Name: Teğet Akış Ultrafiltrasyon: Kolloidal Gümüş Nanopartiküllerin Boyutu Seçme ve Konsantrasyon için Yeşil Yöntemi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-10-04T12:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 47 s
Description: Keşfedin teğet akış ultrafiltrasyon yöntemiyle kolloidal gümüş nanopartiküllerin boyut seçimi ve konsantrasyonunu. Bu çevre dostu teknik, minimal agregasyonla büyük hacimleri küçültür ve nanopartikül bütünlüğünü korur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Mühendislik ve LEADER Konsorsiyum Programları NUE yoluyla Ulusal Bilim Vakfı Fon minnetle kabul edilmektedir.

1. Kolloidal AGNPS sentezi Creighton yöntemi (biraz değiştirilmiş ucuz) 22 için reaksiyon mekanizması istenmeyen hidroliz, oda sıcaklığında ya da daha yüksek NaBH4 yan reaksiyon ile birlikte referans Pavel et.al arasında desteklenmesi bilgi de ayrıntılı olarak tarif edilmektedir. 23 <ol><li> 4-12% 40 etanol banyosu içinde bir 1.25 M NaOH içinde, hr ve son olarak otoklav, daha sonra da% 10 HNO 3 banyosu içinde 12-24 saat için her cam temizleyin. Züccaciye asit ve baz banyo adımlardan sonra ultra saf su (MΩ 17 veya daha yüksek) ile iyice beş kez en az durulanmalıdır. </li><li> Bir 2 mM NaBH4 çözeltisi, 300 ml ve 10 soğutuldu otoklavlanmış su ° C&#39;ye kullanılarak 1 mM AgNO 3 çözelti, 100 ml hazırlanması Daha düşük sıcaklıklarda NaBH4 gibi bir yan reaksiyonu önlemek olacaktır. </li><li> Bir 500 ml Erlenmeyer şişesi reaksiyon devam 2 mM NaBH4 çözeltisi 300 mlBir karıştırma çubuğu aining ve gümüş oksitlenmeyi önlemek için alüminyum folyo ile sarın şişesi. Bir karıştırma plakası üzerinde bir buz banyosu içinde şişeye yerleştirin ve 10 dakika için 325 rpm&#39;de çözelti karıştırılır. </li><li> Saf su dolu bir kolon ile durulama ile asal bir 25 ml büret. Priming sonra alüminyum folyo ile AgNO 3 çözüm ve şal ile büret doldurun. </li><li> Karanlık bir odada, sürekli karıştırma (Şekil 1A) ile NaBH4 çözelti 1 damla saniye-1 hızında 1 mM AgNO 3 solüsyonundan 50 ml eklenir. AgNO 3 ilavesi sırasında ışığa maruz kalma en aza indirmek için bir &quot;folyo çadır&quot; ile, cihazın orta bölümünde kaplayın. AgNO 3 ek 30-40 dakika gerektirir. Periyodik buz banyosu doldurun. </li><li> AgNO 3 ilave işlemi tamamlandıktan sonra, buz banyosu doldurmak ve bir ilave 45-50 dakika boyunca koloidal çözelti karıştırmaya devam edin. Kolloidal AGNPS oluşumu renksiz gelen renk değişikliği ile bildirilirbir altın sarı için, hangi AGNPS bir yüzey plazmon rezonans maksimum (Şekil 1B) bir özelliğidir. </li><li> Reaksiyon tamamlandıktan sonra, kolloid buzdolabında soğutun. Kolloid tutarlı kalmıştır varsa Kolloidal AgNP toplu bir hafta sonra kombine edilebilir, yani kolloidal çözelti toplanmaz ve toplu mümkün toplama veya kirleticileri belirlemek için UV-Vis absorpsiyon spektrofotometresi ve Raman spektroskopisi ile karakterize edilmiştir. </li></ol> 2. Kolloidal AGNPS Karakterizasyonu Bir Cary 50 UV-VIS-NIR spektrofotometre (Varian Inc) ve bir Olympus BX41 konfokal mikroskop Raman donatılmış bir LabRamHR 800 Raman sistemi (Horiba Jobin Yvon, Inc) AgNP karakterizasyonu için kullanılmıştır. Cary WinUV yazılım LabSpec v.5 ve Kökeni 8.0 yazılımı veri toplama ve analiz için kullanılmıştır. Not: tedarik parametreleri fo optimize edilmesi gerekmektedirr diğer enstrümantasyon modelleri. UV-Vis Spektrofotometresi üzerinden Kolloidal AGNPS bir Yüzey Plazmon Rezonans Belirlenmesi <ol><li> 1:10 hacim oranında Creighton kolloid ve ultra saf su ile 1 cm 3 tek küvetini doldurun. Boş bir temel düzeltme için ultra saf su ile başka bir 1 cm 3 küvetini doldurun. Bir Kimwipe ile her ikisi de küvetlerin dışında silin. </li><li> 1.0 Y maksimum -0,5 bir Y den en az absorbans moduna spektrofotometre ayarlayın. 200-800 nm X tarama penceresinde ayarlayın ve taban düzeltme ile 4,800 nm dk -1 hızlı tarama hızı seçin. </li><li> Cihaz içine su dolu küvet takın ve bir temel taraması çalıştırın. Gerekirse sıfır olmayan bir temel kontrolü elde edilene kadar tekrarlayın. </li><li> Örnek küveti ile boş küvetin değiştirin ve kolloidal numunenin UV-Vis absorpsiyon spektrumu (Şekil 1C) toplanması için bir absorbans tarama başlatabilir. </li&gt; </ol> Raman spektroskopisi ile Kolloidal AGNPS Saflık Testi Video gösterisi (10-15 dak video) zamanaşımı ve protokol metni alan kısıtlaması (en fazla 3 sayfa) nedeniyle, bu deneysel bölümde videoya olmayacaktır. <ol start="5"><li> Uyarma kaynağı (632,8 nm He-Ne), filtre (hiçbir filtre, numune, lazer gücünü ~ 17 mW), konfokal deliği (300 mikron), spektrometre (730 cm -1), holografik parmaklığı aşağıdaki gibidir: Cihaz parametre ayarlarını (600 bahçeleri / mm), objektif lens (50x uzun bir çalışma mesafesi hava objektif), maruz kalma süresi (30 sn) ve birikim döngüleri (5). </li><li> Kolloid ile 2 ml kuvars küvetine doldurmak için temiz bir pipet kullanın ve yavaşça fişi takın. Küvetin yüzeyinden parmak izleri, lekeler veya kolloid kapalı temiz bir Kimwipe kullanın. Anlamlı mikroskop sahne indirin. 50x objektif lens seçin ve sahneye küvet yerleştirin. </li><li> Las Odakdoğrudan cihaz ve Olympus kameranın video modunu kullanarak küvetin iç duvar altında AgNP kolloid üzerine er kiriş. Oda ışıkları kapatın ve Raman spektrumu (Şekil 1D) kazanır. </li></ol> 3. Teğet Akış Ultrafiltrasyon (TFU) aracılığıyla Boyutu seçimi ve Kolloidal AGNPS Yoğunlaşması Bir KrosFlo II Araştırma filtre sistemi (Spectrum Laboratories, Rancho Dominguez, CA) AgNP polidispersite sınırlamak için ve onları (Şekil 2) yoğunlaştırmak için kullanılmıştır. TFU işlemi üç adımlar şunlardır: bir 50 nm MidiKros polisülfon modül (460 cm 2), 2) boyutu seçimi ve konsantrasyonu kullanılarak AGNPS ve 50 nm arasında AgNP-agrega çap ve daha büyük (1) boyutu seçimi , 100 kD MicroKros polisülfon filtresi (20 cm2) (Şekil 3) ile bir 100 kD MidiKros filtre (200 cm 2) ve (3) daha fazla hacim azalması ile çapı 1-20 nm AGNPS. <ol><li> 2A Şekil göre peristaltik pompa boyutu 17 MASTERFLEX besleme hortumu bağlayın. Y-bağlantı ve boru bağlantı kurulumu için gerekli olacaktır. 50-nm MidiKros modülü tüp takın. Zip bağları kullanarak filtre hortumu güvenli olduğundan emin olun. BOYUT düğmesini kullanarak tüp boyutu 17 seçin. </li><li> DIR düğmesi kullanılarak pompa yönü saat yönünün tersi seçin. MODE düğmesine INT açık olduğundan emin olun. </li><li> Pompayı çalıştırmadan önce 300 Aşağıda ml dak -1 pompa hızı düşürün. Pompa hızı ikinci boru boyutuna göre ayarlanmalıdır. Bu, operatör derhal olası kaçak ancak yine de astarlama sisteminin bir etkiye sahip olmak için yeterince büyük reaksiyona izin vermek için küçük bir ayar olmalıdır. Haznesinden tüp ve filtre içine kolloid çekmek için gereken vakumu yaratmak için, hortumun orta Y-birleşme bölgesinin üst kısmına doğru, filtrenin alt bölümünde yol açar boru kesilir. </li><li&gt; Rezervuar şişeye filtresinden açar tüp bölümüne yerleştirin ve bir kelepçe veya elle Y-kavşak yakınında borunun alt kısmı kelepçe. Pompayı çalıştırın. Oluşturulan vakum kolloid sifonlamakla başlamalıdır. </li><li> Sıvı tüp aracılığıyla serbestçe sonra, pompa kapatmak bir boru kavşak ile tüp kırık bölümü katılmak ve zip bağları ile sabitleyin. Pompayı yeniden açın ve filtrasyon devam. </li><li> Sızıntı boru devresini kontrol edin. Bir sızıntı bulunursa, bir zip kravat uydurma ayarlama veya yeniden güvence altına alarak sızıntısı düzeltmez. Bir kez tüp sistemi pompa debisi hiçbir büyük 700 ml&#39;den dk -1 artabilir sızıntı ücretsiz olduğunu. Bu pompa hızı değeri boru arızasından kaçınmak için tüp büyüklüğüne göre optimize edilmelidir. Rezervuar şişe içinde sıvı neredeyse hiçbir şey bitene kadar filtrasyon devam edin. </li><li> Filtreleme işlemi tamamlandıktan sonra, 50 nm çaplı ve Smal ve AGNPS içeren süzüntü toplamakler. Retentat belirli AgNP uygulamaya göre daha fazla analiz için kaydedilebilir. </li></ol> Adım 2 <ol start="8"><li> % 2 HNO 3 ve önce 100 kD MidiKros 50 nm modül için olduğu gibi, aynı ayar kullanarak filtre yüklenmesi için saf su ile birlikte tüp durulayın. </li><li> 100-kD MidiKros modülünü kullanarak 3.3 adımı yineleyin. </li><li> Filtreleme işlemi tamamlandıktan sonra, tüp ve filtre (100 kD retentat) içeriğini toplamak. Hacim yaklaşık 50 ml olmalıdır. </li></ol> Adım 3 <ol start="11"><li> 2B Şekil göre peristaltik pompaya FİLTRE boyutu 14 MASTERFLEX tüp ve 100 kD MicroKros bağlayın. Zip bağları ile tüm kavşaklar sabitleyin. SIZE düğmesine ve 30 ml dak -1 pompa hızı düşük kullanılarak pompa hortumunu boyutu 14 seçin. </li><li> Filtrasyon işlemine başlayın. Sızıntı boru devresini kontrol edin. Bir sızıntı bulunursa, uygun ayarlayarak sızıntısı düzeltmezting veya yeniden güvence zip kravat. </li><li> Bir kez tüp sistemi sızıntı ücretsiz, pompa debisi hiçbir büyük 90 ml&#39;den dk -1 artabilir. Rezervuar şişe içinde kalan sıvı konsantre asgari bir miktarını içeren kadar filtrasyon devam edin. </li><li> Tüp ve filtre kalan içerik pompa çalışır durumdayken şişe besleme borusu kaldırarak rezervuar şişe içine alınabilir. Boru ve filtre içerikleri rezervuar şişe girdikten sonra, pompa kapalı olabilir. </li></ol> 4. Endüktif Eşleşmiş Plazma Optik Emisyon Spektroskopisi (ICP-OES) ile Kolloidal AGNPS Gümüş Tutar Kantitasyonu Her kolloidal numune kimyasal sindirildi ve gümüş miktarı A 710E spektrometre (Varian Inc) kullanarak ICP-OES ile ölçüldü. Gümüş için lineer regresyon kalibrasyon eğrisi (Şekil 4) sekiz gümüş standartlar (0, 3 kullanılarak inşa edildiEser metal analiz (Ultra Scientific) için bir 10,000 ug ml-1 gümüş standart elde edildi, 7, 10, 15, 25, 50, ve 100 ug M-1). <ol><li> Kimyasal HNO 3 örnekleri kullanılarak sindirmek. Temsili numuneler orijinal kolloid (adım 1), 50-nm süzüntü (adım 1), 100-kD retentat (adım 2), ve son 100-kD retentat (adım 3) (Şekil 3). </li><li> Için ilk olarak 100 kD retentat için 50 nm süzüntü, 1/25.000 için orijinal koloit, 1:1000 için 1:1000, ve 1:250,000: Örnekler% 2 HNO 3 Aşağıdaki birim oranlarını kullanan ile sulandırılıp Nihai 100 kD retentat. Gümüş liç önlemek için, tüm örneklerin düşük yoğunluklu polipropilen kaplarda muhafaza edilmelidir. </li><li> Ag için dalga boyu (328,068 nm), güç (1.20 kW), plazma akışı (15.0 L dk -1), Yardımcı akım (1,50 L dak -1) ve nebulizatör basınç (200 kPa aşağıdaki gibidir: ICP-OES cihazı parametreleri ayarlayın ). </li><li> Her sample 10 saniyelik bir süre ile tekrarlanan üç kopya halinde ölçülmelidir. 15 sn ve 30 sn numune alımı gecikme Arasında ölçümü stabilizasyon zamanı kullanılmalıdır. Bir yöntem boş çapraz kontaminasyon riskini azaltmak için her numune arasındaki getirilmelidir. </li></ol> 5. Transmisyon Elektron Mikroskobu (TEM) ile Kolloidal AGNPS Büyüklüğü Dağılımı A Phillips EM 208S TEM koloidal AGNPS görselleştirmek için kullanılmıştır. Elektron mikroskop yüksek çözünürlüklü Gatan Bioscan fotoğraf makinesiyle çekilmiştir ve ImageJ yazılım analiz edilmiştir. 24 <ol><li> Ultra saf su (1:100 hacim oranında) ile 100 kD retentat örnek seyreltilir. 300-örgü formvar kaplı altın ızgaraları (Elektron Mikroskobu Bilimler) üzerine orijinal kolloid ve seyreltilmiş 100-kD retentat (adım 3) Mevduat 20 ul. Izgaraları bir desikatörde kurumaya bırakın. Bir gün içinde görüntüle. </li><li> AGNPS görselleştirmek için 70 kV TEM aracın hızlanma potansiyeli ayarlayın. Cyüksek çözünürlüklü kamera kullanarak elektron mikroskop (Şekil 5) apture ve etiketli görüntü dosya biçimi (TIFF) olarak kaydedebilirsiniz. </li></ol> 6. Temsilcisi Sonuçlar Kolloidal AGNPS Sentezi ve Karakterizasyonu Creighton kolloidal AGNPS Dört litre başarıyla Şekil 1A görüntülenen kurulum kullanılarak sentezlenmiştir. Nihai kolloid karakteristik altın sarısı bir renk (Şekil 1B). 22, 23 Bu kolloid UV-Vis absorpsiyon spektrumu 394 nm (Şekil 1C) tipik bir keskin, simetrik yüzey plazmon pik (SPR) vardı. Özgün Creighton koloit ve son 100 kD retentat ve Raman spektrumu sadece üç yani titreşim modlarının, bükme (1640 cm-1) ve H2O arasında simetrik ve asimetrik germe modları (3245 cm-1 ve 3390 cm-1 sunulmuştur , sırasıyla) (Şekil 1D). &lt;/ P&gt; Kolloidal AGNPS arasında TFU TFU kurulum ve 3-adım TFU sürecinin şematik, sırasıyla Şekiller 2 ve 3 &#39;te gösterilmektedir. 1. Aşamada, bir 50 nm filtre (460 cm2) için kullanılmıştır boyutu-seçme ve orijinal kolloid (50 nm retentat yaklaşık 100 mL) 50-mil çaplı ve daha büyük AGNPS ve AgNP-agregatları uzaklaştırmak için. Bu adım aynı zamanda 50-nm süzüntü 3.9 L aşağı orijinal kolloid 4 L küçük bir hacim azalması eşlik etti. Hiçbir bozulma geri yıkama ya da akış adımı kullanıldı. Büyük hacim azaltma (yani, su kaldırma) 50-nm süzüntü sonradan 100 kD filtresi (200 cm 2) ile çalıştırıldı 2. adımda elde edildi. Elde edilen 100 kD retentat 50 ml&#39;lik bir toplam hacmine sahipti. Sentez yan ve fazla reaktifler çoğu su çözücü (100 kD süzüntü 3.850 ml) ile bu adımda bertaraf edildi. Dahası, konsantrasyon AgNP addit elde edilmiştirDaha önce rapor edilen prosedür için üçüncü bir süzme aşaması. 19, bu adım 3, daha küçük bir yüzey alanı (20 cm 2) yaklaşık 100 kD bir filtrede iyon 4.0 ml ile 100 kD retentat hacmi azalır. TEM ölçümler bu son 100 kD retentat çapı 1-20 nm asılıyor toplu AGNPS çoğunlukla oluşur olduğunu gösterecektir. Kolloidal AGNPS ICP-OES ve TEM Gümüş için bir lineer regresyon kalibrasyon eğrisi (Şekil 4) sekiz standartları (0, 3, 7, 10, 15, 25, 50, ve 100 ug L-1) imal edilmiştir. Dört temsili örnekleri koloidal her gümüş miktarı, daha sonra bilinen veriler okumada kalibrasyon eğrisinden belirlenmiştir: ilk orijinal kolloid (15.2 ppm, Şekil 3A), 50 nm Süzülen madde (14.1 ppm, Şekil 3B), 100 - kD retentat (683,1 ppm, Şekil 3C) ve son 100-kD retentat (8,538.9 ppm, Şekil 3B).15.2 ppm gerçek verim Creighton reaksiyon için 15.4 ppm tipik teorik verim çok yakındır. AGNPS ve aşırı konsantrasyonu (ppm 8,538.9 4 ml) ile bir son 100 kD retentat (Şekil 3, şişe resim parçalar) için koyu kahverengi için orijinal koloit için altın sarısı renk belirgin bir değişiklik ile yansıtılmıştır. Filtre kalite 1 adım için, özellikle de TFU süreci için kritik olduğu bulunmuştur. Nihai retentat konsantrasyonları 3,390.1 ppm filtreleri (ağırlıklı yepyeni karşı kullanılır) durumuna bağlı 9,333.3 ppm arasında değişmektedir. Membran zarar görür gözenekleri ise, daha az 50 nm&#39;den daha çaplara sahip AGNPS da korunur ve daha sonra süzülen madde toplanır AGNPS toplam miktarını azaltacaktır. Basıncı izleme ve uygun temizlik dahil filtrasyon işlemi optimizasyonu filtrelerin ömrünü artırabilir. Temsilcisi TEM mikrografları<html> özgün Creighton koloit ve son 100 kD retentat (adım 3), sırasıyla, Şekil 5A ve 5C &#39;de gösterilmektedir. Onların Ayrı ayrı devlet, AGNPS daha açık gri arka plan üzerinde siyah yuvarlak alanlar olarak görünür. Yaklaşık olarak 800 AGNPS İki numunenin her birinin TEM mikrografları tespit edilmiştir ve Görüntü J yazılımı kullanılarak analiz edildi. Bir parçacık tam ve kapalı çevre tarafından tanımlanmıştır. Bir alan eşik değer TEM mikrografları çözümüne göre 1.0 nm 2 olarak belirlendi. AgNP sayar ve alan veriler Microsoft Excel ve AgNP çapları ekstrapole edilmiştir içine ihraç edilmiştir. Özgün koloit ve son 100 kD retentat içinde ortalama çap AgNP sırasıyla, 9.3 nm ve 11.1 nm olarak ölçüldü. AGNPS çapı ölçümleri daha sonra Menşe 8.0 yazılımı ihraç edildi ve TEM boyutu histogram (Şekil 5B ve 5D) her bir örnek için inşa edilmiştir. 1 &quot;src =&quot; / files/ftp_upload/4167/4167fig1.jpg &quot;/&gt; Şekil 1. A) Sentez kurulum, B) Karakteristik renk, C) UV-Vis absorpsiyon spektrumu ve Creighton kolloidal AGNPS D) Raman spektrumu. <img alt="Şekil 2," src="/files/ftp_upload/4167/4167fig2.jpg" /> Şekil A) 1. ve 2. adımları için 2 TFU deney düzeneği:. I) Rezervuar Creighton kolloidal AGNPS içeren. Süzüntü toplama II) Rezervuar. Tüp III) Y-bağlantı. IV) Peristaltik pompa kafası. . V) Ya 50-nm veya 100-kD Midi Kros filtresi B) Adım 3: I) Rezervuar Creighton kolloidal AGNPS içeren. Süzüntü toplama II) Rezervuar. III) 100-kD Mikro Kros filtresi. <img alt="Şekil 3" src="/files/ftp_upload/4167/4167fig3.jpg" /> Şekil 3. Flowchart TFU süreci tasvir. Mavi gölgeli kutular daha fazla analiz için toplanan AGNPS arasında kolloidal süspansiyonlar işaretleyin. Flakon photographs 50-nm süzüntü 100 kD Midi Kros kullanarak hacim küçültme sonrasında elde 50-nm filtresi (460 cm 2), C) ilk 100-kD retentat yoluyla orijinal kolloid işledikten sonra toplanan) A) Orijinal kolloid toplu, B göster Filtre (200 cm 2), ve 100 kD Mikro Kros filtre (20 cm 2) kullanarak hacim azalması sonucu D) nihai 100 kD retentat. 100-kD süzüntü suyu gibi görünüyor. <img alt="Şekil 4," src="/files/ftp_upload/4167/4167fig4.jpg" /> Şekil 4, sekiz gümüş standartları kullanılarak yapılan okumada doğrusal kalibrasyon:. 0, 3, 7, 10, 15, 25, 50, ve 100 ug L-1. <img alt="Şekil 5," src="/files/ftp_upload/4167/4167fig5.jpg" /> A) Orijinal Creighton AGNPS ve C Şekil 5. TEM mikrografları) son 100-kD retentat (ölçek çubuğu100 nm). TEM boyutu histogramlar B için yaklaşık 800 AGNPS) orijinal Creighton AGNPS analiz ederek inşa, ve D) son 100-kD retentat. Şekil 5B içerlek karşılaştırma amacıyla genişletilmiş 41-75 nm boyut aralığı gösterir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/4167/4167fig5large.jpg" target="_blank">büyük bir rakam görmek için buraya tıklayın</a> .

<ol><li>The Project on Emerging Nanotechnologies. , Available from: 
		
	 <a target="_blank" href="http://www.nanotechproject.org/inventories/consumer/analysis_draft">http://www.nanotechproject.org/inventories/consumer/analysis_draft</a> (2011).</li>
<li>Savage, N., Diallo, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nanomaterials+and+Water+Purification%3A+Opportunities+and+Challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Nanoparticle+Research%22%5BJournal%5D)">Nanomaterials and Water Purification: Opportunities and Challenges.</a> Journal of Nanoparticle Research. 7, 331-342 (2005).</li>
<li>Jain, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silver+Nanoparticles+in+Therapeutics%3A+Development+of+an+Antimicrobial+Gel+Formulation+for+Topical+Use%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Silver Nanoparticles in Therapeutics: Development of an Antimicrobial Gel Formulation for Topical Use.</a> Mol. Pharmaceutics. 6, 1388-1401 (2009).</li>
<li>Dal Lago, V., Franca, dO., de, A. G., Kobarg, J., Borba Cardoso, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Size-selective+silver+nanoparticles%3A+future+of+biomedical+devices+with+enhanced+bactericidal+properties%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Mater.+Chem%22%5BJournal%5D)">Size-selective silver nanoparticles: future of biomedical devices with enhanced bactericidal properties.</a> J. Mater. Chem. 21, 12267-12273 (2011).</li>
<li>Panacek, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silver+Colloid+Nanoparticles%3A+Synthesis%2C+Characterization%2C+and+Their+Antibacterial+Activity%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Phys.+Chem.+B%22%5BJournal%5D)">Silver Colloid Nanoparticles: Synthesis, Characterization, and Their Antibacterial Activity.</a> J. Phys. Chem. B. 110, 16248-16253 (2006).</li>
<li>Elechiguerra, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interaction+of+silver+nanoparticles+with+HIV-1%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Nanobiotechnology%22%5BJournal%5D)">Interaction of silver nanoparticles with HIV-1.</a> Journal of Nanobiotechnology. 3, 6(2005).</li>
<li>Jana, N. R., Sau, T. K., Pal, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growing+Small+Silver+Particle+as+Redox+Catalyst%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Phys.+Chem.+B%22%5BJournal%5D)">Growing Small Silver Particle as Redox Catalyst.</a> J. Phys. Chem. B. 103, 115-121 (1999).</li>
<li>Tolaymat, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+evidence-based+environmental+perspective+of+manufactured+silver+nanoparticle+in+syntheses+and+applications%3A+A+systematic+review+and+critical+appraisal+of+peer-reviewed+scientific+papers%5BTitle%5D)+AND+%22Sci.+Total+Environ%22%5BJournal%5D)">An evidence-based environmental perspective of manufactured silver nanoparticle in syntheses and applications: A systematic review and critical appraisal of peer-reviewed scientific papers.</a> Sci. Total Environ. 408, 999-1006 (2010).</li>
<li>Willets, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surface-enhanced+Raman+scattering+%28SERS%29+for+probing+internal+cellular+structure+and+dynamics%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+and+Bioanalytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Surface-enhanced Raman scattering (SERS) for probing internal cellular structure and dynamics.</a> Analytical and Bioanalytical Chemistry. 394, 85-94 (2009).</li>
<li>Novak, J. P., Nickerson, C., Franzen, S., Feldheim, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purification+of+Molecularly+Bridged+Metal+Nanoparticle+Arrays+by+Centrifugation+and+Size+Exclusion+Chromatography%5BTitle%5D)+AND+%22Anal.+Chem%22%5BJournal%5D)">Purification of Molecularly Bridged Metal Nanoparticle Arrays by Centrifugation and Size Exclusion Chromatography.</a> Anal. Chem. 73, 5758-5761 (2001).</li>
<li>Hossain, M. K., Kitahama, Y., Huang, G. G., Han, X., Ozaki, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surface-enhanced+Raman+scattering%3A+realization+of+localized+surface+plasmon+resonance+using+unique+substrates+and+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+and+Bioanalytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Surface-enhanced Raman scattering: realization of localized surface plasmon resonance using unique substrates and methods.</a> Analytical and Bioanalytical Chemistry. 394, 1747-1760 (2009).</li>
<li>Henglein, A., Giersig, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Formation+of+Colloidal+Silver+Nanoparticles%3A+Capping+Action+of+Citrate%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Phys.+Chem.+B%22%5BJournal%5D)">Formation of Colloidal Silver Nanoparticles: Capping Action of Citrate.</a> J. Phys. Chem. B. 103, 9533-9539 (1999).</li>
<li>Sapsford, K. E., Tyner, K. M., Dair, B. J., Deschamps, J. R., Medintz, I. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analyzing+Nanomaterial+Bioconjugates%3A+A+Review+of+Current+and+Emerging+Purification+and+Characterization+Techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Anal.+Chem%22%5BJournal%5D)">Analyzing Nanomaterial Bioconjugates: A Review of Current and Emerging Purification and Characterization Techniques.</a> Anal. Chem. 83, 4453-4488 (2011).</li>
<li>Al-Somali, A., Krueger, K. M., Falkner, J. C., Colvin, V. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recycling+Size+Exclusion+Chromatography+for+the+Analysis+and+Separation+of+Nanocrystalline+Gold%5BTitle%5D)+AND+%22Anal.+Chem%22%5BJournal%5D)">Recycling Size Exclusion Chromatography for the Analysis and Separation of Nanocrystalline Gold.</a> Anal. Chem. 76, 5903-5910 (2004).</li>
<li>Hanauer, M., Pierrat, S., Zins, I., Lotz, A., Sonnichsen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Separation+of+Nanoparticles+by+Gel+Electrophoresis+According+to+Size+and+Shape%5BTitle%5D)+AND+%22Nano+Lett%22%5BJournal%5D)">Separation of Nanoparticles by Gel Electrophoresis According to Size and Shape.</a> Nano Lett. 7, 2881-2885 (2007).</li>
<li>Sweeney, S. F., Woehrle, G. H., Hutchison, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+Purification+and+Size+Separation+of+Gold+Nanoparticles+via+Diafiltration%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Chem.+Soc%22%5BJournal%5D)">Rapid Purification and Size Separation of Gold Nanoparticles via Diafiltration.</a> J. Am. Chem. Soc. 128, 3190-3197 (2006).</li>
<li>Clarke, N. Z., Waters, C., Johnson, K. A., Satherley, J., Schiffrin, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Size-Dependent+Solubility+of+Thiol-Derivatized+Gold+Nanoparticles+in+Supercritical+Ethane%5BTitle%5D)+AND+%22Langmuir%22%5BJournal%5D)">Size-Dependent Solubility of Thiol-Derivatized Gold Nanoparticles in Supercritical Ethane.</a> Langmuir. 17, 6048-6050 (2001).</li>
<li>Schaaff, T. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolation+of+Smaller+Nanocrystal+Au+Molecules%3A+Robust+Quantum+Effects+in+Optical+Spectra%5BTitle%5D)+AND+%22J+Phys+Chem+B%22%5BJournal%5D)">Isolation of Smaller Nanocrystal Au Molecules: Robust Quantum Effects in Optical Spectra.</a> J Phys Chem B. 101, 7885-7891 (1997).</li>
<li>Trefry, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Size+Selection+and+Concentration+of+Silver+Nanoparticles+by+Tangential+Flow+Ultrafiltration+for+SERS-Based+Biosensors%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Chem.+Soc%22%5BJournal%5D)">Size Selection and Concentration of Silver Nanoparticles by Tangential Flow Ultrafiltration for SERS-Based Biosensors.</a> J. Am. Chem. Soc. 132, 10970-10972 (2010).</li>
<li>Bhattacharjee, S., Bhattacharjee, C., Datta, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+on+the+fractionation+of+%26+beta-lactoglobulin+from+casein+whey+using+ultrafiltration+and+ion-exchange+membrane+chromatography%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Membr.+Sci%22%5BJournal%5D)">Studies on the fractionation of & beta-lactoglobulin from casein whey using ultrafiltration and ion-exchange membrane chromatography.</a> J. Membr. Sci. 275, 141-150 (2006).</li>
<li>Eppler, A., Weigandt, M., Schulze, S., Hanefeld, A., Bunjes, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+different+protein+concentration+techniques+within+preformulation+development%5BTitle%5D)+AND+%22Int.+J.+Pharm%22%5BJournal%5D)">Comparison of different protein concentration techniques within preformulation development.</a> Int. J. Pharm. 421, 120-129 (2011).</li>
<li>Creighton, J. A., Blatchford, C. G., Albrecht, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasma+resonance+enhancement+of+Raman+scattering+by+pyridine+adsorbed+on+silver+or+gold+sol+particles+of+size+comparable+to+the+excitation+wavelength%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Chem.+Soc.+Faraday+Trans%22%5BJournal%5D)">Plasma resonance enhancement of Raman scattering by pyridine adsorbed on silver or gold sol particles of size comparable to the excitation wavelength.</a> J. Chem. Soc. Faraday Trans. 2, 790-798 (1979).</li>
<li>Pavel, I. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estimating+the+Analytical+and+Surface+Enhancement+Factors+in+Surface-Enhanced+Raman+Scattering+%28SERS%29%3A+A+Novel+Physical+Chemistry+and+Nanotechnology+Laboratory+Experiment%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Chem.+Educ%22%5BJournal%5D)">Estimating the Analytical and Surface Enhancement Factors in Surface-Enhanced Raman Scattering (SERS): A Novel Physical Chemistry and Nanotechnology Laboratory Experiment.</a> J. Chem. Educ. , (2011).</li>
<li>Rasband, W. S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRasband%2C+WS+%22ImageJ%22">ImageJ</a>. , National Institutes of Health. Bethesda, Maryland, USA. Available from: 
		
	 <a target="_blank" href="http://imagej.nih.gov/ij">http://imagej.nih.gov/ij</a> (1997).</li>
<li>Kelly, K. L., Coronado, E., Zhao, L. L., Schatz, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Optical+Properties+of+Metal+Nanoparticles%3A+The+Influence+of+Size%2C+Shape%2C+and+Dielectric+Environment%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Phys.+Chem.+B%22%5BJournal%5D)">The Optical Properties of Metal Nanoparticles: The Influence of Size, Shape, and Dielectric Environment.</a> J. Phys. Chem. B. 107, 668-677 (2003).</li>
<li>Śileikaitċ, A., Prosyčevas, I., Puišo, J., Juraitis, A., Guobienċ, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+Silver+Nanoparticles+Produced+by+Chemical+Reduction+of+Silver+Salt+Solution%5BTitle%5D)+AND+%22Mater.+Sci.+%28Medziagotyra%29%22%5BJournal%5D)">Analysis of Silver Nanoparticles Produced by Chemical Reduction of Silver Salt Solution.</a> Mater. Sci. (Medziagotyra). 12, 287-291 (2006).</li>
<li>Lewis, L. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemical+catalysis+by+colloids+and+clusters%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Rev%22%5BJournal%5D)">Chemical catalysis by colloids and clusters.</a> Chem. Rev. 93, 2693-2730 (1993).</li>
<li>Li, Y., Wu, Y., Ong, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Facile+Synthesis+of+Silver+Nanoparticles+Useful+for+Fabrication+of+High-Conductivity+Elements+for+Printed+Electronics%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Chem.+Soc%22%5BJournal%5D)">Facile Synthesis of Silver Nanoparticles Useful for Fabrication of High-Conductivity Elements for Printed Electronics.</a> J. Am. Chem. Soc. 127, 3266-3267 (2005).</li>
<li>Sun, Y., Xia, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shape-Controlled+Synthesis+of+Gold+and+Silver+Nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Shape-Controlled Synthesis of Gold and Silver Nanoparticles.</a> Science. 298, 2176-2179 (2002).</li>
<li>Han, X., Zhao, B., Ozaki, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surface-enhanced+Raman+scattering+for+protein+detection%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+and+Bioanalytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Surface-enhanced Raman scattering for protein detection.</a> Analytical and Bioanalytical Chemistry. 394, 1719-1727 (2009).</li>
<li>Pavel, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Label-Free+SERS+Detection+of+Small+Proteins+Modified+to+Act+as+Bifunctional+Linkers%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Phys.+Chem.+C%22%5BJournal%5D)">Label-Free SERS Detection of Small Proteins Modified to Act as Bifunctional Linkers.</a> J. Phys. Chem. C. 112, 4880-4883 (2008).</li>
<li>Ladner, D. A., Steele, M., Weir, A., Hristovski, K., Westerhoff, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functionalized+nanoparticle+interactions+with+polymeric+membranes%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Hazard.+Mater%22%5BJournal%5D)">Functionalized nanoparticle interactions with polymeric membranes.</a> J. Hazard. Mater. , (2011).</li>
</ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

UV-Vis Absorbsiyon Spektrometresi ve Kolloidal AGNPS Raman Spektroskopisi Bu, iyi bir kolloid absorbsiyon spektrumunu, yüzey plazmon rezonans tepe sayı AGNPS artar simetri olarak azalttığı bilinmektedir. Ayrıca, daha geniş veya daha AgNP toplama kırmızı-kaydırılmış zirveleri görünüme neden olur. 25,26 394 nm &#39;de bir tek, keskin ve simetrik SPR tepe varlığı orta toplama ve boyut dağılımının küçük, yuvarlak AGNPS göstergesidir. Önce ve ultrafiltrasyon s...

<table border="1"><tr><td> Gümüş nitrat (AgNO 3) </td><td> Acros Organics Inc </td><td> CAS: 7761-88-8 </td><td></td></tr><tr><td> Sodyum borohidrid (NaBH4) </td><td> Acros Organics Inc </td><td> CAS: 16940-66-2 </td><td></td></tr><tr><td> Nitrik asit (HNO 3, Optima) </td><td> Fisher Scientific Inc </td><td> A467-1 </td><td> ICP analizi için metal tenörü Trace </td></tr><tr><td> 10.000 mg ml -1 gümüş standart, EnviroConcentrate </td><td> Ultra Bilimsel </td><td> ABD-IAA-047 </td><td></td></tr><tr><td> KrosFlo Araştırması II i Teğet Akış Filtrasyon Sistemi </td><td> Spektrum Laboratories Inc </td><td> <a href="http://www.spectrumlabs.com/pshop/RequestPrice/index.html?LiFrom=%2Ffiltration%2FKR2SystemO.html;FrName=Research+IIi+System;Pn=SYR2-U20-01N;" target="_blank">SYR2-U20-01N</a> </td><td></td></tr><tr><td> 0.05 mikron PS (0.5 mm) 460 cm 2 </td><td> Spektrum Laboratories Inc </td><td> <a href="http://www.spectrumlabs.com/filtration/MidiKros.html?Pn=X30S-900-02N;" target="_blank">X30S-900-02N</a> </td><td></td></tr><tr><td> Midi 100 kD PS 200 cm 2 </td><td> Spektrum Laboratories Inc </td><td> X3-100S-901-02N </td><td></td></tr><tr><td> Micro100 kD PS 20 cm 2 </td><td> Spektrum Laboratories Inc </td><td> X1AB-300-10N </td><td></td></tr><tr><td> MASTERFLEX C-Flex hortum L / S Boyutu 17 </td><td> Cole-Palmer Instrument Co </td><td> 06424-17 </td><td></td></tr><tr><td> MASTERFLEX C-Flex hortum L / S Boyutu 14 </td><td> Cole-Palmer Instrument Co </td><td> 06424-14 </td><td></td></tr><tr><td> Cary 50 UV-VIS-NIR spektrofotometre </td><td> Varian Inc </td><td></td><td></td></tr><tr><td> LabRam HR 800 sistemi </td><td> Horiba Jobin Yvon A.Ş. </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Varian 710ES ICP-OES </td><td> Varian Inc </td><td></td><td></td></tr></table> Tablo 1. Özgül reaktifler ve ekipman.

teğet akış ultrafiltrasyon: kolloidal gümüş nanopartiküllerin boyutu seçme ve konsantrasyon için &quot;yeşil&quot; yöntemi

Tangential Flow Ultrafiltration: A  &ldquo;Green&rdquo; Method for the Size Selection and Concentration of Colloidal Silver Nanoparticles

Günümüzde yaygın olarak bunların AGNPS güçlü antimikrobiyel özellikleri nedeniyle tüketici ürünleri, 1 su dezenfektanlar, 2 Therapeutics, 1, 3 ve 4 Biyomedikal cihazların üretiminde kullanılmaktadır. 3-6 Bu nanoparçacık uygulamalar kuvvetle AgNP boyut ve toplama durum tarafından etkilenmektedir . Birçok zorluklar kontrollü imalat 7 ve kapaklama / ajanlar veya organik çözücüler stabilize agresif kimyasal arınmış unfunctionalized, homojen AGNPS büyüklüğü tabanlı yalıtım 4,8 var. 7-13 Sınırlamalar, reaktiflerin toksisitesi yüksek maliyetler ortaya veya azaltılmış AgNP sentez veya izolasyon yöntemleri (örneğin, santrifüj, boyut bağımlı çözünürlük, boyut dışlama kromatografisi vb) verimlilik. 10,14-18 Bunun üstesinden gelmek için, son zamanlarda TFU büyükse, konsantrasyonu üzerinde kontrol ve izin gösterdi Creighton AGNPS (300 agregasyonu devletBöyle Ultrasantrifügasyon gibi izolasyon geleneksel yöntemlere kıyasla 198.7 mg ml -1) 15.3 mg ml -1 ml aşağı 10 ml. 19 TFU genellikle proteinler, virüslerin ve hücrelerin ağırlık temelli izolasyon için kullanılan bir devridaim yöntemi. Kısaca 20,21, sıvı numune kD 1.000 ila 10 kD arasında değişen gözenek büyüklüğüne sahip içi boş elyaf membran bir dizi geçirilir. Büyük bileşenlerin (retentat) aynen korunurken örnek küçük askıya veya çözünmüş bileşenler (süzüntü) çözücü ile birlikte gözenekli bariyer geçecek. TFU o ne zarar örnek olarak &quot;yeşil&quot; bir yöntem olarak kabul veya zehirli aşırı ayıraç ve yan ortadan kaldırmak için ek çözücü gerektirir olabilir. Her ikisi de hidrofobik ve hidrofilik filtreler bulunmaktadır Dahası, TFU nanoparçacıklar büyük bir çeşitlilik için uygulanabilir. Bu çalışmanın iki temel amacı vardı: 1) göstermek içinBir davet video deneyimi ve 2 ile TFU yaklaşımın deneysel yönlerini) kolloidal nanopartiküller ve retentat daha küçük hacimli büyük hacimler için TFU yöntemin uygulanabilirliğini göstermek için. İlk olarak, unfuctionalized AGNPS (4 L, 15.2 ug ml-1) NaBH4 ile AgNO 3 azaltılması ile iyi kurulmuş Creighton 22,23 yöntem kullanılarak sentezlendi. AgNP polidispersite sonra iki 100-kD (200 cm 2 ve 20 cm 2) Filtreleri takip AGNPS ve AgNP-agrega daha büyük 50 nm, kaldırmak için bir 50-nm filtresi (460 cm 2) kullanılarak bir 3-adım TFU yoluyla minimize edildi AGNPS konsantre. Örnek örnekleri transmisyon elektron mikroskobu, UV-Vis absorpsiyon spektrofotometresi, Raman spektroskopisi ve indüktif eşleşmiş plazma optik emisyon spektroskopisi ile karakterize edildi. Nihai retentat yüksek konsantrasyonlu (4 mi, 8,539.9 mg ml-1) henüz birleştirilmiş ve homojen aşağı oluşuyorduÇapı 1-20 nm AGNPS. Bu, yaklaşık% 62 arasında bir konsantrasyonda gümüş verim karşılık gelir.

Teğet Akış ultrafiltrasyon (TFU) biosamples ağırlığı bazlı ayrılması için kullanılan bir devridaim yöntemi. TFU boyutu-select (1-20 nm çapında) uyarlanmış ve yüksek polidispers gümüş nanopartikülleri büyük bir hacmi (15.2 mikrogram ml 4 L konsantre edildi<sup&gt; -1</sup8,539.9 mikrogram ml&gt; 4 aşağı ml<sup&gt; -1</sup&gt;) Minimal agregasyonu ile.

Teğet Akış Ultrafiltrasyon: Kolloidal Gümüş Nanopartiküllerin Boyutu Seçme ve Konsantrasyon için &quot;Yeşil&quot; Yöntemi

Günümüzde AgNP'ler, ... nedeniyle tüketici ürünlerinin,1 su dezenfektanlarının,2 terapötiklerin1, 3 ve biyomedikal cihazların4 üretiminde yaygın olarak kullanılmaktadır.

