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啮齿动物识别 I

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正确鉴定实验动物是生物医学研究的基本要求。调查人员必须能够区分个别动物, 以便正确的动物用于实验程序和数据收集。科学家们已经开发了几种永久性的和临时性的方法来鉴定个体的实验动物。在这里, 我们将讨论两种最常用的方法: 耳标记和耳冲孔。

在深入探讨耳冲压过程之前, 我们先介绍一下耳打码、可供选择的拳型, 并讨论这种方法的优缺点。你可能已经猜到了, 耳朵冲孔包括在动物的外耳或耳廓上打一个洞或一个缺口。为了规范该方法, 研制了通用耳冲码。

根据位置的不同, 右耳朵上的凹槽代表单个数字, 如1、3和 5, 双缺口代表2。使用这些凹槽的不同组合, 并总结每个缺口的值, 你可以标记的动物从1到9。同样, 在左耳上, 同样的凹痕代表着十。另外, 不同的组合将覆盖10到90的范围。右侧和左侧耳廓的孔分别代表100和200。并且孔在两个表明300。因此, 例如, 如果你想标记的动物 173, 你应该打一个洞, 在右耳朵的中心 100, 三个凹口在左年总和 70, 和一个单一的缺口在右上耳朵代表单位的地方 "三"。

现在, 让我们来讨论一下三种类型的商用耳拳: 剪刀拳、拇指拳和杠杆拳。这些都有各自的优缺点。

拇指拳需要一个捏动作, 但小到足以适应一个离心管, 使耳朵组织可以更容易收集。从人体工程学上来说, 杠杆拳比拇指拳更容易使用, 尤其是对较年长的老鼠的耳朵更厚。剪刀冲床不需要挤压运动, 从而避免腕管疲劳和损伤。

尽管是一种快速而简单的识别方法, 但耳冲确实有一定的局限性。首先, 上面讨论的耳打码的上限为 399, 这可能限制了这种方法在一些 large-scale 研究中的使用。另一个限制是, 大多数动物必须掌握在颈背上, 以便阅读代码, 从而增加他们处理的时间。随着年龄的增长, 他们的耳朵的皮肤变厚, 很难执行耳冲, 而不会给动物造成重大的痛苦。因此, 在幼鼠断奶时, 最好对它们进行耳部击打。对于需要鉴定的成年大鼠, 在执行耳部穿孔时应考虑使用吸入麻醉。

现在, 您已经了解了一些有关 ear 穿孔代码和可用工具类型的背景信息, 让我们学习如何在小鼠中执行此技术。

在开始操作前, 建议用消毒液清洗冲孔工具, 用酒精冲洗, 然后彻底烘干。避免灭菌耳拳, 因为它最终会使他们迟钝。

开始, 决定动物的实验代码和使用的冲床。让我们使用代码173和剪刀冲床作为例子在这里。同样的程序适用于任何其他代码或冲床。当你准备好了, 通过抓住它的颈背来抑制动物, 这样耳朵就容易接近。从洞开始100。将右耳朵放在冲床中, 使冲床的孔远离耳廓边。其次, 施加压力, 以关闭剪刀迅速和坚定地削减通过皮肤。然后, 松开冲床并将其从耳朵中取出。避免拉或扭拳, 以防止撕裂耳朵。为了制造一个缺口把拳打在耳朵的边缘耳廓在正确的位置, 在这种情况下, 在右耳朵的顶部的 "三" 在代码的单位位置, 并做同样的-应用快速和坚定的压力, 然后打开剪刀删除它。在另一只耳朵上重复相同的步骤, 以打三凹槽--两个为 "20", 靠近外角, 一个为 "50", 靠近内角, 将代码合计为 "70"。

在将动物放回笼子之前, 确认正确的代码被打过。再次, 用消毒剂清洗冲床, 用酒精冲洗, 彻底烘干, 防止生锈。

现在, 让我们转到耳贴标签, 这是另一种廉价和 easy-to-perform 的方法, 单独识别小鼠和老鼠。有各种商业可用的耳标签。这些包括: 金属标签, 有一系列的数字和/或字母蚀刻在他们身上, 和塑料标签的字符或条形码在色彩鲜艳的背景。

金属标签的一个缺点是, 为了阅读代码, 经常需要拿起动物。相比之下, 塑料标签是容易阅读, 而无需处理的动物。塑料标签的另一个优势是它们与 MRI 成像的兼容性。虽然标签为老鼠或老鼠提供了一个单独的标识符, 但它们并不是万无一失的。标签可以丢失, 由于 over-grooming, 皮炎或感染, self-trauma 造成试图删除标签由于不宽容, 战斗, 和侵略性的繁殖行为。如果几个动物被安置在同一个笼子里, 丢失一个耳朵标记可能是麻烦的。为了绕过这个问题, 应该使用第二种形式的识别, 如在标签的对面的耳打码。一个设施应该规范的选择的耳朵被标记和代码要使用的另一只耳朵, 和所有的代码应标明在笼卡。

现在, 让我们学习如何正确应用耳标签, 因为不正确的定位可能会有几个不幸的后果。下面的应用程序, 我们还将讨论删除的耳标签, 这是通常执行的情况下, 由于标签的应用程序感染。

第一步是选择一个适当的标签, 动物被识别。在这里, 我们将使用一个金属标签来演示小鼠的程序。一定要订购的变更, 这是适用于特定的大小和风格的耳朵标签正在使用。轻轻地从纸板架上取下标签, 并将其定向到变更, 以便与孔的一端位于变更的缺口区域上。标记的尖端应该在缺口的对面。

当你准备应用耳标签时, 要抑制动物, 这样耳朵就可以方便地使用。如果后肢能在笼顶或台面等表面上休息, 动物可能会更不容易挣扎。一旦动物被克制, 将耳朵标记的点深深地放在耳朵的鼻甲上, 这样标签号就会面对动物的背部。然后, 牢牢地挤压变更关闭;耳朵的标签会刺穿耳朵和锁在一起。当你释放时, 被标记的耳朵将从变更中脱落。确认标记已正确定位和应用。如果你喜欢的耳朵标签号码面对动物的鼻子, 把标签点的基础上的耳廓在后面的耳朵, 然后挤压锁定标记到位。

标签必须放置, 这样它们不会引起耳朵弯曲, 干扰动物的移动, 或捕捉到锁定的任何部分。如果标签放得太靠近耳朵的边缘, 它就很容易被撕裂。如果定位太靠近头部, 颈部的皮肤可以捕捉到标签, 造成刺激, 疼痛, 并限制运动, 从而可以导致 self-trauma。有时, 金属标签会引起耳朵发炎和肿胀。这往往导致感染的耳廓, 并立即治疗应包括删除的标签。

为了去除标签, 用防腐溶液润湿棉签, 并用它去除标签周围的任何碎片。在严重的感染情况下, 动物可能需要麻醉。然后, 使用线切割器, 从边缘到边缘的标签环的顶部切割。重要的是, 不要穿过平坦的表面, 因为这样会压缩标签, 捏耳朵, 并对耳朵造成损害。使用止血, 轻轻地引导耳朵标签进出耳朵。滑动标签, 使卷曲结束没有通过造成创伤和扩大穿孔孔。一旦标签不见了, 用防腐的浸泡过的棉签棍擦拭耳朵, 然后把动物放回笼子里。如果耳朵有脓性分泌物, 则可能需要进行后续治疗, 并建议与兽医人员进行协商以进行评估。

现在, 你知道如何标记实验室动物使用耳标签和拳, 让我们来看看一些实验, 这些方法可以是有用的。使用耳打码的一个主要优点是, 冲头可以作为基因分型的组织样本, 从而减少由于重复处理引起的动物的压力。但是, 如果您计划使用的拳头收集 PCR 样品, 记得首先浸泡在表面去污剂溶液的设备至少3分钟, 以消除残留的 DNA 或 RNA, 然后用酒精冲洗之前使用。

如果实验持续数天, 识别技术的重要性就会进一步提高。例如, 在这个实验中, 科学家首先用金属标签标记了动物, 然后他们用悬浮的基因表达荧光蛋白的转基因肿瘤细胞注射了坐骨神经。其次, 为了量化癌症的进展, 他们拍摄的动物使用生物发光在一, 十和十八天后注射。

你刚刚看了朱庇特的演示, 展示了两种常用的啮齿动物识别方法: 耳标签和耳拳。你现在应该了解耳打码, 知道不同类型的商业可用的啮齿动物耳标签, 并应该能够准确地执行这些程序, 而不会造成重大的动物不适。

记住, 每种技术都有其优缺点, 必须根据您的实验需要来考虑。除了考虑成本, 在选择适当的识别方法时, 动物的技术和疼痛程度也应该是主要考虑因素。一如既往, 感谢收看!

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