The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.
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Chiu, K., Lau, W. M., Lau, H. T., So, K., Chang, R. C. Micro-dissection of Rat Brain for RNA or Protein Extraction from Specific Brain Region. J. Vis. Exp. (7), e269, doi:10.3791/269 (2007).
Passo 1
Sacrificar o rato de acordo com protocolos estabelecidos. Remover o cérebro do crânio e lave-o em gelo frio DEPC tratados água Milli Q para remover qualquer vestígio de sangue de superfície.
Passo 2
Coloque no prato de metal frio. Cortar o cérebro bi meio em hemisfério direito e esquerdo. 
Figura 1. As posições de corte do ponto de vista medial do hemisfério rato
Passo 3
Recolher o bulbo olfatório logo após o primeiro corte. Flash congelar as amostras em nitrogênio líquido e armazenar a -80 ° C. 
Figura 2. Dissecção bulbo olfatório
Passo 4
Recolher o córtex frontal direito, após o segundo corte, usando uma lâmina e um Dumont No. 5 fórceps. Flash congelar as amostras em nitrogênio líquido e armazenar a -80 ° C. 
Figura 3. Dissecção córtex frontal
Passo 5
Recolher o striatum (núcleo caudado) logo após o terceiro corte com a ajuda de duas pinças de Dumont No.5. Flash congelar as amostras em nitrogênio líquido e armazenar a -80 ° C. 
Figura 4. Estriado dissecção (núcleo caudado)
Passo 6
Para coletar o hipocampo, coloque o lado ventral do cérebro para cima e depois remover mesencéfalo para expor o hipocampo. Dissecar o hipocampo do córtex utilizando duas pinças Dumont No.5. Flash congelar as amostras em nitrogênio líquido e armazenar a -80 ° C. 
Figura 5. Dissecção hipocampo
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Diferentes regiões do cérebro associada com diferentes doenças neurodegenerativas. Por exemplo, córtex frontal e striatum se relacionam com a doença de Parkinson, enquanto o hipocampo se relaciona com a doença de Alzheimer. Micro-dissecção precisa do cérebro que nos permite detectar as alterações mRNA e proteína na região de doentes com mais precisão.
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Os animais foram tratados de acordo com o protocolo para o uso de animais em pesquisa aprovada pelo Comitê sobre o Uso de Animais Vivos em Ensino e Pesquisa (CULATR) na Universidade de Hong Kong e de acordo com os Institutos Nacionais de Saúde diretrizes para uso animal.
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Microscope | Olympus Corporation | ||
| Dissection tools | Metal plate, forceps, blade, etc. Individually wrapped with aluminum foil and heated at 180oC for eight hours to eliminate RNase. Made ice cold before use. |
1. Palkovits, M., 1998. Maps and guide to micro-dissection of the rat brain. New York: Elsevier, c.1988.
2. Swanson, L.W., 2004. Brain maps: structure of the rat brain. 3rd revised edition. Elsevier Academic Press.
thank u very much. good protocol
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ReplyPosted by: AnonymousJanuary 8, 2009, 4:37 AM