Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Biology

İzole, Havalandırmalı ve Enstrumanlı Fare Akciğer Karakterizasyonu Pulsatif Akış ile perfüze

Published: April 29, 2011 doi: 10.3791/2690

Summary

Aşağıdaki protokol tecrit, havalandırma ve sağ ventrikül afterload kan akımı, hava akımı, hava yolu değişiklikleri ve vasküler değişiklikler etkilerini ölçmek için sabit veya pulsatil pulmoner vasküler basınç-akım ilişkileri ölçmek için fare akciğerler instrumenting sürecini özetliyor.

Abstract

Izole, havalandırmalı ve enstrümante fare akciğer hazırlık, kararlı ve pulsatil pulmoner vasküler basınç-akım ilişkileri, pulmoner arter debisi, akış hızı dalga formu, hava yolu basıncı ve sol atriyal basınç üzerinde bağımsız denetim ölçülmesine imkan verir. Pulmoner vasküler direnç, çok noktalı, sabit bir basınç-akım eğrileri alınarak hesaplanan pulmoner vasküler empedansı frekans aralığında elde edilen pulsatil basınç-akım eğrileri hesaplanır. Önemsiz vasküler uyum etkileri, özellikle akciğer dolaşımı içerir çünkü artık klinik olarak tanınan, empedans, direnci daha sağ ventrikül afterload üstün bir ölçü. Empedans Üç önemli ölçümleri - sıfır hertz empedansı Z 0, karakteristik empedansı Z C ve dalga yansıma R B indeksi akışı için kullanılabilir distal arteryel kesit alanı, proksimal arteryel sertlik ve havza-yukarı havza empedans içgörü uyumsuzluğu, sırasıyla. Izole elde edilen tüm sonuçlar, havalandırılmış ve perfüze akciğerler, sempatik sinir sistemi ton, birim durumu ve anestezi etkileri bağımsız. Biz bu tekniği empedans direnç ve pulmoner emboli ve kronik hipoksi etkisi ölçmek için kullanılan ve vazoaktif ajanlar ve hastalık Z C basınç bağımlılık kullanarak eylem siteleri (örneğin, distal proksimal vs.) Arasında ayrım yapmak. Ayrıca, bu teknikler, genetiği değiştirilmiş farelerde suşlarının akciğerler ile kullanıldığında, pulmoner vasküler yapısı ve işlevi üzerindeki etkilerinin moleküler düzeyde kusurları tespit edilebilir.

Protocol

Tuchscherer ark bu protokol, daha önce pulsatil pulmoner vasküler basınç-akım ilişkileri, pulmoner emboli ve kronik hipoksi etkisi (Tuchscherer, Webster ve Chesler, 2006 ölçmek için kullanılır olmuştur izole bir, havalandırılmış perfüze fare akciğer hazırlık göstermektedir , 2007). Kısacası, fare akciğerler ameliyatla ısıtılan bir odasında yer, çevre dokulara izole (IL-1, Harvard Apparatus, Holliston, MA) ve havalandırmalı (Ventilasyon Kontrol Modülü (VCM)-R zamanlayıcı sayıcı modülü (TCM); Harvard Aparat). Akciğer vasküler kararlı akım dalga biçimleri ya da yüksek frekanslı salınım pompası (Bose-Elektro Kuvvetleri, Eden oluşturmak için bir şırınga pompası (Cole-Parmer, Vernon Hills, IL) ile% 3,5 Ficoll ısıtmalı RPMI 1640 hücre kültür ortamı ile perfüze Prairie, MN) pulsatil pulmoner vasküler akışı dalga şekilleri yaratmak için şırınga pompası ile paralel. Basınç dönüştürücüleri (P75, Harvard Apparatus) anlık pulmoner arter basıncı (PAP) ve sol atrial basınç (LAP) ölçer. Ani debisi (Q), bir in-line debimetre (Transonik Systems, Inc, Ithaca, NY) ile ölçülür. Pulsatil basınç-akım ilişkileri, bu ölçümleri, pulmoner vasküler fizyoloji ve patoloji ve sağ ventrikül afterload içgörü sağlamalıdır türetilmiştir.

1. Ekipman:

  1. İzole akciğer fare vantilatör set-up dahil olmak üzere
  2. Veri toplama sistemi ve LabView programı ile bilgisayar
  3. Perfüzat akışı için iki basınç dönüştürücüleri ve debimetre
  4. Basınç detektörler ve hava yolu akışı için debimetre (pnemotachometer)
  5. Win Test programı ile Yüksek frekanslı salınım pompa ve bilgisayar
  6. Boom / Zoom Mikroskop, lamba
  7. IL-1 sistemi için yüksek çıkış pompası ısıtma banyosu

2. IL-1 sistem hazırlanması

  1. Damıtılmış su - 37 ° C IL-1 sisteminin içine dolaşan ısıtma banyosunda ısıtılır.
  2. Bütün pompalar, dönüştürücüler ve IL-1 kanül temiz tüp ile bağlıdır ve tüm boru, 37 kadar ısıtılır distile su ° C ile temizlendi Hava kabarcıkları akciğer ve neden ödem seyahat, kaldırılması gerekir. Salınımlı akış pompası akış sensörü ve akış sensörü pulmoner arter kanülü Boru% 1 PBS ile temizlendi.
  3. P75 basınç dönüştürücüler, kanül vana kapatma, atmosfere vanaların açılması ve ardından PLUGSYS amplifikatör otomatik sıfır düğmeye basılarak zeroed. Daha sonra, atmosfere vana kapalı ve kanül vana açıldı.
  4. IL-1 sistemi havalandırma yolu gözenekli seramik parçası, nem sağlamak için ıslatılmış.

3. Çözümler

  1. % 3,5 hacim Ficoll-RPMI çözüm ve steril filtre ortamı hazırlayın. Medya Filtreleme istemeden akciğer embolize büyük parçacıklar vardır sağlar. Steril ortamların kullanılması da akciğer gelişen ani ödem olasılığını azaltır. Biri 10 ml şırınga RPMI her deneysel deneme için RPMI cerrahi ve bir 60 ml şırınga ile doldurun. Perfüzat 37 ° C su banyosunda ısıtın.
  2. 1 ml (yaklaşık) fare heparin 500IU/100g vücut ağırlığı hazırlayın. Heparin tuz 158IU/mg. ~ 25 g fare için, küçük bir mikrosantrifüj tüp içinde 1 ml PBS solüsyonu ile 1.25 mg heparin tuzu karıştırın.

4. Havalandırma Fare

  1. Fare içine kilogram başına çözüm pentobarbital 150 mg, bir pençe sert bir tutam yaparak derin anestezi sağlamak intraperitoneal sonra. Herhangi bir reaksiyon yoksa, istikrar için corkboard ön patilerini bağlantılarını ameliyatı için fare hazırlamak. Not: deney anestezi derinliği boyunca hayvan dikkatlice gözlemleyerek tarafından izlenir. Pençeleri ve sık kesiler pimleri Ağrılı uyaranlara yanıt hayvan anestezi cerrahi bir düzlemde kaldığını teyit hangi eksikliği olarak hareket ederler.
  2. Kürk aşağı ıslak ve boynu cildi kapmak için düz forseps kullanımı% 95 alkol ile göğüs püskürtün. Düz makas kullanarak deride açılan bir 1 cm kesin.
  3. Boyun içinde ortaya çıktığında, özefagus ve trakea arıyorsanız, tüm beyaz glandüler doku ve yüzeysel kas çıkarın. Her iki tarafında ve posteriora doku özefagus ve trakea ayırın.
  4. Takın ve trakea altındaki küçük bükük forseps, diğer tarafında dikiş bir parça kapmak. Trakea altında dikiş çekin ve gevşek bir cerrahlar düğüm. Sütür sıkın ya da düğüm etmeyin.
  5. Trakea küçük bir makas ile küçük açılı bir "v" Kes, trakea yoluyla tüm yol kesmeyin. Isıtmalı IL-1 sistemi mantar pano ve fare hareket ettirin. Iki künt forseps kullanarak, trakeal kanül ve "v" altında trakea yakala. Sonra, trach trakeal kanül slayt"v" açıklıktan adet. Trakea etrafında dikiş ve trakea içinde kanül güvenli trakeal kanül sıkın. Düğüm.
  6. Oda havası ile ventilasyon (% 50 ilham, derin ilham ile 90 solunum / dk,) başlayın.

5. Havalandırmalı Fare perfüze

5.1. Heparin enjekte etmek için sağ ventrikül Erişim

  1. Sprey fare göğüs tekrar alkol ile kürk yeniden ıslak. Düz forseps ve düz makas kullanılarak kaburga üstünde göğüs tüm cilt çıkarın. Sternum boyunca yukarı kesin. Her iki tarafta cilt kaldırın ve daha sonra alt kaburga satırı aşağıdaki cilt kesmek.
  2. Cımbız ile sternum alt kısmında kılıç şeklinde sürecini kavramak ve düz makas kullanarak diyafram bir delik. Cımbız ile diyafram alın ve kaburga kesip.
  3. Kılıç şeklinde bir süreç cımbız ile tekrar tutun (sol) ve kesilmiş sternum ve kaburga üzerinden topu ucu açılı makas kullanmak, akciğerler kesmeme dikkatli olma, kalp ya da kan damarları (topu ucu kullanın makas) size rehberlik etmek. Kan var olacak ama sürece sternum karşı makasla kesme kenarı olarak, kalp ve akciğerler kesilmiş olmayacaktır.
  4. Sol tarafta kaburgalar tutun ve kalp açığa çıkarmak için gerekli olduğu kadar kaburga kesip. 0.1 ml heparin solüsyonu ile sağ ventrikül yavaş yavaş enjekte edin. Bu adım, endotelyal hücreler zarar ve perfüzyon bozacağına akciğerde kan pıhtılaşması, önlemek için önemlidir. Kalp hala atıyor iken heparin enjekte edilmelidir.

5.2. Ana pulmoner arter Cannulate

  1. Kaburgalar hafifçe göğüs duvarından akciğerlere itmek için arka (yuvarlak) forseps sonu kullanarak (sağ ve sol tarafı) geri kalanı kesip. Akciğerler kapma kendilerini hassas doku zarar verecektir. Makas ipuçları ve akciğer dokusu arasındaki kazara temas da zarar verir.
  2. Akciğer üzerine yerleştirin mikroskop taşıyın. Kalbin üstüne glandüler ve yağ dokusu kesilip. Arterler ve damarlar uzağa çekin ve sonra doku gerginlik devam ederken bahar makasla kesmek için cımbız kullanın.
  3. Cımbız künt bir başka set, sol atrium / aort ve pulmoner arter (PA) altında cımbız ucu almak için ventrikül altında kalp üstten, sağdan sola kepçe kullanma. Bunu yapmak dikkatle cımbız direnç olmamalıdır. Künt cımbız kullanarak yanlışlıkla pulmoner arter veya aort delinmesiyle olasılığını azaltır.
  4. Cımbız ucu aorta ve PA altına alındıktan sonra, bir parça dikiş kapmak ve çekin. Cerrahlar gevşek bir düğüm. Sütür sıkın ya da düğüm etmeyin.
  5. İsteğe bağlı: vücudun alt yarısında kaldırmak için açılı makas kullanın. Kaburga ve omurga üzerinden azaltın; kesme aorta ve vena kava önemli bir miktarda kan akışına neden olacak akış sadık bir Q-tip kullanabilirsiniz. Bertarafı için bir torbaya yerleştirin.
  6. 4 ml 10 ml şırınga RPMI ile Başbakan PA kanül. Çift tüm boru hava kabarcıkları olup olmadığını kontrol edin. Distile su veya kabarcıkları ile akciğer perfüzyon ödem neden olur.
  7. PA eklemek kanül sağ ventrikül serbest duvarında küçük bir çentik kesin ve aşağı amaçlayan ve sağa. PA şeffaf duvarın üzerinden kanül ucu görünür olmalıdır. RPMI konumu onaylamak için küçük bir miktar demlenmeye. Kanül, aort ve PA çevresinde dikiş sıkın ve düğüm. Bu noktada sol atrium kanüle kadar gerçek perfüzyon başlamak gerektiğini, aort da bağlı olduğunu unutmayın.

5.3. Sol atrium Cannulate

  1. Sol ventrikül alt kısmında bir çentik kesin ve atıl sol atriyum (LA) kanül, yukarı hedefliyor. Hafif bir basınç bu yönde mitral kapak açmak için gerekli olabilir. Doğru yerde, kanül ucu üzerine kayma ve dikiş olmadan güvenli olacaktır.

5.4. Perfüzyon başlayın

  1. RMPI çıkış boru (açık PBS aksine pembe-ish renk) açıktır kadar El dakikada 0,3 ml, 10 ml şırınga RPMI demlenmeye. Çıkış boru, yeniden-pozisyon LA kanül akış varsa. Eğer yeniden konumlandırma çıkışı ile elde edilebilir, pulmoner arter bir sızıntı olup olmadığını kontrol edin. Pulmoner arter bir sızıntı ya da gözyaşı tamir edilemez, bu deney iptal nedenidir.
  2. IL-1 sistemi aracılığıyla PA kanül için 60 ml şırınga takın ve sızıntı kontrolü ve akciğerlere RPMI akciğerlere kan değiştirilmesi olduğunu gösteren, beyaza emin olun, perfüzat 1ml/min infüzyon başlatmak. Iki dakika yavaş akışı ile serpmek.

6. Ölçüm Pulsatif ve Sabit Pulmoner Basınç-Akış İlişkileri

  1. Pulsatil akım çalışmaları için ilk salınım pompa piston değiştirmeler ayarlamakönceki deneylerine göre WinTest programında her frekans için istenen düzeyde. Akciğer yapısı ve mekaniği nedeniyle değişkenliği, deplasmanları her fare için ayarlanması gerekir. Sürekli akış istenilen seviyeye ayarlayın. Salınım pompa, vana açın ve sağ salınımlı akış profili (Wintest programı) çalıştırmadan önce kayıt, veri aktarımını başlatmak. Veri dosyasını açın ve Excel deneysel debi (Q) arsa. Q max ve Q min istediğiniz gibi böylece her frekansta salınım pompası piston değiştirmeler ayarlayın (Wintest programı).
  2. Sürekli akış denemeleri için, salınım pompa vanasını kapatın. Bu valf açık bırakılırsa, salınım pompası başka bir akış hızı değişiklikleri nemlendirme, bir kondansatör gibi davranır. Her akış hızında veya PA basıncı kadar en az 10 saniye süreyle veri toplama% 5'ten fazla değişmez.
  3. Pulsatil veya sabit akış ölçümleri için, veri toplama önce sabit bir basınç eski havalandırma. Veri toplama hemen sonra havalandırma devam edin.
  4. Havayolu tüp RPMI ödem kanıt ve deneyi iptal nedenidir. Ayrıca, dönüştürücüler zarar verir, çünkü RPMI havayolu basıncı veya akış sensörleri ulaşmak izin vermeyin.

7. Temsilcisi Sonuçlar:

Temsilcisi Sabit Sonuçlar:

Izole akciğer set-up deneyci bağımsız olarak kontrol altında tutmak sadece pulmoner akım S yeteneği değil, aynı zamanda havayolu basıncı P hava ve sol atriyal basınç LAP vardır. Q, P hava ve LAP pulmoner damarlar ve pulmoner arter basıncı PAP etkisi nedeniyle avantajlıdır. Diğer bir avantajı, elde edilen sonuçlar, sempatik sinir sisteminin tonu 1, ses durumu, ve anestezi 2 bağımsız olmasıdır.

Sabit P hava Q merdiven adım değişiklikler tarafından uyarılan ve sabit veya LAP değişen PAP değişiklikler Şekil 1'de gösterilmiştir. LAP kanül izole akciğer hazırlanmasında, tipik bir atık kabı içine perfüzat yönlendirir boru bağlı olduğunu unutmayın. Bu tüp yerinde LAP Poiseuille akışı nedeniyle Q doğrusal bağlıdır. Ancak, çıkış ve atık kabını yüksekliği sabit bir, sıfır olmayan bir LAP sağlamak için elle ayarlanabilir veya tüp Q bağımsız sıfır LAP izin silinebilir

Temsilci Pulsatif Sonuçlar:

Keyfi pulsatil akışı dalga şekilleri bu sistem ile oluşturulabilir iken, biz genellikle formu akışını oluşturmak Q = 3 + 2 sin (2 f πt) f = 1, 2, 5, 10, 15 ve 20 Hz frekanslarda ml / dak pulmoner damar (Şekil 2: üst panelde) lineerleştirilmiş empedans değerlendirmek için. PAP, LAP ve Q ölçümleri sonucunda, pulmoner vasküler empedansı büyüklüğü (Z) ve faz (θ), ilk bir dizi dayatılan her sinüzoidal akım hızı frekans ΔP = PAP-LAP ve Q bir tam sinüzoidal döngüsü çürüyen tarafından hesaplanır. Fourier dönüşümü kullanarak sinüsoidal harmonikler. Basınç oranı dönüşümü verimi büyüklüğü Z ve faz θ pulmoner vascualar empedansı, PVZ = FFT (ΔP) / FFT (Q), akış dönüşümü. Giriş empedansı Z 0, karakteristik empedansı Z C, ve dalga yansıma R W indeksi, empedans büyüklüğü hesaplanır. Özellikle, Z 0 0. harmonik (f = 0 Hz frekansları üzerinden C, Z, Z ilk minimum (5 Hz) ve 20 Hz arasında ortalama olarak hesaplanan ortalama ve R W hesaplanır) Z hesaplanır . (Z 0-Z C) / (Z 0 + Z C) 3.

Şekil 1
Şekil 1. Sabit akışı dalga şekilleri (üst satır) ve baskıların sonucunda (ikinci satır: PAP, P hava, LAP), LAP ve P hava farklı kombinasyonları ile zamanın bir fonksiyonu olarak . Alt sıra (A) ve (B), Q LAP artar ve azalır çıkış boru sırada yer aldı çünkü S. vs PAP gösterir. Bu tüp o LAP sürekli ve S. bağımsız (C) (D) ve (E) LAP daha yüksek ama S. P hava bağımsız şekilde çıkış boru yüksekliği manuel olarak ayarlanabilir ya kaldırıldı inspiratuar sonu (A, C, D) veya ekspirasyon sonu (B, E) basıncı.

Şekil 2
Şekil 2 Pulsatil akış dalga şekli Q (üst panel) ve bunun sonucunda baskılara (alt panel: PAP, LAP ve P hava) zamanın bir fonksiyonu olarak. PVZ bu pulsatil pulmoner basınç-akım ilişkileri, toplam sağ ventrikül afterload yansıtan, hesaplanan olabilir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Ameliyat kritik adımlar

Göğüs kafesi, akciğerler uzak keserken dikkatli olduğu kritik öneme sahiptir. Akciğerleri tam maruz kalan ve sınır tanımayan çevre dokulara enflasyon sırasında ancak izolasyon işlemi sırasında hasar görmediğinden olmalıdır. Forseps arka uç gibi düz bir nesne kullanımı kesmek için makas için açık bir yol var, böylece göğüs duvarı akciğerlere uzak tutmak için kullanılabilir. Diğer önemli adım, pulmoner arter ve aort etrafındaki sütür yerleştirilmesi. Köreldiğini düz bir cımbız kullanarak, pulmoner arter delinmesiyle riskini azaltacaktır. Ameliyat sırasında son kritik adım kanüller yerleştirilmesi. Kanüller kalbin çıkmak gibi büyük damarların düzlemi üzerinde çok yüksek ise, kanüller, pulmoner arter veya pulmoner venlerin ya çekin. Sol atriyumda kanül çok düşükse, sol akciğer akışını engellemek. Bunun bir sonucu olarak, daha fazla akış PAP artırılması ve sağ akciğer ödemi gelişimi hızlandırıyor, sağ akciğere gider.

Veri toplama sırasında Kritik adımlar

Sabit akış veri toplama akciğer vasküler maruz kalma, yüksek sıvı kayma gerilmeleri minimize edilir, böylece, özellikle yüksek akış oranları için hızlı bir şekilde gerçekleştirilebilir olmalıdır. Bizim tecrübelerimize göre, yüksek kesme akciğer ödemine yol vurguluyor. Ayrıca, kayma gerilmesi hızlı artış, akciğer ödemine neden olabilir. Sürekli akış koşulları için 6 akışında bir artış ml / dak / dak ödemine neden değildir. 5 ml / dk üzerinden Sabit akım hızlarında belirli koşullar ödem olmadan elde edilebilir. Biz 10 ml / dak başarıyla gibi yüksek sabit akış oranları ile akciğer ve kronik hipoksik farelerin kontrol perfüze var.

Frekans sınırlamalar

Bir akış kullanın çünkü bizim tarafımızdan test edilen en yüksek frekansı genellikle 20 Hz dalga şekli Q = 3 + 2 sin (2 f πt) ml / dak. Biz burada açıklamak pompası, yüksek frekanslarda (en az 50 Hz) salınımlar üretebilir, ancak trade-off vuruş uzunluğu, yani akış salınım büyüklüğü artan frekans ile azalır S. daha fizyolojik akış dalga değişim azalmış. büyük olasılıkla bu sistem ile simüle edilebilir. Alternatif olarak, özel bir perfüzyon pompası aynı cerrahi izolasyon ve havalandırma prosedürleri burada açıklanan kullanılabilir. 0-100 Hz frekans aralığı (P75, Harvard Apparatus Holliston, MA) basınç dönüştürücüleri olarak bildirilir. Dönüştürücüler gerçek frekans cevabı PA ve LA kanüller dönüştürücüler bağlamak için kullanılan boru sertlik ve büyüklüğüne bağlıdır. Metal borular yerine polietilen boru kullanılması, sistemin yanıt artıracaktır. Ancak ameliyat sırasında kanül konumu ve yerleşim esnekliği ihtiyaç vardır çünkü tamamen rijit boru kullanmak mümkün değildir. Bununla birlikte, yüksek frekans tepkisi dönüştürücüler ve / veya daha rijit borular basıncı ölçümleri sinyal-gürültü artırmak ve PVZ yüksek frekanslarda elde edilecek.

Uygulamalar

Bu izole akciğer hazırlık pulsatil pulmoner basınç-akım ilişkileri yanı sıra, kronik hipoksi 5 olarak pulmoner emboli 4 etkisini araştırmak için kullanılmıştır . Ayrıca, pulmoner dolaşım 6 vazoaktif ajanların etkilerini araştırmak ve akut Rho kinaz inhibisyonu 7 proksimal ve distal pulmoner vasküler etkileri ölçmek için kullanılmıştır . Bu teknik, farelerin kendilenmiş veya outbred suşlar pulmoner vasküler fizyoloji ya da genetiği değiştirilmiş fareler 8 ölçmek için kullanılabilir . Bu izole akciğer hazırlanması ile elde edilen basınç-akım verilerin yorumlanması, kalp hızı ya da farelerin suşları arasında kardiyak output farklılıklar karmaşık değildir. Bu doğrudan normal bir kalp atışı yanıt olarak, in vivo hazırlanmasında elde edilen mukayese edilmemelidir, empedans izole bir spektrumları elde unutmayın önemli fizyolojik olmayan bir dalga yanıt perfüze akciğer havalandırmalı. Ayrıca, in vivo olarak, havalandırma negatif, pozitif değil, basınç ve kan viskozitesi yaklaşık 4 kat Ficoll ile RPMI viskozite.

Önem

Izole, havalandırmalı, perfüze fare akciğer hazırlık kullanarak, uyum önemli ölçüde etkisi RV afterload 7 büyük, kablo arterler üzerinde doğrudan etkisi vardır akut Rho-kinaz inhibisyonu ile düz kas hücre de-harekete geçirmek göstermek mümkün olmuştur. Proksimal arter uyum klinik önemi giderek 9-11 kabul edilmiştir. Ayrıca, azalmış ana pulmoner arter uyum pulmoner arteryel hipertansiyon 10,11 mortalite mükemmel bir belirleyicisi olduğu gösterilmiştir. DEAT ana nedenih pulmoner hipertansiyon, sağ ventrikül yetmezliği, ancak tek başına ortalama pulmoner arter basıncı artmış başarısızlık 12 neden yeterli değildir. Toplam sağ ventrikül ardyükünü daha etkili önlem, proksimal uyum ve distal direnci bağlıdır ve bu protokol ile fare akciğerlerde elde edilebilir olarak pulsatil pulmoner basınç-akım ilişkileri hesaplanır PVZ.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Çıkar çatışması ilan etti.

Acknowledgments

Bu araştırma, Ulusal Sağlık hibe R01HL086939 (KKK) Enstitüleri tarafından da desteklenmiştir.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
1 ml syringe Fisher Scientific 14-829-10F
10 ml syringe Fisher Scientific 14-823-2A
60 ml syringe Fisher Scientific 13-689-8
RPMI with GLN 6/PK Fisher Scientific MT10040CV
Bottle Top Filters Fisher Scientific 09-761-57
Ficoll PM 70 Sigma-Aldrich F2878-100g
Heparin Sigma-Aldrich
Y27632 Sigma-Aldrich Y0503
Angled Ball Iris scissors Fine Science Tools 14109-09
Vannas Spring Scissors - 4mm Blades Fine Science Tools 15018-10
Fine Iris Scissors - straight Fine Science Tools 14106-09
Dumont #5/45 Forceps Fine Science Tools 11251-35
Dumont Medical Biology Forceps Fine Science Tools 11254-20
Lauda E100 ECO-line 003 VWR international Comparable to Lauda-Brinkmann E-103, 62400-922
IL-1 Isolated perfused mouse lung system Harvard Apparatus 739904
Blood Pressure Transducer P75 for PLUGSYS Module Harvard Apparatus 730020
TS410 Flow Modules Transonic TS410
ME 4 PXN Precision PXN Inline Flowsensors Transonic ME 4 PXN
Cole-Parmer Multi-Syringe Pumps Cole-Parmer EW-74900-20
Nembutal 50MG/ML 20ML Vial Amatheon

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Pace, J. Sympathetic control of pulmonary vascular impedance in anesthetized dogs. Circ Res. 29, 555-568 (1971).
  2. Ewalenko, P., Stefanidis, C., Holoye, A., Brimioulle, S., Naeije, R. Pulmonary vascular impedance vs. resistance in hypoxic and hyperoxic dogs: effects of propofol and isoflurane. J Appl Physiol. 74, 2188-2193 (1993).
  3. Nichols, W. W., O'Rourke, M. F., Hartley, C., McDonald, D. A. McDonald's blood flow in arteries : theoretical, experimental, and clinical principles. , 5th edn, Arnold. (2005).
  4. Tuchscherer, H. A., Webster, E. B., Chesler, N. C. Pulmonary Vascular Resistance and Impedance in Isolated Mouse Lungs: Effects of Pulmonary Emboli. Annals of Biomedical Engineering. 34, 660-668 (2006).
  5. Tuchscherer, H. A., Vanderpool, R. R., Chesler, N. C. Pulmonary vascular remodeling in isolated mouse lungs: Effects on pulsatile pressure-flow relationships. Journal of Biomechanics. 40, 993-1001 (2007).
  6. Vanderpool, R., Naeije, R., Chesler, N. Impedance in Isolated Mouse Lungs for the Determination of Site of Action of Vasoactive Agents and Disease. Ann Biomed Eng. , (2010).
  7. Vanderpool, R., Kim, A., Molthen, R., Chesler, N. Effects of acute rho kinase inhibition on chronic hypoxia-induced changes in proximal and distal pulmonary arterial structure and function. Journal of Applied Physiology. , (2010).
  8. El-Bizri, N. Smooth muscle protein 22alpha-mediated patchy deletion of Bmpr1a impairs cardiac contractility but protects against pulmonary vascular remodeling. Circ Res. 102, 380-388 (2008).
  9. Champion, H., Michelakis, E., Hassoun, P. Comprehensive invasive and noninvasive approach to the right ventricle-pulmonary circulation unit: state of the art and clinical and research implications. Circulation. 120, 992-1007 (2009).
  10. Gan, C. Noninvasively assessed pulmonary artery stiffness predicts mortality in pulmonary arterial hypertension. Chest. 132, 1906-1912 (2007).
  11. Mahapatra, S., Nishimura, R., Sorajja, P., Cha, S., McGoon, M. Relationship of pulmonary arterial capacitance and mortality in idiopathic pulmonary arterial hypertension. J Am Coll Cardiol. 47, 799-803 (2006).
  12. Bogaard, H. Chronic pulmonary artery pressure elevation is insufficient to explain right heart failure. Circulation. 120, 1951-1960 (2009).

Tags

Tıp Sayı 50 ex-vivo fare akciğer pulmoner vasküler empedansı karakteristik empedansı
İzole, Havalandırmalı ve Enstrumanlı Fare Akciğer Karakterizasyonu Pulsatif Akış ile perfüze
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Vanderpool, R. R., Chesler, N. C.More

Vanderpool, R. R., Chesler, N. C. Characterization of the Isolated, Ventilated, and Instrumented Mouse Lung Perfused with Pulsatile Flow. J. Vis. Exp. (50), e2690, doi:10.3791/2690 (2011).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter