Summary
حتى الآن ، فإن تطوير طرق تحديد الغدة الدرقية (PG) محدود بسبب عدم وجود نماذج حيوانية في البحوث قبل السريرية. هنا ، نؤسس نموذجا بسيطا وفعالا للفئران لتصوير PG أثناء العملية وتقييم فعاليته باستخدام جسيمات أكسيد الحديد النانوية كعامل تباين PG جديد.
Abstract
تحديد الغدة الدرقية (PG) هو حاجة حرجة غير ملباة في استئصال الغدة الدرقية. يمثل تحديد PG تحديا في جراحة الغدة الدرقية لأنه مشابه في اللون للغدة الدرقية. يعد عدم وجود نماذج حيوانية فعالة في الأبحاث قبل السريرية قيدا شديدا على تطوير تقنيات تحديد PG. يسمح هذا البروتوكول بإنشاء نموذج فئران بسيط وفعال لتحديد PG. في هذا النموذج ، يتم حقن جسيمات أكسيد الحديد الأسود النانوية (IONPs) محليا في الغدة الدرقية وتنتشر بسرعة داخل الغدة الدرقية ولكن ليس PG. يمكن التعرف بسهولة على PG الملطخ سلبا والغدة الدرقية الملطخة إيجابيا بالعين المجردة دون الحاجة إلى مجاهر خارجية. يمكن تحديد موضع PG عن طريق زيادة تباين الألوان بين الغدة الدرقية و PG ، بناء على لون IONPs الأسود. نموذج الفئران هذا منخفض التكلفة ومناسب لتحديد PG ، و IONPs هي عامل تباين PG جديد.
Introduction
الغدة الجار درقية (PG) هي غدد صماء صغيرة بيضاوية الشكل تقع في عنق البشر والفقاريات الأخرى ، والتي تنتج وتفرز هرمونات الغدة الجار درقية لتنظيم وتوازن مستويات الكالسيوم والفوسفور في الدم والعظام1. عادة ما يكون لدى البشر زوجان من PG يقعان خلف فصوص الغدة الدرقية في مواقع متغيرة. يبلغ حجم PG البشري عادة 6 مم × 4 مم × 2 مم ، ويبلغ وزنه حوالي 35-40 مجم2. تؤدي إزالة أو تلف PG إلى قصور جارات الدرق (HP) ، وهو اضطراب في الغدد الصماء يتميز بنقص كلس الدم ومستويات منخفضة أو غير قابلة للكشف من هرمونات الغدة الدرقية ، والتي تسبب مجموعة واسعة من الأعراض من التشنجات الشبيهة بالتشنجات إلى الأسنان المشوهة إلى أمراض الكلى المزمنة. بعض هذه المضاعفات قاتلة (على سبيل المثال ، قصور القلب والنوبات) 3،4،5 ؛ وبالتالي ، فإن PG ضروري في تنظيم عملية التمثيل الغذائي في الجسم والحفاظ على الحياة.
HP هي واحدة من أكثر المضاعفات شيوعا بعد جراحة الرقبة الأمامية ، خاصة في استئصال الغدة الدرقية ، وهو علاج علاجي راسخ لسرطان الغدة الدرقية ، وهو أكثر أنواع سرطان الغدد الصماء شيوعا في جميع أنحاء العالم 6,7. يحدث HP بعد استئصال الغدة الدرقية في الغالب بسبب الصدمة المباشرة أو نقص التروية أو إزالة PG في الجراحة بسبب النقص الشديد في القدرة على التمييز بشكل موثوق بين PG وفصوص الغدة الدرقية والأنسجة المحيطة الأخرى (مثل الغدد الليمفاوية وجزيئات الدهون الطرفية) في الوقت الفعلي في غرفة العمليات. في عام 2021 ، أبلغ باريوس وآخرون عن متوسط معدل قسم PG بنسبة 22.4٪ في 1,114 حالة استئصال الغدة الدرقية ، وحتى الجراحين ذوي الخبرة الذين لديهم معدل خطأ لا يقل عن 7.7٪ 8. تتوافق معدلات سوء القسم المرتفعة هذه مع تقارير أخرى مماثلة9،10،11. وبالتالي ، فإن استئصال الغدة الدرقية غير الصحيح هو عامل خطر مستقل ل HP العابر والدائم بعد العملية الجراحية.
إن تطوير طرق فعالة لتحديد PG أثناء العملية يحمل المفتاح لمعالجة هذه الحاجة الطبية الحرجة غير الملباة. ومع ذلك ، فقد تم تقييده بشدة بسبب عدم وجود نماذج حيوانية في البحوث قبل السريرية. حتى الآن ، تم إجراء معظم فحوصات تحديد PG أثناء العملية على المرضى من البشر والحيوانات الكبيرة (مثل الكلاب)12 ، وهي مكلفة ويصعب الحصول على الموافقة الأخلاقية ، وتوسيع أعداد الموضوعات ، وتكرار الاختبارات. وفي الوقت نفسه ، فإن الفأر ، وهو النموذج الفقاري الأكثر استخداما في البحوث البيولوجية ، لديه PG صغير للغاية ، بحجم أقل من 1 مم13. بسبب هذا القيد ، نادرا ما تم استخدام نماذج PG للماوس في أبحاث تحديد PG أثناء العملية.
تشير هذه الورقة إلى إنشاء نموذج فئران بسيط ومباشر وفعال لدراسات تحديد PG أثناء العملية. لقد حققنا في استخدام فئران Sprague-Dawley (SD) الأصلية دون أي تعديلات جراحية أو هندسة وراثية كنموذج حيواني موثوق به لاختبار عامل تباين تصوير PG ، IONPs ، في جراحة استئصال الغدة الدرقية. يوضح نموذج الفئران هذا بنية فسيولوجية متشابهة للغاية ل PG والبيئة المكروية المحيطة بها مع البشر ، وحجم الفئران PG كبير بما يكفي ليتم اكتشافه بصريا مقارنة بتلك الموجودة في الفئران. معظم الفئران لديها PG واحد على كل جانب من الغدة الدرقية. تم إثبات بساطة وفعالية نموذج الفئران هذا من خلال إجراء تصوير PG المعزز IONP أثناء العملية في جراحة استئصال الغدة الدرقية.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
تمت الموافقة على جميع الدراسات على الحيوانات من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام الحيوانات (IACUC) التابعة لمعهد الطب الأساسي والسرطان ، الأكاديمية الصينية للعلوم. هذه جراحة عدم البقاء على قيد الحياة.
1. الحيوان
- استخدم أنثى فأر SD تبلغ من العمر 6-8 أسابيع ، تزن 250 جراما ، لتصوير PG أثناء العملية.
2. التخدير
- قم بتشغيل جهاز التخدير.
- قبل البدء ، تأكد من أن مستوى الأيزوفلوران ممتلئ في مبخر التخدير. بعد ذلك ، قم بتشغيل الأكسجين واضبط معدل التدفق على 0.4-0.8 لتر / دقيقة. تحفيز التخدير مع 3-5٪ إيزوفلوران والحفاظ على 2٪ إيزوفلوران (معدل التدفق: 0.4-0.8 لتر / دقيقة).
- ضع فأر SD في صندوق آلة التخدير وحدد طراز القناة لبدء تخدير الحيوانات.
- مراقبة نشاط الفئران في المربع. عندما يقع الجرذ في غيبوبة ، انقله إلى مخروط الأنف للحفاظ على التخدير (وضع ضعيف فاقد للوعي دون منعكس الألم ومنعكس القرنية).
- استخدم قناع التخدير لتغطية أنف الجرذ وقم بتبديل آلة التخدير إلى وضع القناع لإبقاء الحيوان تحت التخدير أثناء الجراحة.
