September 27th, 2017
我们在此描述了新生儿辣椒素治疗诱导大鼠特应性皮炎的方法, 并探讨了甲醛吸入对过敏性皮炎的影响。
该程序的总体目标是通过新生儿辣椒素治疗诱发特应性皮炎样症状。并测量甲醛对特应性皮炎样症状的影响。该方法可以帮助回答皮肤病学领域与特应性皮炎的病理生理学相关的关键问题。
该技术的主要优点是诱导特应性皮炎样症状,并随着增加而建立重要的暴露系统。要制备每毫升 5 毫克辣椒素溶液,请将 1 毫升 Tween 80、1 毫升 100% 乙醇和 50 毫克辣椒素添加到 15 毫升锥形管中。然后将 8 毫升生理盐水加入锥形管中。
盖上盖子并剧烈摇晃试管,直到看不到分离的层。在出生后 12 至 48 小时内分娩辣椒素至关重要。将辣椒素溶液注射到新生 Sprague Dawley 大鼠颈部中线和背面的皮下组织中。
为防止因注射辣椒素而导致呼吸停止,将新生儿置于氧舱中,直到呼吸恢复正常。如有必要,推动新生儿的胸部以促进呼吸。首先准备配备镜子的塑料室,以便完全覆盖观察和孔,让老鼠呼吸。
将大鼠放入塑料室中,并用重物盖住室室的天花板,以防止盖子打开。然后设置一个数码摄像机,同时记录老鼠的后视和前视图。然后记录大鼠的自发行为 1 小时。
播放视频剪辑并计算抓挠行为的数量,例如右侧的老鼠所表现出的行为。还有中间的老鼠。为了对病变进行评分,确定麻醉大鼠耳朵和其他部位皮炎的范围和严重程度。
将皮肤病变范围的单位大小定义为 0.25 平方厘米。以及使用此表的皮肤病变的严重程度。准备一个亚克力玻璃盒,该盒子的两侧有两个连接器。
对于甲醛气体的循环,排气口应高于进气口。将管子连接到两个连接器。将排气管连接到循环罩或建筑物外部以排放气体。
并将另一根入口管连接到医用氧调节器。将传统的鼠笼放入亚克力玻璃盒内。将一周龄的大鼠放入笼中,然后尽可能密封亚克力玻璃盒,以防止气体泄漏。
使用保鲜膜包裹腔室,并用橡胶盖封闭腔室以实现紧密密封。将 0.5% 甲醛溶液加入连接到医用氧气调节器的加湿器瓶中。不要忘记,在甲醛中工作可能非常危险。
执行此程序时应始终采取预防措施,例如口罩和手套。接下来打开调节器并将流速设置为每分钟 5 升。将大鼠暴露在甲醛气体中 2 小时。
此处显示的是辣椒素处理大鼠皮肤炎症的代表性照片。此处显示了辣椒素处理的大鼠皮炎的时间顺序发展。这张图片说明了辣椒素处理的大鼠抓挠行为的时间顺序发展。
这是 16 周龄辣椒素处理大鼠复发性皮肤病变的代表性图像。辣椒素处理的动物血清 IgE 水平显着升高。在辣椒素处理的动物中也观察到 IL-4 mRNA 表达的显着升高。
此处显示了辣椒素处理的动物中 IL-13 mRNA 表达的显着升高。这些代表性照片显示了使用百万分之 1.2 的治疗第 5 周后的特应性皮炎。与空气对照处理相比,甲醛含量为百万分之 0.8。
在辣椒素处理的特应性皮炎模型中,暴露于 1.2 ppm 的甲醛而不是 0.8 ppm 的甲醛会显着加剧瘙痒。测量皮炎时观察到类似的结果。在用 1.2 ppm 甲醛暴露处理辣椒素处理的 AD 大鼠模型中观察到血清 IgE 水平升高。
按照此程序,其他材料(如 gylcol 溶液)可用于回答与特定物质对特应性皮炎的影响相关的其他问题。在这些发展之后,这项技术为皮肤病学领域的研究人员探索环境因素在特应性皮炎发病机制中的作用铺平了道路。
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本文描述了通过新生大鼠辣椒素处理诱导类特应性皮炎症状的方法,并研究福尔马林吸入的影响。该研究旨在增进对特应性皮炎病理生理学的理解。