Bu prosedürün genel amacı, daha büyük hacimli kolloidal nanoparçacıklar ve daha küçük hacimli Tate için teğetsel akış ultrafiltrasyon yönteminin uygulanabilirliğini göstermektir. İlk olarak dört litre sitrat kolloidal gümüş nanoparçacık sentezleyin. UV-Vis absorbsiyon spektrofotometrisi kullanarak yüzey plazmon rezonansını belirleyip kolloidin kalitesini doğrulayın.Ardından, bu kolloidi boyutlandırmak, seçmek ve dört mililitre su içerisinde konsantre etmek için teğetsel akışlı ultrafiltrasyon kullanın. Daha sonra, indüktif eşleşmiş plazma optik emisyon spektroskopisi ile orijinal kolloiddeki ve ultrafiltrasyon sürecinin temsilci örneklerindeki gümüş miktarını belirleyin. Son olarak, görüntü işleme ile birlikte transmisyon elektron mikroskopisi uygulayın.Orijinal kolloid ve final ultrafiltrasyondaki gümüş nanoparçacıkların boyut dağılımını göstermek için Image J yazılımı kullanılır. I-C-P-O-E-S kullanarak nanomalzeme miktar belirlemeye yeni başlayan kişilerin, cam malzemelerin her türlü eser metal kontaminasyonundan arındırılmış olduğundan emin olmak için kritik öneme sahip olan cam temizleme prosedürlerini öğrenmeleri gerekecektir. Ayrıca kolloidal örneklerin uygun şekilde sindirilmesi ve I-C-P-O-E-S kalibrasyon standartlarının hazırlanması için gereken süre de önemlidir.Boyut dışlama kromatografisi, fraksiyonel kristalizasyon ve jel elektroforezi gibi diğer yöntemlerin aksine, bu yöntem agregasyon, sentez reaktiflerinin toksisitesi, istenmeyen kaplamalar, yüksek maliyet ve/veya düşük verimlilik gibi sorunlardan kaçınmaktadır. Colorado Suen nanopartiküllerinin sentezini ve bunların görünür-yakın kızılötesi spektral fotometre ile I-C-P-O-E-S kullanılarak karakterizasyonunu, laboratuvarımdan araştırma öğrencileri olan Austin Williams, Joshua Baker ve Catherine Anders gösterecekler. Merhaba, ben Dr. Woolley; teğetsel akış filtrasyonunu ben gerçekleştireceğim ve Jackie Cisco da elektron mikroskobisini yapacak. Tüm cam malzemeler titizlikle temizlenmelidir; detaylar beraberindeki metinde açıklanmıştır.10 °C'de soğutulmuş otoklav suyu kullanarak, 300 mililitre iki milimolar sodyum borhidrür çözeltisi ve 100 mililitre bir milimolar gümüş nitrat çözeltisi hazırlayın. Ardından, sodyum borhidrür çözeltisinin 300 mililitresini, içinde manyetik karıştırıcı bulunan 500 mililitrelik bir Erlenmeyer reaksiyon balonuna ekleyin. Gümüş oksidasyonunu önlemek için balonu alüminyum folyo ile sarın ve buz üzerinde karıştırın.25 mililitrelik bir büreti hazırlamak için önce büreti tam bir kolon ultrapure su ile, ardından tam bir kolon gümüş nitrat ile durulayın. Daha sonra büreti alüminyum folyo ile sarın ve gümüş nitrat çözeltisiyle doldurun. Karanlık bir odada, sodyum veya hidrit çözeltisine 50 mililitre gümüş nitrat çözeltisi ekleyin.Işık maruziyetini en aza indirmek için düzeneğin orta bölümünü bir folyo çadır ile kapatın. Bu süre boyunca buz banyosunu periyodik olarak yenileyin. Kolloidal çözeltiyi buz üzerinde 45 ila 50 dakika daha karıştırmaya devam edin.Gümüş nanoparçacıkların oluşumu, gümüş nanoparçacıkların yüzey plazmon rezonans maksimumuna özgü olan, renksizden altın sarısına doğru gerçekleşen renk değişimi ile belirtilir. Elde edilen kolloidi soğutun. Bir mililitrelik tek kullanımlık Q-cuvete, Creighton kolloidi ve ultrapure suyu 1:10 hacim oranında doldurun. Boş baz çizgisi düzeltmesi için başka bir Q-cuvete ultrapure su doldurun.Her iki kuvetin dışını bir Kim wipe ile silin. Spektrofotometreyi, Y minimumu -0,5'ten Y maksimumu 1,0'a kadar absorbans moduna ayarlayın. Ayrıca, X tarama penceresini 200 ile 800 nanometre arasına ayarlayın ve baz hattı düzeltmeli hızlı bir tarama hızı seçin.Suyla doldurulmuş Q vet'i cihaza yerleştirin ve bir baz hat taraması gerçekleştirin. Sıfır olmayan bir baz hat kontrolü elde edilene kadar gerekirse işlemi tekrarlayın. Boş Q.Vet'i numune Q vet ile değiştirin ve kolloidal numunenin UV vis absorbsiyon spektrumunu toplamak için bir absorbans taraması başlatın.17 master flex besleme borusunu beraberindeki metinde açıklandığı şekilde peristaltik pompaya bağlayın, DIR düğmesini kullanarak saat yönünün tersine pompa yönünü seçin ve mod düğmesinin INT konumunda olduğunu doğrulayın. Pompa hızını dakikada 300 mililitrenin altına ayarlayın. Ardından, filtrasyon döngüsünde vakum oluşturarak sistemi hazırlayın.Sıvı sistem içinde serbestçe akmaya başladığında, pompayı kapatın, tüp eklemindeki portu kapatın ve klempi çıkarın. Pompayı tekrar açın ve tüp devresinde sızıntı olup olmadığını kontrol edin. Şimdi, pompa akış hızını tüp boyutuna göre artırın.Rezervuar şişesindeki sıvı neredeyse tükenene kadar filtrasyona devam edin ve ardından pompayı kapatın, pompa hızını düşürün ve filtrasyon döngüsünden tate'yi toplayın. Tate, 50 nanometreden büyük nano parçacıklardan oluşur. Ardından, 50 nanometreden küçük nano parçacıklardan oluşan filtratı toplayın.Tate daha ileri analizler için saklanabilir ve filtrat bir sonraki adımda kullanılır. Ardından, 20 nanometreden daha küçük çaplı nanopartiküller seçilir. Tüpü, ultrapure su içinde %2'lik nitrik asit ile durulayın.Filtrasyon işlemini 100 kilodaltonluk bir CROs filtresi ile tekrarlayın. Filtrasyon döngüsünden reteni toplayın. Örnek, daha küçük olan 100 KD mikrofiltre ve daha küçük boyutlu 14 numara hortum kullanılarak; hazırlama ve filtrasyon adımları için 30 ml ve 90 ml'lik daha düşük pompa hızlarıyla daha fazla konsantre edilebilir.Bu yöntem, gümüş nanopartikül hazırlama sürecindeki saflaştırma basamakları boyunca gümüş miktarını belirlemek için tasarlanmıştır. Numunelerde gümüş sızıntısını önlemek için düşük yoğunluklu polipropilen kaplar kullanın. İlk olarak numuneleri derişik nitrik asit ile kimyasal olarak sindirin.Sekiz standart kullanarak bir gümüş kalibrasyon eğrisi de hazırlayın. Şimdi I-C-P-O-E-S cihazında gümüş için dalga boyu, radyo frekans gücü, plazma akışı, yardımcı akış ve nebulizatör basıncı parametrelerini ayarlayın. Ayrıca cihazı, her örneği 10 saniyelik bir tekrar süresiyle üç paralel ölçüm yapacak şekilde ayarlayın.15 saniyelik ölçüm stabilizasyon süresi ve 30 saniyelik numune alım gecikmesi arasında kullanın. Ayrıca, potansiyel çapraz kontaminasyonu azaltmak için her numune arasında bir metod boşluğu (blank) eklediğinizden emin olun. Şimdi, numuneleri yükleyin ve 100 kilodalton tate numunesini ultrapure su ile seyrelterek ölçün.Şimdi, orijinal kolloidden 20 µL ve seyreltilmiş 100 kDa tate örneğinden 20 µL'yi 300 mesh form bar kaplı altın gridler üzerine damlatın. Gridlerin havada kuruması için bekleyin. Gümüş nanoparçacıkları görüntülemek için TEM cihazının hızlandırıcı potansiyelini 70 kV'a ayarlayın; yüksek çözünürlüklü kamera ile elektron mikrografları yakalayın ve bunları etiketli görüntü dosyaları (TIFF) formatında kaydedin.Dört litrelik kret ve kolloidal gümüş nanoparçacık hazırlama işleminde, nihai kolloid karakteristik altın sarısı bir renge sahipti. Bu kolloidin UV-vis absorbsiyon spektrumu, 394 nanometrede tipik, keskin ve simetrik bir yüzey plazmon piki göstermiştir. Orijinal kret kolloidinin ve nihai 100 kilodalton Tate'in Raman spektrumu yalnızca üç titreşim modu sergilemiştir.Suda 1.640'daki bükülme modu ile simetrik ve asimetrik gerilme modları. Gümüş nanoparçacıkların boyut seçimi ve konsantrasyonu için uygulanan üç aşamalı teğetsel akış ultrafiltrasyon işlemi, nihayetinde dört mililitrelik 100 kilodaltonluk bir retentat sağlamıştır. Sentez yan ürünlerinin ve fazla reaktiflerin çoğu su çözücüsü aracılığıyla uzaklaştırılmıştır.Gümüş miktarı daha sonra I-C-P-O-E-S kalibrasyon eğrisi kullanılarak belirlendi. Burada, gerçek verim 15,4 parts per million olan tipik teorik verime çok yakındır. Kretin reaksiyonu için, gümüş nanoparçacıklarının aşırı konsantrasyonu, orijinal kolloid için altın ve sarıdan nihai 100 kilodalton tate için koyu kahverengiye doğru dramatik bir renk değişimiyle yansıtıldı; I-C-P-O-E-S ölçümleri görsel gözlemleri doğruladı ve nihai 100 kilodalton tate için gümüş konsantrasyonunu ortaya çıkardı.Orijinal kretin kolloidi ve nihai 100 kilodalton tate'in bu TEM mikrografları, agregasyon oluşmamış durumdaki gümüş nanoparçacıkların, daha açık gri bir arka plan üzerinde siyah yuvarlak alanlar olarak göründüğünü göstermektedir. Bu TEM boyut histogramları, orijinal kreon gümüş nanoparçacıkları ve nihai 100 kilodalton ate için yaklaşık 800 gümüş nanoparçacığın analiz edilmesiyle oluşturulmuştur. Bu videoyu izledikten sonra, gümüş nanoparçacıkların konsantrasyonu ve boyut seçimi için teğetsel akış filtrasyonunun nasıl gerçekleştirileceği konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız.Çeşitli hacimler, minimum agregasyonla konsantre edilebilir. Ayrıca nanopartiküllerin nasıl karakterize edileceği konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız. Uzmanlaşıldığında, bu teknik altı saat veya daha kısa sürede gerçekleştirilebilir.Bu prosedürü uygularken, yüksek konsantrasyonlu kolloidal süspansiyonların soğutma işlemi uygulansa bile sınırlı bir ömre sahip olacağını unutmamak önemlidir. Bu kısıtlama; dikkatli araştırma, planlama ve hazırlık yoluyla yönetilebilir. I-C-P-U-S analizi için gerçekleştirilen kimyasal sindirme işlemi sırasında sıcak nitrik asit reaktifi ile çalışırken, işlemin tehlikeli olabileceğini unutmayın; bu prosedürü gerçekleştirirken kimyasal çeker ocak kullanmak veya uygun koruyucu ekipman giymek gibi gerekli önlemler alınmalıdır.

tangential-flow-ultrafiltration-green-method-for-size-selection

Research

JoVE Journal

Biology

Biyoloji

Bu protokol, su bazlı tespiti için alternatif adımlar olarak teğet akış boş elyaf ultrafiltrasyon numune konsantrasyonu sisteminin kullanımı ve ısı ayrışma...

Su bazlı Algılamak için Teğet Akış Hollow-fiber Ultrafiltrasyon ve Isı Disosiyasyon Adımlar kullanır A Modifiye EPA Method 1623<em&gt; Cryptosporidium</em&gt; Ve<em&gt; Giardia spp.</em

Bu video, karakterizasyon çalışmaları için uygun hücre dışı veziküllerin alt popülasyonlarını izole etmek için yoğunluk gradyanlı ultrasantrifüjleme tabanlı saflaştırma yöntemini göstermektedir.

Hücre Dışı Veziküllerin Alt Popülasyonlarının Saflaştırılması: Yoğunluk Gradyanlı Ultrasantrifüjleme Kullanarak Hücre Dışı Veziküllerin Alt Popülasyonlarını Saflaştırma Tekniği

Tasarım ve bir üç boyutlu (3-D) fabrikasyonu basılı mikroakışkan çapraz akışlı süzme sistemi gösterilmektedir. sistem performansını test etmek ve ultrafiltrasyon ve nanofiltrasyon (ince film kompozit) zarlarının kirlenmesinin gözlemlemek için kullanılır.

Ultrafiltrasyon / Nanofiltrasyon Membran Performans Testleri için üç boyutlu Baskılı mikroakışkan Çapraz akış Sistemi

Imalat ve kimyasal kirleticilerin (örneğin, pestisid ferbam ve antibiyotik ampisilin) ​​tespiti için Raman spektroskopi (SERS) deneyi geliştirilmiş filtre tabanlı yüzey yapmak için bir prosedür sunulmuştur.

Kimyasal bulaşanların Hızlı Algılama için Raman Spektroskopisi Tahlili Geliştirilmiş A Filtre tabanlı Yüzey

Burada sunulan deney tasarımı prosedürü, farklı topaklaştırıcıların bitki özlerindeki dağılmış parçacıkları toplama yetenekleri açısından değerlendirilmesine olanak tanır, böylece bulanıklığı ve sonraki işleme maliyetlerini azaltır.

Prosedür bitki özleri gelen Dağınık Parçacıkların çıkarması için Flokülantlar Verimliliği değerlendirin

Bu protokol, bağlanmamış partiküllerin randımanlı bir şekilde azalması olan mikro / nanopartikül mühendislik hücrelerinin saflaştırılması için bir atalet Mikroakiskan tabanlı tampon değişimi stratejisi kullanımını tarif eder.

Parazit Mikro / Nanoparçacık Hücre Mühendisliği mikroakışkan Tampon Değişim

Burada ayrıntılı işlem ve derleme kolloidal yarı iletken nanocrystal immobilizasyonu sistematik karakterizasyonu için modüler mikrosıvısal tarama platformun iletişim kurallarıdır. Tam ayarlanabilir sistem düzenlemeler ile yüksek verimli spectra koleksiyonu 4 büyüklük reaksiyon zamanı ölçekler bir kütle transferi kontrol örnekleme alanı içinde genelinde yürütülen.

Kolloidal yarı iletken Nanocrystals sistematik çalışmalar için modüler bir mikrosıvısal teknolojisi

Hızlı ve iyon-seçici tuzdan arındırma radyoaktif iyot birkaç sulu çözümler için verimli bir yöntem altın nano tanecikleri immobilize selüloz asetat Membran filtreler kullanılarak tanımlanır.

Radyoaktif iyot anyon altın nano tanecikleri gömülü membran filtre kullanarak, seçici tuzdan arındırma için verimli bir yöntem

Bu protokol, bilinmeyen bir altın nanopartikül örneğinin boyutunun belirlenmesi için UV-vis algılaması ile birlikte Asimetrik Akış Alanı Akış Fraksiyonu'nun kullanımını açıklar.

Süspansiyonda Altın Nanopartiküllerin Boyutlandırılması için Asimetrik Akış Alanı-Akış Fraksiyonasyonu

Bakteriler, biyoaktif biyolojik moleküller taşıyan nanometre boyutunda hücre dışı veziküller (EV'ler) salgılarlar. EV araştırması, biyogenezlerini, mikrop-mikrop ve konakçı-mikrop etkileşimlerindeki rollerini ve bunların potansiyel terapötik uygulamalarını anlamaya odaklanmaktadır. EV araştırmalarının standardizasyonunu kolaylaştırmak için EV'lerin çeşitli bakterilerden ölçeklenebilir izolasyonu için bir iş akışı sunulmaktadır.

Ölçeklenebilir İzolasyon ve Escherichia coli ve Diğer Bakterilerden Hücre Dışı Veziküllerin Saflaştırılması

Hücre dışı veziküller biyomedikal uygulamalar için büyük umut vaat etmektedir, ancak mevcut izolasyon yöntemleri zaman alıcıdır ve klinik kullanım için pratik değildir. Bu çalışmada, hücre dışı veziküllerin büyük hacimli biyoakışkanlardan minimum adımlarla sürekli bir şekilde doğrudan izolasyonunu sağlayan bir mikroakışkan cihaz sunuyoruz.

Çatallı A4F Mikroakışkan Cihaz ile Büyük Hacimli Örneklerden Hücre Dışı Veziküllerin Tek Adımlı İzolasyonu

Keşfedin teğet akış ultrafiltrasyon yöntemiyle kolloidal gümüş nanopartiküllerin boyut seçimi ve konsantrasyonunu. Bu çevre dostu teknik, minimal agregasyonla büyük hacimleri küçültür ve nanopartikül bütünlüğünü korur.

Teğet Akış Ultrafiltrasyon: Kolloidal Gümüş Nanopartiküllerin Boyutu Seçme ve Konsantrasyon için "Yeşil" Yöntemi

Daha fazla video keşfet