör odası, luminal ve abluminal akışları ile iskeleler ve bir ana akım döngü (Şekil 1B) ayrı bir birim olarak ayrılmış olabilir. Biyoreaktör sistemi kontrol ve izleme akışının yanı sıra basıncı (Şekil 1C ve D) bir anda kültür dört iskeleler için tasarlanmıştır. Şekil biyoreaktör kültürü şematik gösterildi. 2. SMC'lere tohumlama sonra, her biyoreaktör odasında 37 ° döndürülebilir ° C hücreleri iskele lümen eşit dağıtmak için 4 saat. Ve sonra, pulsatil akış debisi giderek artmaktadır (Şekil 2A) ve basınç (Şekil 2B) ile 14 gün kadar iskeleleri uygulandı. 14 gün sonra, kültür sonuna kadar (21 gün) akış ve basınç sabit tutulur. PGS iskele yüzey morfolojisi taramalı elektron mikroskobu (SEM) tarafından incelenmiştir. Taramalı elektron mikrograflar iskele tutarlı duvar (539 ± 18 mikron) kalınlıkları olduğunu gösterdi (Şekil 3A) ve rastgele luminal yüzeyi (Şekil 3B) makro ve mikro gözenekler dağıtıldı. Microcomputed tomografi (mikro-CT) ve görüntüleme analizi iskele morfometrik parametreleri ölçüldü. Ortalama gözenek boyutu 23.3 ± 3.9 mikron ve gözenek birleştiricisi 99.4 ± 0.62%, tüm gözenekler tamamen iskele birbirine bağlı olduğu anlamına gelir. Etanol deplasman tarafından ölçülen Gözeneklilik% 75.6 ± 2.7. PGS inşa hücresel morfoloji, SEM tarafından muayene edilmiştir (Şekil 4) . Çok katmanlı SMC'lere luminal yüzeyi tamamen kaplanmış ve akış yönüne dik odaklı. Bu sonuçlar, pulsatil akış biyoreaktör mekanik havalandırma iskele SMC yönünü destekler göstermektedir. Ekstrasellüler matriks (ECM) ve elastik liflerin varlığı, H &amp; E boyama ve elastin otofloresans (Şekil 5) ile incelendi. H &amp; E boyama hücreleri ve ECM proteinleri tamamen inşa PGS lümen kaplı olduğunu göstermiştir. Elastin otofloresans yapı luminal yüzeyi dairesel organize elastik liflerin de gösterdi. PGS yapıları ECM proteinleri Üretim biyokimyasal analizlerle ölçüldü. Çözünmez elastin ve kollajen içeriği, 20.2 ± 9.1 mg / mg doku ve 6.3 ± 1.9 mcg / mg doku, sırasıyla idi. <img src="/files/ftp_upload/2691/2691fig1.jpg" alt="Şekil 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 1"> Şekil 1 İskele imalat ve biyoreaktör sistemi. (A) tübüler iskele imalat şematik. (B) Biyoreaktör odasına. Iskeleler, PTFE tüp polikarbonat tüp yerleştirilir ve silikon kauçuk tıpa ve alüminyum alaşımlı plakalar tarafından tespit edildi. Luminal (silikon tüp) ve abluminal (iğne) akımları: Her odasına iki akış yolları vardır. (C) Biyoreaktör sistemi kuvöz içine yerleştirilir. Orta rezervuar, peristaltik pompa modülü, gaz değiştirici, basınç dönüştürücüler, iki manifoldu (üst ve alt), ve iğne valf içerir. (D) Biyoreaktör sistemi inkübatör dışına yerleştirilmiş. Basınç sensörü, akış kontrol ünitesi, veri toplama sistemi ve bilgisayar içerir. <img src="/files/ftp_upload/2691/2691fig2.jpg" alt="Şekil 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 2"> Şekil 2 biyoreaktör kültürü şematik. (A) Kültür protokolü. (B) her zaman noktası (Gün 1, 4, 7, ve 14) basınç profilleri Uygulamalı. <img src="/files/ftp_upload/2691/2691fig3.jpg" alt="Şekil 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 3"> Şekil 3 PGS iskele yüzey morfolojisi. (A) Kesit. (B) Lümen. <img src="/files/ftp_upload/2691/2691fig4.jpg" alt="Şekil 4" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 4"> Şekil 4 PGS hücresel morfoloji inşa. (A) Lümen. (B) 45 ° kesme kesiti. Iki figür oklar akış yönünü temsil eder. <img src="/files/ftp_upload/2691/2691fig5.jpg" alt="Şekil 5" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 5"> Şekil 5 Histoloji ve elastin otofloresans PGS inşa. (A) H &amp; E boyama. (B) Sorumlu elastin otofloresans. L: lümen. Büyütme: 40X. Ölçek çubuğu: 50 mm.