3. الموقف والتثبيت
- انقل الجرذ المخدر إلى ستارة جراحية على طاولة العمليات الجراحية. ضع وسادة تدفئة مسبقة التسخين تحت الحيوان للحفاظ على درجة حرارة جسم الحيوان أثناء الجراحة.
- استخدم الأربطة المطاطية لتثبيت أطراف الفئران على طاولة العمليات. ضع وسادة أسطوانية مصنوعة من الستارة تحت كتف الجرذ لتميل رأسه للخلف ، مما يعرض منطقة الرقبة تماما.
- ضع مرهم الدموع الاصطناعية على كلتا عيني الفئران لمنع الجفاف أثناء التخدير.
4. إزالة الشعر
- ضع كريم مزيل الشعر على منطقة الرقبة: حتى الفضاء تحت الفك السفلي ، وصولا إلى عملية الخنجري ، وعلى كلا الجانبين إلى الخارج من العضلة القصية الترقوية الخشائية.
- بعد 3 دقائق ، امسح الشعر بلطف وكريم مزيل الشعر بمنديل.
5. التعقيم
- استخدم كرة قطنية Iodophor لتطهير منطقة العملية 3 مرات من منتصف الرقبة إلى المنطقة المحيطة. تطهير المنطقة التي تمت إزالة الشعر منها فقط.
6. وضع الستارة الجراحية
- استخدم ثنى جراحي لتغطية منطقة العملية في رقبة الفئران. الحفاظ على ثقب الستارة الجراحية محاذاة مع منطقة تطهير الحيوان.
7. شق
- تأكد من المستوى الجراحي للتخدير عن طريق عدم وجود منعكس قرصة إصبع القدم قبل إجراء الشق. بعد ذلك ، ضع الشفرة في المشرط واستخدم المشرط لعمل شق طولي في خط الوسط الأمامي لعنق الفئران. تأكد من أن طول الشق حوالي 5 سم وفقط في الأدمة.
8. تشريح الأنسجة تحت الجلد من عضلة عنق الرحم الأمامية
- ارفع الجلد على جانبي الشق.
- استخدم مقصا للقطع طوليا على طول خط عنق الرحم.
- استخدم ملقط لفصل العضلة القصية اللامية والعضلة القصية الدرقية.
9. إصلاح عضلات الرقبة الأمامية لكلا الجانبين
- استخدم ملقط الأوعية الدموية لتثبيت العضلة القصية اللامية المنفصلة وعضلة الغدة الدرقية القصية أمام الرقبة وسحب الأنسجة المثبتة للخارج.
- استخدم المبعدة أو الإبرة لتمرير الخيط (3-0 #) عبر الأنسجة المثبتة ، وصنع عقدة ، وثبت الخيط على الستارة الجراحية لطاولة العمليات.
10. توطين الغدة الدرقية
- حدد موقع الغضروف الدرقي والغضروف الحلقي كحد أعلى في منطقة العملية. تحديد الغضروف الدرقي بناء على شكل الدرع والغضروف الحلبي بناء على شكل حلقته.
- حدد موقع القصبة الهوائية باعتبارها الحد السفلي في منطقة العملية. ابحث عن القصبة الهوائية في الجزء الأمامي والأوسط من الرقبة ، بناء على شكل حلقة الغضروف الأنبوبية.
- حدد موقع الغدة الدرقية بين الحدود العليا والسفلى - غدة حمراء على شكل فراشة على الجانب الآخر من القصبة الهوائية.
11. التعريف البصري ل PG
- حدد موقع PG على الجانبين العلوي والخارجي للغدة الدرقية. ابحث عن اثنين من PG في شكل مغزلي يبلغ طوله حوالي 1.2-2 مم وعرضه 1.0-1.5 مم وهما ضارب إلى الحمرة ولكنهما أخف من الغدة الدرقية المحيطة بحدود معينة.
- التقط صورة أمامية ل PG مع القصبة الهوائية والغدة الدرقية والحنجرة لمقارنة تأثيرات IONP كميا قبل الحقن وبعده.
- قم بتشريح الجزء الخلفي من المريء ، ثم استخدم المبعدة لكشف الجانب الأيمن من PG. التقط صورة على الجانب الأيمن من PG مع الغدة الدرقية والقصبة الهوائية.
- قم بتبديل المبعدة لكشف الجانب الآخر من PG والتقط صورة على الجانب الأيسر لهم مع الغدة الدرقية والقصبة الهوائية.
12. حقن الغدة الدرقية من IONPs
- استخدم حقنة الأنسولين لحقن 10 ميكرولتر من معلق IONPs محليا (20 مجم / مل في محلول ملحي مخزن بالفوسفات) في وسط الغدة الدرقية. اضغط برفق على موقع الحقن بشاش لمدة 5 ثوان.
13. تحديد PG بعد حقن IONPs
- بعد الحقن ، لاحظ الانتشار السريع للأيونات داخل الغدد الدرقية ولكن ليس PG ، لأنه يلطخ PG سلبا ويميزها عن الغدة الدرقية المحيطة.
- التقط صورة أمامية ل PG الملطخ سلبا مع القصبة الهوائية والغدة الدرقية والحنجرة.
- التقط صورا على الجانبين الأيسر والأيمن ل PG الملطخة سلبا باستخدام نفس الإجراءات المذكورة أعلاه.
14. استئصال الحلق والقصبة الهوائية مع الغدة الدرقية و PG
- بمجرد استنشاق الفئران للإيزوفلوران الزائد (5٪ إيزوفلوران لأكثر من 5 دقائق) وتخضع لتخدير عميق ، يتم القتل الرحيم لهم عن طريق الحقن داخل القلب بمقدار 0.5 مل من محلول كلوريد البوتاسيوم المشبع.
- بعد الوفاة ، قم بإزالة الحلق والقصبة الهوائية والغدة الدرقية و PG.
- تحت غطاء الدخان ، ضع عينات الحلق والقصبة الهوائية والغدة الدرقية و PG التي تمت إزالتها في محلول بارافورمالدهيد بنسبة 4٪ لمدة 24 ساعة.
15. دراسات التشريح المرضي
- تجفيف الأنسجة وتضمينها في البارافين. شريحة إلى أقسام سميكة 5 ميكرومتر. تخبز المقاطع على حرارة 37 درجة مئوية في فرن طوال الليل وعلى حرارة 65 درجة مئوية لمدة 1 ساعة.
- قم بتلطيخ الأقسام بالهيماتوكسيلين واليوزين (H&E) بعد الغسيل لمدة 3 × 5 دقائق بنسبة 75٪ و 95٪ وكحول متدرج بنسبة 100٪ وغسل بالماء في درجة حرارة الغرفة.
- اطلب من أخصائيي علم الأمراض فحص الأقسام الملطخة ب H& E تحت المجهر الضوئي.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
في هذا النموذج الحيواني ، قمنا بشق عنق فأر SD جراحيا لكشف القصبة الهوائية والحنجرة والأنسجة المحيطة. ثم ، كانت الغدة الدرقية موجودة بصريا على جانبي القصبة الهوائية. إنه على شكل فراشة وحجمه حوالي 3 مم × 5 مم. عادة ما يوجد زوج من PG في الجزء العلوي من الغدة الدرقية ، ولونها مشابه جدا لفصوص الغدة الدرقية ، مما يجعل من الصعب للغاية تمييزها بالعين المجردة (الشكل 1).
بعد الحقن ، ينتشر عامل التباين (الشكل 1 والشكل 2) ، IONPs ، بسهولة داخل الغدة الدرقية ويلطخها باللون الأسود ، لكن لا يمكنه التسلل إلى PG بسبب كثافة الأنسجة العالية. ينتج عن التوزيع غير المتوازن للأيونات بين PG والغدة الدرقية تباين مذهل ، يمكن تصوره بسهولة بالعين المجردة دون الحاجة إلى أدوات خارجية. يوضح الشكل 2 صورا تمثيلية ل PG ملطخة سلبا بواسطة IONPs في الغدة الدرقية اليسرى للفأر ، حيث كان التباين بين PG والغدة الدرقية ملحوظا ، وتم تحديد حجم الجرذ PG ليكون حوالي 2 مم × 1 مم.
بعد الوفاة ، تم استئصال حنجرة الفئران والقصبة الهوائية المجاورة والمريء والغدة الدرقية و PG لتلطيخ الأنسجة المرضية. تم الحصول على المقاطع التسلسلية من الأنسجة التي تحتوي على PG لأداء تلطيخ H&E. كشفت هذه الصور الملطخة ب H& E (الشكل 3) أن PG غني بخلايا رئيسية محاذاة بشكل وثيق ، في حين أن الغدة الدرقية تتميز بالعديد من اللومن السائب مما يشير إلى كثافة أنسجة أقل بكثير.
الشكل 1: التركيب الفسيولوجي ل PG وبيئتها المكروية. رسم تخطيطي ل PG البشري والغدة الدرقية في ما قبل (A) وبعد حقن IONPs (B). صور خزعة تمثيلية لأنسجة عنق الرحم الأمامية للفئران ، بما في ذلك PG والغدة الدرقية والقصبة الهوائية والحنجرة في ما قبل (C) وبعد حقن IONPs (D). تم نشر صور إضافية في دراستنا السابقة15. الاختصارات: PG = الغدد الجار درقية. IONPs = جسيمات أكسيد الحديد النانوية ؛ IONP10 = IONPs بقطر 10 نانومتر ؛ المقياس بالسنتيمتر (سم). الرجاء الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.
الشكل 2: تحديد PG المعزز ب IONPs أثناء العملية. صور تمثيلية لفصوص الغدة الدرقية للفئران غير المعالجة (A) والمحقونة ب IONPs (B) في قبل وبعد حقن IONPs. فعالية تحديد PG المعزز ب IONPs متسقة في التكرار عند حقن ما قبل (C) وبعد IONPs (D). الاختصارات: PG = الغدة الجار درقية. IONPs = جسيمات أكسيد الحديد النانوية ؛ IONP10 = IONPs بقطر 10 نانومتر. الرجاء الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.
الشكل 3: التحليل النسيجي للغدة الدرقية المحقونة ب IONPs وبيئتها المكروية . (أ) صور تمثيلية خارج الجسم الحي لأنسجة عنق الرحم الأمامية للفئران في حقن ما بعد حقن IONPs. (ب) صور تمثيلية ملطخة ب H& E للفأر PG. شريط المقياس = 50 ميكرومتر. (ج) صورة مكبرة للمربع الأحمر المتقطع في اللوحة B. شريط المقياس = 20 ميكرومتر. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
نظهر تقنية التصوير السلبي الموجهة ب IONPs للفئران PG باستخدام IONPs السوداء ، والتي تم حقنها محليا في وسط الغدة الدرقية وانتشرت داخل الغدة الدرقية ولكن ليس PG. إنه يتيح التعرف الواضح على PG بالعين المجردة دون مساعدة من أي مجهر. على الرغم من أن الفئران المعدلة وراثيا مع بروتين الفلورسنت الأخضر المعبر عنه بشكل انتقائي في PG قد تم الإبلاغ عنها13 ، فإن النموذج الموصوف في هذه الورقة أكثر وضوحا في الأداء. يستغرق الأمر ~ 1 دقيقة فقط لكل فأر بعد الحقن ، ويمكن ملاحظة فرق واضح بين الغدة الدرقية و PG بالعين المجردة.
بالإضافة إلى ذلك ، هناك ميزة أخرى لهذا النموذج وهي أن التكلفة والصعوبة التشغيلية أقل بكثير بالنسبة لنموذج الفئران هذا مقارنة بالنماذج الحيوانية الكبيرة (على سبيل المثال ، الكلاب12) المستخدمة حاليا في الدراسات قبل السريرية لتقييم طرق تحديد PG الجديدة. متوسط تكلفة فأر SD قريب من تكلفة فأر BALB / C ، وهو أرخص بأكثر من 30 مرة من الكلب. تسمح هذه الميزة منخفضة التكلفة لنموذج الفئران بتوسيع أعداد الموضوعات وتكرار الاختبارات في الأبحاث قبل السريرية ، وهو أمر صعب مع النماذج الحيوانية الكبيرة. وفي الوقت نفسه ، فإن وزن الجسم النموذجي لفأر SD هو 300-350 جم ، وهو أيضا أخف بأكثر من 66 ضعفا من وزن الكلب (22-23 كجم)14.
مثل هذا الاختلاف الكبير في وزن الجسم يقلل بشكل كبير من صعوبة العملية في نموذج الفئران على نماذج الحيوانات الكبيرة ، لأن إجراء استئصال الغدة الدرقية على الحيوانات الكبيرة مثل الكلاب يتطلب إجراءات تخدير وجراحة أكثر تعقيدا ، مما يجعلها أكثر صعوبة وتحديا تقنيا. تشكل متطلبات الجراحة (المهارات الجراحية الأساسية مطلوبة) قيدا على هذا النموذج. أظهرت IONPs المستخدمة في هذه الدراسة سلامة بيولوجية ممتازة وقابلية للتحلل البيولوجي كما تم الإبلاغ عنه سابقا15. في النهاية ، نأمل أن توفر هذه الطريقة للتصوير السلبي ل PG للفئران باستخدام IONPs نموذجا حيوانيا بسيطا وفعالا للدراسات قبل السريرية التي تتضمن تحديد PG ، وبالتالي تسهيل تطوير تقنيات جديدة لتحديد PG.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
P.G. و W.Z. هما مخترعان مشاركان لطلب براءة اختراع مقدم من مستشفى السرطان التابع لجامعة الأكاديمية الصينية للعلوم (مستشفى تشجيانغ للسرطان) بناء على المشروع. يعلن المؤلفون الآخرون عدم وجود تضارب في المصالح.
Acknowledgments
تم دعم هذه الدراسة من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (NSFC) (82172598) ، ومؤسسة العلوم الطبيعية بمقاطعة تشجيانغ ، الصين (LZ22H310001) ، ومشروع تدريب المواهب الصحية 551 التابع للجنة الصحة بمقاطعة تشجيانغ ، الصين ، ومشروع العلوم والتكنولوجيا الطبية والصحية لمقاطعة تشجيانغ ، الصين (2021KY110).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| alcohol | Li feng | 9400820067 | |
| anesthesia machine | RWD Company | R520IE | Machine number |
| blade | Daopian | TB-JZ-10# | |
| cylindrical pillow | made by ourselves | ||
| depilatory cream | Nair | TMG-001 | |
| electronic scale | Hong xingda | CN-HXD2 | |
| eosin | Thermo Fisher (Waltham, USA). | C0105S-2 | |
| erythromycin | Shuang ji (Beijing, China) | 200409 | |
| gauze | Fulanns | YY0331-2006 | |
| heating pad | Johon (ShenZhen,China) | JH-36-2006 | |
| hematoxylin | Thermo Fisher (Waltham, USA). | C0105S-1 | |
| insulin injection needle | Jiangyin NanquanMacromolecule | 20170702 | |
| iodophor cotton ball | HOYON | 19-6007 | |
| iron oxide nanoparticle solution | Zhongke Leiming Technology (Beijing, China) | Mag9110-05 | |
| isoflurane | Sigma Aldrich (St Louis USA). | 21112801 | |
| needle holder | Meijun | MH0587 | |
| operation table | BioJane | BJ-P-M | |
| paraformaldehyde solution | Biosharp | 21269333 | |
| rubber | G-CLONE | XT41050 |
|
| scanning machine | Olympus | Slideview VS200 | |
| surgical forceps | Suping | SPHC-0676 | |
| surgical knife handle | Aladdin | S3052-06-1EA | |
| surgical retractor | TOCYTO | 18-4010 | |
| surgical scissors | Suping | SPHC-0795 | |
| surgical towel | Along technology | YCKJ-RJ-036205 | |
| suture | Ethicon | SA84G | |
| suture with needle | Jinhuan (Shanghai,China) | F301 | |
| vascular forceps | Along technology | YCKJ-RJ-016218 | |
| Water Bath-Slide Drier | Hua su (Jinhua, China) | HS-1145 |
References
- Cope, O., Donaldson, G. A. Relation of thyroid and parathyroid glands to calcium and phosphorus metabolism. Study of a case with coexistent hypoparathyroidism and hyperthyroidism. The Journal of Clinical Investigation. 16 (3), 329-341 (1937).
- Mansberger, A. R., Wei, J. P. Surgical embryology and anatomy of the thyroid and parathyroid glands. Surgical Clinics of North America. 73 (4), 727-746 (1993).
- Koch, A., Hofbeck, M., Dorr, H. G., Singer, H. Hypocalcemia-induced heart failure as the initial symptom of hypoparathyroidism. Zeitschrift für Kardiologie. 88 (1), 10-13 (1999).
- Shoback, D. M., et al. Presentation of hypoparathyroidism: etiologies and clinical features. The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism. 101 (6), 2300-2312 (2016).
- Arneiro, A. J., et al. Self-report of psychological symptoms in hypoparathyroidism patients on conventional therapy. Archives of Endocrinology Metabolism. 62 (3), 319-324 (2018).
- Olson, E., Wintheiser, G., Wolfe, K. M., Droessler, J., Silberstein, P. T. Epidemiology of thyroid cancer: a review of the national cancer database, 2000-2013. Cureus. 11 (2), 4127 (2019).
- Du, L., et al. Epidemiology of thyroid cancer: incidence and mortality in China, 2015. Frontiers in Oncology. 10, 1702 (2020).
- Barrios, L., et al. Incidental parathyroidectomy in thyroidectomy and central neck dissection. Surgery. 169 (5), 1145-1151 (2021).
- Sitges-Serra, A., et al. Inadvertent parathyroidectomy during total thyroidectomy and central neck dissection for papillary thyroid carcinoma. Surgery. 161 (3), 712-719 (2017).
- Sakorafas, G. H., et al. Incidental parathyroidectomy during thyroid surgery: an underappreciated complication of thyroidectomy. World Journal of Surgery. 29 (12), 1539-1543 (2005).
- Sahyouni, G., et al. Rate of incidental parathyroidectomy in a pediatric population. OTO Open. 5 (4), (2021).
- Erickson, A. K., et al. Incidence, survival time, and surgical treatment of parathyroid carcinomas in dogs: 100 cases (2010-2019). Journal of the American Veterinary Medical Association. 259 (11), 1309-1317 (2021).
- Bi, R., Fan, Y., Luo, E., Yuan, Q., Mannstadt, M. Two techniques to create hypoparathyroid mice: parathyroidectomy using GFP glands and diphtheria-toxin-mediated parathyroid ablation. Journal of Visualized Experiments. (121), e55010 (2017).
- Soulsby, S. N., Holland, M., Hudson, J. A., Behrend, E. N. Ultrasonographic evaluation of adrenal gland size compared to body weight in normal dogs. Veterinary Radiology & Ultrasound. 56 (3), 317-326 (2015).
- Zheng, W. H., et al. Biodegradable iron oxide nanoparticles for intraoperative parathyroid gland imaging in thyroidectomy. PNAS Nexus. 1 (3), 087 (2022).
