October 1st, 2007
Benim adım Hang Moon. Prezervatif profesörü ile çalışıyorum. O ve ben, hücrenin 3 boyutlu yapısını yapmak için XYJ aşaması ile çalışıyoruz.
Merhaba, ben PE ve Lynn ve hücre kapsülleme, medya ve jeller ile hücre baskı projesinde çalışıyorum. Bu, bir hücrenin ve hücre aros karışımının hücre ortamı üzerinden atılması için kullanılan bir solenoiddir. so valfi iki sinyal hattı ile etkinleştirilir.
Sinyal hattı burada kuru bir tahtadan geliyor. Sinyal buradan geldi. O çizgiden geçen o çizgi, o bir fonksiyon ilk üretecidir.
Yani ilk olarak programladığımız yol tarafından üretilir. Yani isterseniz, cüzdanı değiştirmek isterseniz, o anahtar hattı ile programı değiştirebilir veya o işlem jeneratörünü bilgisayara kontrol edebilirsiniz. Hücresel valf elektrik sinyali ile açılır ve kapanır, ancak hücre bu hat üzerinden beslenir.
Hücre ve ortam veya agro jel, şırınga şırıngaları aracılığıyla sağlanır. Suyun içindeki şırıngalar, şırınganın içindeki hava tarafından basılan ışıktır. Basınçlı hava buradaki hat gibi bir tanktan sağlanır.
Böylece küçük çizgi ve ize edilmiş hava hava filtresinden uçar. Hava filtresi, tozu ve diğer kirleri ayırt eder. Yani basınç jeneratörü dediğimiz, güneş hava çanını açmak veya kapatmak için kullanılan sinyali üretiyor, güneş hava valfi bilgisayarı P-I-B-U-S-V konektörü ile bağlanıyor.
Böylece USB portunu doğrudan bilgisayarımızla, dizüstü bilgisayarla kullanabiliriz. Yani bu kişi burada o tarafa bağlı. Ve sonra burada kontrol dizüstü bilgisayarı aracılığıyla kontrol edebiliriz.
Bu nedenle, sahnenin hareketini senkronize etmek ve zili açmak istiyorsak, bir dizüstü bilgisayar ile aynı kontrolör tarafından kontrol edilebilir. Böylece ne zaman açıldığını, ne zaman kapandığını, ne zaman hareket ettiğini ve ne zaman durduğunu kontrol edebiliriz. Ve hareketi ve açılış zilini senkronize edebiliriz.
Bu aşama motorlu aşamadır. Ölüm sinyal hattı ve motor üzerinden otomatik olarak otomatik olarak hareket ettirilir. Yani motorizasyon 0.1 mikrometredir.
Böylece ideal olarak 100 milimetreye kadar çizgi çizebilir. Yani jet ekseni hareket ediyor, bu şekilde yukarı ve aşağı gidiyor. Böylece alt tabaka ile güneş kayışı arasındaki kapağı kontrol eder.
Böylece fırlatma yüksekliğini kontrol edebilir. Bu substrat buradaki XY aşamalarına, X buraya ve Y oraya bağlıdır. Yani bir XY planı etrafında hareket ediyor.
Bu nedenle, bazı özellik demosunu doğru aşamalar çizer, üç X, X, Y ve jet con jet ekseni veya XY ekseni G.So burada sinyal tarafından kontrol edilir. Yani sinyal hattı burada hareket kontrolörüne bağlanır. Bu hareket kontrol cihazının herhangi bir manuel anahtarı yoktur çünkü manuel olarak kontrol edilemez.
Dizüstü bilgisayar aracılığıyla kontrol edilir. Yani dizüstü bilgisayar bağlı. Kontrolörün arka tarafında, bir baskı hücresi XY jeti için üç x'imiz var.
Böylece bağımsız olarak üç farklı türde sinyal yapar. Ve daha sonra hareket kontrolörü rf 2, 3, 2 konektörleri aracılığıyla iletişim kurar ve doğrudan USV'ye bağlanır. Ve sonra USV dizüstü bilgisayara bağlanır.
Yani dizüstü bilgisayar kontrollü borçlu. AutoCAD programını kullanıyoruz, bu şekilde bir gen A yolu yapıyoruz bam. Ve sonra bu şekilde makine diline geçer.
Yani makine dili, basit karakter ve bunun gibi sayılara benzer şekilde aktarılır. Burada X, Y, Z aşamaları ile ilgili her pozisyon var, dosyayı seçiyorum, bu tür bir programı içeriyor ve daha sonra bu şekilde indirme programını açıyorum. Ve sonra tam olarak aynı olan metin dosyası gibi dosyadan seçim yapıyorum.
Sadece metin dosyası indirilir, metin dosyasını seçin ve otomatik olarak dizüstü bilgisayardan hareket kontrolörü yöneticisine indirin ve ardından daha önce de belirttiğim gibi BAM karakterine gider, BAM. Bu şişede N IH 3G üç fare fiberblast hücresi vardır. Ve önce eski medyayı aspire edeceğim.
Bu işlem hücrelerin geçişini sağlamaktır ve hücreler şişenin dibine yapıştırılır. Medyayı aspire ettikten sonra, içinde bir enzim olan altı RYS koyacağım. Tamam? Bu nedenle, tripsin şişeye konulduktan sonra, hücrelerin şişenin dibinden ayrılması için üç ila beş dakika beklememiz gerekir.
Şimdi medyayı yerleştirmeye ve hücreleri bir santrifüj tüpüne geçirmeye hazırız. Bire bir seyreltmedir. Bu yüzden bu medyadan altı milini buraya koyuyorum ve hepsinin geçtiğinden emin olmak için testereleri biraz yıkayacağım.
Ve şimdi hücreler bu tüpte santrifüjlenmeye hazır. Şimdi bu hücreleri bin RPM'de, üç ila beş dakikada santrifüj edeceğiz. Şimdi hücreler bir topak haline getirildiğine göre, süpernatanı aspire edeceğim.
Şimdi hücreleri PBS ile yıkayacağım. Ve bu, hücreleri boyamak için. Kullandığımız lekeler esteraz yüzeylerdir.
Tamam, şimdi tekrar santrifüj yapacağız ve hücreleri bir damak haline getireceğiz. Ve PBS'yi aspire edeceğim ve hücreleri reçineleyeceğim. Sayılmak için medyadayım.
Hücreleri karıştırıyorum, böylece bir örneğini aldığımızda, konsantrasyon tüp boyunca eşit olacak. Şimdi hücre yoğunluğunu ölçmek için yüz mikrolitre hücre alacağım. Şimdi yüz mikrolitre tip ve mavi koyuyorum, bu bir leke.
Lekenin ölü hücre zarlarına nüfuz etmesi için üç ila beş dakika bekleyeceğiz. Hücreleri saydığımızda, mavi olanları saymıyoruz. Hücreler hemo sitometre ile sayılmaya hazır, 50 mikrolitre hücre karışımını hemositometrenin her iki tarafına aktaracağım.
Tamam, onu bir cam sürgü tarafı ile kapatacağım. Hemo sitometrenin iki yüzü vardır. İlk kenarı sayacağım ve her iki tarafı da saydıktan sonra ortalamayı alacağım ve sonra iki ile çarpacağım çünkü mavi renkteki türle bire bir seyreltme yaptık.
Yani temel olarak hücre yoğunluğumuz 135 çarpı 10 üzeri mil başına dört hücre olacaktır. Deneyimiz için, mil başına yarım milyon hücre konsantrasyonuna sahip bir hücre çözeltisi kullanacağız. Ve böylece 13.5 milyon hücremiz olduğuna göre, hücreleri 27 mil ortamda askıya alacağım.
İki farklı türde leke kullanıyoruz. Bu, moleküler problardan elde edilen canlı bir ölü tahlildir. İlk lekemize kalsiyum denir.
İkinci lekemiz AUM homodimer olarak adlandırılır. Ölü hücreleri lekeler. Yeşil floresan elde etmek için mavi uyarma ve kırmızı floresan elde etmek için yeşil uyarma kullanıyoruz Bu iki leke için, görüntüleme yaparken zar çözeltimiz PBS'de hazırlanacaktır.
Bu yüzden önce beş mil PBS'yi bir tüp fosfat tamponlu tuzlu suya aktaracağım. Bu tuzlu bir çözelti. Şimdi mil başına yarım mikrolitre kalsiyum ekleyeceğim.
Şimdi tüpe 2.5 mikrolitre kalsiyum ekliyorum ve PBS'nin mili başına iki mikrolitre homodimer ekliyorum. İşte btex makinesi. Hücre ve ortamın tüm hacim boyunca iyi dağılmasını sağlar.
Şimdi 200 mikrolitrelik hücreyi buradaki yediye yüklüyoruz. Ve sonra kapağı takıyoruz, bu şekilde sıkıca kapatılmış, burada valfi açıyorum ve sonra basınç hafif hava geliyor ve sonra kayışı bu şekilde ayarlıyorum. Ve sonra basıncı değiştirir.
Bu yüzden ayarlıyorum. Basınç beş PSI'dir. Boru basıncının içi beş PSI'dir.
Buradan buraya, bu deliğin içinden bağlandı. Yani burada zili açıyoruz ve sonra hücreye beş PSI basınç enjekte ediliyor ve sonra açılmaya başlıyoruz. Ve sonra Sona valfi çalışmaya başlar.
Ve sonra alt tabakayı yuvarlıyoruz. Alt tabaka sadece basit bir sürgülü camdır. Sonra uygun kısmı yüklüyoruz ve alt tabakayı bu şekilde sabitlemek için biraz eskiz bandı koyuyorum, değil mi?
Ve basitçe ben sadece düzeltiyorum. Bu yüzden, ary'nin çalışması sırasında hücreyi, ary valfini ve alt tabakayı her şeyi ayarlıyoruz, çalışmaya başlıyoruz. Böylece her şeyi kurduk ve ardından ary vanayı açtık.
Ve sonra sahneyi bu şekilde hareket ettiriyoruz, değil mi? Ve sonra alt tabaka deseni üzerine bir desen yapıyoruz, alt tabaka ve bam karakteri üzerine. Bastırdığımız bu damlacıkları daha önce yaptığımız bu boya çözeltisine batıracağım.
Ve şimdi damlacıklar 10 dakika boyunca inkübe edilecek ve daha sonra görüntülenecektir. İlk olarak, görüntüyü göz merceğinden ayarlayacağım. İlk görüntümüz sadece parlak bir alan görüntüsüdür.
Işığı kapatacağım ve filtreyi değiştireceğim, böylece yeşil floresan gösterecek olan mavi uyarım elde edeceğiz. Ve çekeceğimiz üçüncü görüntü ölü hücreler, bu Thm Homodimer boyası. Ve yeşil ışıkla kırmızı floresan alacağız.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Bu makale, bir hücre baskı projesi kullanarak 3D hücre yapısının geliştirilmesini ele almaktadır. Araştırma, hücre kapsülleme ve baskı sürecini geliştirmek için medya ve jellerin kullanımını içermektedir.
This work presents a programmable microfluidic platform for precise cell encapsulation and deposition, enabling reproducible 3D cellular architectures. The system supports early-stage target validation by providing controlled microenvironments for phenotypic screening and mechanistic de-risking of cellular responses. Integration with automated staging and valve control enhances throughput and reproducibility in discovery workflows.
The method positions itself within the discovery continuum from Early Discovery to Lead Identification by enabling hypothesis-driven cellular patterning and quantitative response measurement.