<ol><li>The American Heart Association Statistics Committee Stroke Statistics Subcommittee. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((American+Heart+Association%3A+Heart+disease+and+stroke+statistics-2009+update%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">American Heart Association: Heart disease and stroke statistics-2009 update.</a> Circulation. 119, 480-486 (2009).</li>
<li>Isenberg, B. C., Williams, C., Tranquillo, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small-diameter+artificial+arteries+engineered+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Small-diameter artificial arteries engineered in vitro.</a> Circ Res. 98, 25-35 (2006).</li>
<li>Conte, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+ideal+small+arterial+substitute%3A+a+search+for+the+Holy+Grail%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">The ideal small arterial substitute: a search for the Holy Grail.</a> FASEB J. 12, 43-45 (1998).</li>
<li>Wang, X., Lin, P., Yao, Q., Chen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+small-diameter+vascular+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Surg%22%5BJournal%5D)">Development of small-diameter vascular grafts.</a> World J Surg. 31, 682-689 (2007).</li>
<li>L'Heureux, N., Paquet, S., Labbe, R., Germain, L., Auger, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+completely+biological+tissue-engineered+human+blood+vessel%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">A completely biological tissue-engineered human blood vessel.</a> FASEB J. 12, 47-56 (1998).</li>
<li>Niklason, L. E., Gao, J., Abbott, W. M., Hirschi, K. K., Houser, S., Marini, R., Langer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+arteries+grown+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Functional arteries grown in vitro.</a> Science. 284, 489-493 (1999).</li>
<li>Wang, Y., Ameer, G. A., Sheppard, B. J., Langer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+tough+biodegradable+elastomer%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">A tough biodegradable elastomer.</a> Nat Biotechnol. 20, 602-606 (2002).</li>
<li>Crapo, P. M., Gao, J., Wang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Seamless+tubular+poly%28glycerol+sebacate%29+scaffolds%3A+high-yield+fabrication+and+potential+applications%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Mater+Res+A%22%5BJournal%5D)">Seamless tubular poly(glycerol sebacate) scaffolds: high-yield fabrication and potential applications.</a> J Biomed Mater Res A. 86, 354-363 (2008).</li>
<li>Gao, J., Ensley, A. E., Nerem, R. M., Wang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Poly%28glycerol+sebacate%29+supports+the+proliferation+and+phenotypic+protein+expression+of+primary+baboon+vascular+cells%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Mater+Res+A%22%5BJournal%5D)">Poly(glycerol sebacate) supports the proliferation and phenotypic protein expression of primary baboon vascular cells.</a> J Biomed Mater Res A. 83, 1070-1075 (2007).</li>
<li>Murphy, W. L., Dennis, R. G., Kileny, J. L., Mooney, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Salt+fusion%3A+an+approach+to+improve+pore+interconnectivity+within+tissue+engineering+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng%22%5BJournal%5D)">Salt fusion: an approach to improve pore interconnectivity within tissue engineering scaffolds.</a> Tissue Eng. 8, 43-52 (2002).</li>
<li>Gao, J., Crapo, P. M., Wang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macroporous+elastomeric+scaffolds+with+extensive+micropores+for+soft+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng%22%5BJournal%5D)">Macroporous elastomeric scaffolds with extensive micropores for soft tissue engineering.</a> Tissue Eng. 12, 917-925 (2006).</li>
<li>Wilson, E., Mai, Q., Sudhir, K., Weiss, R. H., Ives, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+strain+induces+growth+of+vascular+smooth+muscle+cells+via+autocrine+action+of+PDGF%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Mechanical strain induces growth of vascular smooth muscle cells via autocrine action of PDGF.</a> J Cell Biol. 123, 741-747 (1993).</li>
<li>Leung, D. Y., Glagov, S., Mathews, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cyclic+stretching+stimulates+synthesis+of+matrix+components+by+arterial+smooth+muscle+cells+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Cyclic stretching stimulates synthesis of matrix components by arterial smooth muscle cells in vitro.</a> Science. 191, 475-477 (1976).</li>
<li>Kim, B. S., Nikolovski, J., Bonadio, J., Mooney, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cyclic+mechanical+strain+regulates+the+development+of+engineered+smooth+muscle+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Cyclic mechanical strain regulates the development of engineered smooth muscle tissue.</a> Nat Biotechnol. 17, 979-983 (1999).</li>
<li>Yang, J., Motlagh, D., Webb, A. R., Ameer, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+biphasic+elastomeric+scaffold+for+small-diameter+blood+vessel+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Eng%22%5BJournal%5D)">Novel biphasic elastomeric scaffold for small-diameter blood vessel tissue engineering.</a> Tissue Eng. 11, 1876-1886 (2005).</li>
<li>Stankus, J. J., Soletti, L., Fujimoto, K., Hong, Y., Vorp, D. A., Wagner, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fabrication+of+cell+microintegrated+blood+vessel+constructs+through+electrohydrodynamic+atomization%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Fabrication of cell microintegrated blood vessel constructs through electrohydrodynamic atomization.</a> Biomaterials. 28, 2738-2746 (2007).</li>
<li>Nieponice, A., Soletti, L., Guan, J., Deasy, B. M., Huard, J., Wagner, W. R., Vorp, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+tissue-engineered+vascular+graft+combining+a+biodegradable+scaffold%2C+muscle-derived+stem+cells+and+a+rotational+vacuum+seeding+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Development of a tissue-engineered vascular graft combining a biodegradable scaffold, muscle-derived stem cells and a rotational vacuum seeding technique.</a> Biomaterials. 29, 825-833 (2008).</li>
</ol>

Burada tanımlanan biyolojik olarak parçalanabilen elastomer kullanarak üretim tekniği, çeşitli özelliklere sahiptir. (1) bir kalıp ayırıcı olarak kullanılan hyaluronik asit (HA). HA suda çözünür olduğundan, iskele kolaylıkla suya iliklerine sonra cam kalıp serbest bırakıldı. Bu raporda, 1,0 wt / vol% HA çözüm çözüm konsantrasyonu düşük (&lt;0,5% ağırlık / hacim) viskoz değildir ve biz cam boru üstüne dökme işlemi sırasında aşağı çok hızlı akar çünkü kullandı. Çözüm, alt boru aşağı uçtu ve bu adımı tekrarlayan kat HA çözüm için eşit, cam tüp devrildiğinde. Bu HA kaplama, son iskeleleri serbest bırakılması için bizim imalat prosedürü kritik bir. (2) ısı shrinkable (HS) kol cam tüp tuzları elde etmek için kullanılır. Tuzları yoğun cam tüp ve HS kol iç duvar arasındaki boşluk dolu olduğundan, HS, kol, boru alt mandrel ve PTFE halka çıkardıktan sonra tuzları korudu. Biz HS kol kalıp 120 ° C &#39;de 5 dakika süreyle bir fırına koyarak kolayca kaldırmak ve daha sonra tübüler tuz şablonları olsun. (3) tuz füzyon yöntemi kullanılır. Çok iyi tuz füzyon yöntemi füzyon zaman 10 değişik gözenek birleştiricisi ve mekanik özelliklerini geliştirmek olduğu bilinmektedir. PGS kullanılan mikro gözenekler büyük olasılıkla gliserol buharı tarafından oluşturulan, biz daha önce 11 açıklandığı gibi kür PGS sırasında oluşan iken Ayrıca, makro gözenekler, liç işlemi sırasında tuz parçacıklar tarafından üretildi. Böylece, bu yöntem, değişen durum kür PGS tuz partikülleri yanı sıra, farklı makro ve mikro yapıları ile gözenekli tübüler iskeleleri imal etmek için bir potansiyele sahiptir. Biyoreaktör mekanik klima pulsatil akım perfüzyon (maksimum akım ortalama = 14 ml / dak, maksimum kayma gerilmesi = 15.3 dyn / cm 2, frekans = 0,5 - 1,7 Hz) ve fizyolojik yol açan PGS iskele ile ilgili basınç SMC büyüme ve oryantasyon (Şekil 4). Bu sonuçlar, önceki çalışmalarda, bu frekans o döngüsel streç raporlama ve kayma gerilmesi SMC proliferasyonunu 12, ve ECM protein üretimini 13,14 artırır ile tutarlıdır. PGS SMC büyüme ve yönlendirmeye ek olarak, özellikle dairesel biyoreaktör, 3 hafta kültürü içinde elastik liflerin (Şekil 5) düzenlenen, ECM protein üretimini desteklenen inşa . Elastik liflerin bu yapıları ise küçük çaplı arter yapı olarak bir elastomerik iskele kullanan bazı çalışmalar, mekanik dayanım ve ana arterlerde 15 ve bükme balon 16,17 uyumlu iskeleleri kullanarak hızlı SMC entegrasyon ile karşılaştırılabilir patlama basıncı göstermiştir. Bizim sonuçlarımız biyoreaktör o döngüsel radyal distansiyon PGS iskele, muhtemelen elastin sentezi ve organizasyon katkıda SMC&#39;lere daha etkin bir şekilde geliştirilmiş mekanik sinyal iletimi öneririz. Vasküler SMC&#39;lere, bizim yaklaşımımız, sükunet endotel ECM proteinleri üretilen ve klinik başarılı küçük çaplı arter yapıları geliştirmek için gerekli olan mekanik gücünü artırmak sadece hücreleri olduğundan. Endotel hücreleri, kültür koşulları ve mekanik havalandırma 9 altında bir konfluent tek tabaka ve desteklenen fenotip protein ekspresyonu üretilen SMC&#39;lere ile birlikte kültürlü bildirdin . Bu nedenle, bizim yaklaşımımız dayalı ko-kültür deney koşullarının değiştirilmesi çıkan yapıları fonksiyonlarını geliştirmek ve nonthrombogenic, sağlam oluşturmak için bir sonraki adım olacaktır, burada açıklanan ve uyumlu arter ana arterlere benzer bir yapı.

<table border="1"><tbody><tr><th> Reaktifin Adı </th><th> Şirket </th><th> Katalog numarası </th></tr><tr><td> Hyaluronik asit sodyum tuzu </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> H7630 </td></tr><tr><td> Tetrahidrofuran </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 401757 </td></tr><tr><td> MCDB 131 </td><td> Mediatech </td><td> 15-100-CV </td></tr><tr><td> Fetal sığır serumu </td><td> Lonza </td><td> BW14-502F </td></tr><tr><td> L-glutamin </td><td> Mediatech </td><td> 25-005-CV </td></tr><tr><td> Askorbik asit </td><td> Fisher Scientific </td><td> A62-500 </td></tr><tr><td> Antibiyotik antimikotik çözüm </td><td> Mediatech </td><td> 30-004-CI </td></tr><tr><td> Fosfat Tamponlu Salin (PBS) </td><td> Mediatech </td><td> 21-031-CV </td></tr><tr><td> Doku-Tek optimum kesim sıcaklık bileşik, 4583 </td><td> Sakura Finetek </td><td> 25608-930 </td></tr></tbody></table>

elastomerik pgs arter doku mühendisliği yapı iskeleleri

Elastomeric PGS Scaffolds in Arterial Tissue Engineering

Kardiyovasküler hastalıklar ABD&#39;de ölüm önde gelen nedenidir ve özellikle koroner arter hastalığı yaşlanan bir nüfus ve artan obezite 1 artar. Şu anda, otolog gemileri, allogreftler ve yaygın 2 arter yerine kullanılan olarak bilinen sentetik greft ile bypass cerrahisi. Ancak, bu greftler arterlerin iç çapı 6 mm daha düşük kullanılabilirlik, trombotik komplikasyonlar, uygunluk uyumsuzluğu, ve geç intimal hiperplazi 3,4 nedeniyle az sınırlı uygulamalar var. Bu sınırlamaları aşmak için, doku mühendisliği nonthrombogenic, sağlam ve uyumlu küçük çaplı arter yapıları geliştirmek için umut verici bir alternatif olarak başarıyla uygulanmaktadır. Birkaç önceki çalışmalarda, üç tabakalı yapı, mükemmel mekanik özellikleri ve ana arterleri 5,6 ile karşılaştırılabilir patlama basıncı ile küçük çaplı arter yapıları geliştirmiştir . Yüksek çekme dayanımı ve sert bir malzeme veya hücre sac iskele kolajen üretimini artırarak patlama basıncı, bu yapıları hala önemli bir sorundur implantasyon sonrası greft yetmezliğine neden düşük elastin üretimini ve uyum vardı. Bu konular göz önüne alındığında, mekanik havalandırma ile birlikte bir elastometrik biyomateryal esnekliğini sağlamak ve ekstraselüler matriks üretimini artırmak ve hücresel yönlendirme desteği damar hücreleri, mekanik sinyalleri yapmak daha verimli olacağı hipotezi. Bu raporun amacı, gözenekli borulu iskeleler bir imalat tekniği ve onları arteriyel doku mühendisliği uygulamak için dinamik bir mekanik havalandırma tanıtmak. Biz tuz füzyon yöntemi gözenekli tübüler iskeleleri imalatı, poli (gliserol sebacate) (PGS) 7 biyolojik olarak parçalanabilen bir elastomer kullanılır. Yetişkin birincil babun düz kas hücreleri (SMC&#39;lere), iskeleler, 3 hafta için tasarlanmış pulsatil akış biyoreaktör kültüre lümen numaralı seribaşı. PGS iskeleleri tutarlı kalınlık ve rastgele dağıtılan makro ve mikro gözenekleri. Pulsatil akış biyoreaktör Mekanik Klima SMC yönelim ve iskeleler gelişmiş ECM üretim desteklenir. Bu sonuçlar, elastomerik iskeleleri ve biyoreaktör kültürü mekanik havalandırma arter doku mühendisliği için umut verici bir yöntem olabileceğini düşündürmektedir.

Pulsatil akış biyoreaktör kültürü damar düz kas hücreleri ile Elastomerik PGS iskeleler, görece kısa bir kültür dönemde, yerli ECM üretim ile gelecek vaat eden küçük çaplı arter yapıları neden olabilir.

Elastomerik PGS Arter Doku Mühendisliği Yapı iskeleleri

Kardiyovasküler hastalıklar, ABD'deki önde gelen ölüm nedenlerinden biridir ve özellikle koroner arter hastalığı, yaşlanan nüfusla birlikte artış göstermektedir ve...

Bu video, arteriyel doku mühendisliği için gözenekli tübüler iskelelerin nasıl üretildiğini ve bunların dinamik mekanik koşullandırmaya nasıl tabi tutulduğunu göstermektedir. Bu işlem, öncelikle biyobozunur bir elastomer ve ısı birleştirme yöntemi kullanılarak iskelelerin üretilmesiyle gerçekleştirilir. Ardından iskeleler, hücre ekimi için hazırlanır ve bir biyoreaktör sistemine monte edilir.Biyoreaktörde vasküler düz kas hücreleri iskelelere ekilir ve kültüre edilir. Haftalar sonra doku hasat edilir ve taramalı elektron mikroskobu, H ve E boyama ile elastin otofloresansı kullanılarak analiz edilir. Elde edilen düz kas hem çok katmanlıdır hem de dik yönelimlidir.Partikül ağartma gibi mevcut tekniklerin temel avantajı, gözenekli tübüler iskele ve hyaluronik asit üretmek için cam kalıp kullanmaktır. Kalıp uzaklaştırıldığında, iskele kalıbı bir cam tüp parçasıyla hazırlanır. Tüpü bir tutucuya yerleştirin ve bir gün önce hazırlanan hyaluronik asit çözeltisini tüpün içine dökün.Hiyalüronik asit iç duvar boyunca yavaşça aşağı akar. Kalıbın tabanına ulaştığında, kalıbı ters çevirin. Kalıbın iç duvarı çözelti ile eşit şekilde kaplanana kadar bu adımı tekrarlayın.Kaplamadan sonra, hazırlanan tüm cam kalıpları bir vakum fırınında 37 °C'de 24 saat boyunca kurutun. Genellikle, cam kalıplar kururken eş zamanlı olarak dört kalıp hazırlanır. Tuz partikül dökümlerini hazırlayın, SVE tuz partiküllerini 25 ila 32 µm boyutuna gelene kadar öğütün.Ertesi gün; hazırlanan cam kalıp mandreni, PTFE tüp, ısı ile büzülür kılıf ve PTFE halkayı birleştirin. İlk olarak, mandreni 65 millimeter uzunluğundaki PTFE tüplerin içine yerleştirin ve 120 °C'de beş dakika boyunca fırınlayın. Beklerken PTFE'yi büzmek için bir hibridizasyon inkübatörünü 37 °C'de en az 30 dakika boyunca önceden ısıtın.Tüpler mandrelleri çevreledikten sonra, ısı ile daralan kılıfı mandrel üzerinde serbestçe hareket edecek şekilde itin. Ardından mandreli cam kalıbın içine yerleştirin ve A-P-T-F-E halkasını mandrelin altına takın. PTFE halkasının cam kalıbın tabanına sıkıca oturduğunu kontrol edin.Ardından, bir spatula ve silikon kauçuk huni kullanarak cam kalıba tuz partikülü bulamacı ekleyin. Daha sonra, partiküllerin eşit dağılımı için kalıba spatula ile hafifçe vurun ve fazla tuzu sıyırın. Şimdi ısıtılmış inkübatörü kapatın ve tuzla doldurulmuş kalıpları hızlıca içine yerleştirin; tuz sonraki 30 dakika boyunca kaynaşacaktır, bunun ardından kalıpları 37 °C'de 24 saat boyunca vakumlu fırında kurutun.Soğutma işleminin ertesi günü, PTFE halkayı sabitleyerek paslanmaz çelik mandreli iterek kalıplardan çıkarın. Gerektiğinde kargaburun pense kullanın. Ardından, PTFE halkayı kalıbın alt kısmından çıkarın.Ardından, kılıfın büzülmesi için kalıpları fırınlayın ve büzülmüş kılıfları kalıplardan çıkarın. Kalıpların kullanılana kadar soğumasını bekleyin ve bir çeker ocak içindeki desikatörde saklayın. Bir damlalık kullanarak cam kalıpları 45 derece açı yapacak şekilde eğin ve kalıbı yavaşça döndürürken iç lümenine PGS çözeltisi damlatın.PGS çözeltisinin kalıp duvarı boyunca aşağı doğru aktığından emin olun. Kuru bir nokta varsa, daha fazla PGS ekleyin. Şimdi THF'nin çeker ocakta en az 30 dakika boyunca buharlaşmasına izin verin. THF tamamen uçtuktan sonra, kalıpları vakumlu fırında kürleyin.Bir gün boyunca kürledikten sonra, kalıpları oda sıcaklığına kadar soğutun ve 24 °C sıcaklıktaki deiyonize suya yavaşça, dikey olarak daldırın. Kalıpları çok hızlı eğmek, iskeleyi yırtan hava kabarcıkları oluşturur. Kalıpları dikkatlice su banyosuna aktarın.Silikon bir tüp kullanarak bunları açılı bir şekilde konumlandırın ve hyaluronik asidin bir saat boyunca çözünmesini bekleyin. Bir saatin sonunda hyaluronik asit kalıptan ayrılmadıysa, kalıp hâlâ daldırılmış durumdayken bir spatula yardımıyla hyaluronik asidi her iki uçtan yavaşça itin ve ardından kalıbı hafifçe sallayın. Şimdi, iskelelerin cam kalıbın içinde hareket edip etmediğini kontrol edin; eğer hareket etmişlerse, iskeleyi kalıptan çıkarmak için pens ile yavaşça çekin.Ardından, hassas iskeleleri nazikçe karıştırarak deiyonize su banyosuna dikkatlice aktarıp tuz partiküllerini yıkayarak uzaklaştırın. Bu işlem en az üç gün sürecektir ve suyun günlük olarak değiştirilmesi gerekir. Tuzun tamamı uzaklaştırıldıktan sonra, her bir iskeleyi deiyonize su ile doldurulmuş 15 milliliter'lik bir santrifüj tüpüne aktarın ve bir saat boyunca kuru buz kutusunda dondurun. Donmuş santrifüj tüplerini, kapakları açık şekilde üç gün boyunca bir liyofilize cihazına yerleştirin.Dondurularak kurutulan iskeleleri, kullanılana kadar bir desikatörde saklayın. İskeleleri 25 ila 30 milimetre uzunlukta keserek başlayın. Ardından, her bir tıpanın orta deliklerinden PTFE tüpler geçirerek iki silikon kauçuk tıpa hazırlayın.Ardından, hs ring'den bir buçuk milimetrelik parçalar kesin ve bu parçalardan birini iskelenin bir ucuna kaydırın. Tıpaa bağlı bir PTFE tüpü, iskeleyi tübe sıkıca bağlamak için HS ring'in altında kalacak kadar bir örtüşme sağlayacak şekilde iskelenin aynı ucuna itin, HS ring'i bir fırında daraltın ve düzeneğin oda sıcaklığına soğumasını bekleyin. Şimdi, biyoreaktör odası görevi gören 50 milimetrelik bir polikarbonat tüp iskelenin üzerine geçirilir ve silikon kauçuk tıpanın iç yüzeyine sabitlenir.Tıpkı daha önce yapıldığı gibi, başka bir PTFE tüp ve tıpa, hazneyi tamamlamak için bir hs halkası ile iskelenin diğer ucuna sabitlenir. İkinci tıpa, polikarbonat tüpün diğer ucuna takılır. Ardından, tıpaların dış yüzeyleri iki alüminyum alaşımlı plakaya sabitlenir.Her bir plakanın yan deliğinden iki adet dişli çubuk geçirin ve plakaları başparmak vidalarıyla sabitleyin. İskele yapısını biyoreaktöre takın. Şimdi, iki hs halkası arasındaki mesafe olan her bir iskeletin görülebilir uzunluğunu ölçün ve iç yüzey alanlarını hesaplayın.Hücre ekimi için. Bir otoklavda, biyoreaktör ünitesinin her bir parçasının yanı sıra folyoya tek tek sarılmış olan odacıkları sterilize edin. Sterilizasyon sonrası, biyoreaktörü bir hücre kültürü kabininde monte edin.İskeleyle, akış devresinde bir peristaltik pompa kullanarak dakikada bir milimetre hızında bir dizi perfüzyon ile ön işlem yapın ve durulayın. İşleme sırasıyla %70 etanol, %50 etanol ve ardından %25 etanol ile birer saat durulayarak başlayın. Bu üç etanol durulamasını, iki saatlik bir PBS durulamasıyla takip edin.Son olarak, biyoreaktörü 24 saat boyunca SMC kültür ortamı ile perfüze edin; bu sürenin ardından reaktör, hücre ekimi ve deneyler için hazır hale gelecektir. Şimdi, ekteki el yazmasında yer alan talimatları izleyerek, biyoreaktöre santimetrekare başına 2 milyon hücre ekleyin ve sonraki 21 gün boyunca tüp ortamlarını değiştirip pompa hızında ayarlamalar yapın. Konstrüktteki basınç, kültürün ilk günündeki yaklaşık 4 mmHg değerinden, iki haftalık kültür sonrası 100 mmHg'nin üzerine kademeli olarak çıkacaktır; üç haftalık kültür süresinin sonunda, hücreleri hasat edin ve ekteki el yazmasında belirtildiği şekilde analiz için hazırlayın.Bu tübüler PGS iskeleler, tuz füzyon yöntemiyle üretilmiştir. Taramalı elektron mikrografları, tüm iskelelerin homojen duvar kalınlıklarına sahip olduğunu ve kesitlerinde herhangi bir kısmi kusur bulunmadığını göstermiştir. Tüm iskelelerin lüminal yüzeyinde rastgele dağılmış makro ve mikroporlar gözlemlenmiştir.Hücre kültüründen sonra, çok katmanlı SMC'ler akış yönüne dik bir oryantasyonla büyümüştür. Ayrıca, hücreler ve DCM proteinleri tüm PGS konstrüktlerinin lümenini tamamen kaplamıştır. Elastin otofloresansı da konstrüktün lüminal yüzeyinde çevresel olarak organize olmuş elastik fiberlerin varlığını göstermiştir.Bu videoyu izledikten sonra, gözenekli tübüler iskale nasıl yapılacağını, hücrelerin nasıl gözlemleneceğini ve önceden tasarlanmış biyoreaktör kullanılarak iskalenin nasıl kültüre edileceğini anlamış olmalısınız.

elastomeric-pgs-scaffolds-in-arterial-tissue-engineering

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Biyomühendislik

Grubumuz, kardiyovasküler sistem fizyolojik pulsatil gerilmeler implante küçük çaplı vasküler greft yeniden taklit eden bir biyoreaktör kültür sistemi geliştirmiştir.

Pulsatif Biyoreaktör kullanarak Mühendislik Biyolojik Tabanlı Vasküler Greftler

Bu protokol çevreleyen hücre dışı matriks gelen ipucu almak ve birden fenotipleri farklılaşması için indüklenebilir kök hücrelerin doğal yeteneği kullanılmasına odaklanmıştır. Bu yöntemler yazının aynı anda yağ kaynaklı kök hücreleri birlikte ayırt etmek için, PEG-fibrin ve kollajen oluşan iki katmanlı hidrojel kullanan bir model, bizim ve nitelendirilmesi...

ASC farklılaşma kontrol için bir iki tabakalı Hidrojel mühendislik

Poli (gliserol-dodekanoat) adında yeni bir biyolojik polimerden bir yeni tasarlanmış toplayıcı aracılığıyla daha geniş bir alanı kapsayan mevduat electrospun uzun liflerin (PGD) Sentezi ve fabrikasyon bildirildi. Lifler fare pluripotent kök hücrelerinden türetilen hücrelerin büyümesini desteklemek mümkün.

Fare Embriyonik kök hücrelerden Mühendislik Sinir Dokular için Poli electrospun fibröz iskeleleri (gliserol-dodecanedioate)

Burada, biz çift tohumlama kısmen uyarılmış pluripotent kök hücre ile farelere aşılama için fonksiyonel doku mühendisliği gemi greft oluşturmak için bir protokol mevcut (PiPSC) - Bir decellularized damar iskele biyoreaktör üzerinde elde edilen endotel hücreleri - düz kas hücreleri ve PiPSC türetilmiş.

Bir Fare Modeli Doku mühendisliği Kapların Üretimi ve Tırnak

Doku mühendisliği için iskeleler, hücresel nişin karmaşık biyokimyasal ve biyofiziksel mikro çevresini özetlemelidir. Burada, sürekli biyokimyasal salınımlı kompozit, çok bileşenli polimerik iskeleler oluşturmak için bir platform olarak arayüzey polielektrolit kompleksleştirme liflerinin kullanımını gösteriyoruz.

Biyomoleküllerin Geçici olarak Kontrollü Release için Yüzey Polielektrolit Elyaf Kompozit Yapı iskeleleri

poli (N-izopropil akrilamid) -graft-kondroitin sülfat oluşan enjekte edilebilir doku mühendisliği iskelesi (PNIPAAm-g-CS) içeren aljinat mikro hazırlandı. Özellikleri ve in vitro biyouyumluluk şişme yapışma mukavemeti, bu çalışmada incelenmiştir. Burada geliştirilen karakterizasyon teknikleri diğer thermogelling sistemleri için geçerli olabilir.

Doku Mühendisliği Aljinat mikropartiküllerin ile Thermogelling Poli (N-izopropil) -graft-kondroitin Sülfat Kompozitlerin Sentezi

Bu çalışmada, eriyik karıştırma ve seçici liç kombinasyonu kullanılarak poli(laktik asit)/polietilen glikol (PLA/PEG) iskeleleri hazırlanmıştır. Burada tartışılan yöntem, hem gözenekliliği hem de gözenek boyutunu yüksek oranda kontrol ederek üç katmanlı iskelelerin geliştirilmesine izin verdi. Mekanik özellikler ayrıca fizyolojik bir ortamda da değerlendirildi.

Bir Facile ve çevre dostu Rota Kademeli Gözenek Boyutu Poli (Laktik Asit) iskeleleri imal etmek için

Zararsız ve uzun-dönem için bir adım adım Protokolü vasküler remodeling ve gerçek zamanlı kültür iskele yıkımı biyobozunur polimer iskele tabanlı doku mühendisliği kan damarlarının pulsatil stimülasyon ile işlem izleme Optik koherens tomografi kullanılarak burada açıklanmıştır.

Geri dönüşlü optik koherens tomografi kullanarak parçalanabilir iskele tabanlı doku mühendisliği kan damarı gelişimi izleme

Burada sunulan bir basit kullanımlı, çekirdek / kabuk, üç boyutlu biyobaskı kurulum içi boş iskeleler, vasküler ve diğer borulu yapıların doku mühendisliği için uygun tek adımlı imalatı için.

Boru yapıları doku mühendisliği için Çekirdek / kabuk Baskı İskeleler

Özofagus rekonstrüksiyonu zorlu bir işlemdir ve özofagus mukozası ve kasının yenilenmesini sağlayan ve yapay greft olarak implante edilebilen doku mühendisliğiöz bir özofagusun geliştirilmesi gereklidir. Burada, iskele imalatı, biyoreaktör ekimi ve çeşitli cerrahi teknikler de dahil olmak üzere yapay bir özofagus oluşturmak için protokolümüzü saklı yız.

Sıçanlarda Çevresel Özofagus Rekonstrüksiyonu için Doku-Mühendislik Greft

Bu protokolün amacı, kesme stresi ve döngüsel esnemenin birleşmesini sağlayan bir biyoreaktör kullanarak, malzeme güdümlü doku yenilenmesini araştırmak için tübüler elektrospun iskelelerinde insan makrofajları ve miyofibroblastların dinamik bir ortak kültürünü yürütmektir.

Akış ve Esneme Altında Biyomalzemelerin Enflamatuar ve Rejeneratif Kapasitesini Değerlendirmek için Çok İşaretli Bir Biyoreaktör

Öğrenin, biyobozunur elastomerler kullanarak damarsal doku mühendisliği için gözenekli tübüler iskelelerin nasıl üretileceğini. Bu yöntem, vasküler düz kas hücreleriyle kültür ve dinamik mekanik kondisyonlama ile fonksiyonel doku geliştirmeyi sağlar.

Elastomerik PGS Arter Doku Mühendisliği Yapı iskeleleri

Daha fazla video keşfet