موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 3:59 دقيقة • April 30th, 2023
- MicroRNAs ، أو miRNAs ، هي RNAs صغيرة غير مشفرة تشارك في تنظيم الجينات. يتم تغيير تعبيراتهم أثناء السرطان ، وبالتالي فهي مؤشرات حيوية محتملة للسرطان. لبدء عزل miRNA ، خذ عينة دم كاملة تم جمعها حديثا وجهاز طرد مركزي عند 4 درجات مئوية لفصل البلازما عن خلايا الدم. انقل المادة الطافية إلى أنبوب جديد وجهاز طرد مركزي مرة أخرى للحصول على مادة طافية أكثر وضوحا في البلازما. استخرج المادة الطافية ، وعالجها بمحلول التجانس المبرد ، متبوعا بمحلول التحلل لتجانس العينة. أضف محلول إنزيم البروتيناز K لتحلل البروتينات ، وخاصة النوكليازات التي من شأنها أن تهضم الحمض النووي الريبي أثناء خطوات المصب.
- بعد ذلك ، قم بتحميل المحللة في البئر المخصص لخرطوشة مستخرج الحمض النووي الخاصة بأداة مجمعة مسبقا. أضف محلول DNase 1 إلى البئر المناسب لإزالة الحمض النووي الجيني من العينة. أضف الماء الخالي من النوكلياز إلى أنبوب الشطف المجمع على الخرطوشة للتكييف قبل عزل miRNA. قم بتحميل مجموعة الخرطوشة في مستخرج الحمض النووي. حدد برنامج تنقية miRNA المناسب وقم بتشغيله. عند الانتهاء ، قم بإزالة أنبوب الشطف الذي يحتوي على miRNA وتخزينه عند 80 درجة مئوية تحت الصفر.
- في البروتوكول التالي ، نعرض استخراج miRNA من عينات دم المريض لفحص سرطان الرئة.
- لبدء هذا البروتوكول ، استخدم أنابيب الفراغ لجمع 10 ملليلتر من عينة الدم الكا
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية