Abstract
विवो में जैव चिकित्सा अनुसंधान नैदानिक अग्रिम में इन विट्रो निष्कर्षों में अनुवाद करने के लिए निर्णायक है। सीमित संसाधनों के साथ लघु शैक्षिक संस्थाओं यह लगभग असंभव बनाने के लिए और अनुसंधान के लिए ठेठ कृंतक सुविधाओं को बनाए रखने के लिए लगता है। Zebrafish अनुसंधान औषध विज्ञान, शरीर विज्ञान, विकास और आनुवंशिक अध्ययन में vivo में अनुसंधान के लिए एक मूल्यवान विकल्प होने के लिए प्रदर्शन किया गया है। यह लेख एक कार्यात्मक zebrafish सुविधा के लिए एक आसान और किफायती ढंग से बनाया जा सकता है कि यह दर्शाता है। हम एक ऐसी सुविधा न्यूनतम उपकरण और विशेषज्ञता के साथ के बारे में एक दिन काम में बनाया जा सकता है कि प्रदर्शित करता है। इस अध्ययन में निर्माण 27 1.8 एल मछली टैंक zebrafish सुविधा की लागत लगभग $ 1500 था। हम तीन महीनों के लिए एक प्रारंभिक काम कर रहे 150 मछली कॉलोनी के रखरखाव 1,000 डॉलर है कि अनुमान है। अनुसंधान का प्रस्ताव के लिए शुरू किए गए थे, जो इस परियोजना शामिल छात्रों, zebrafish के aquaculturing करने के लिए।
Introduction
विवो में मॉडल वे सिस्टम और जीवधारी के स्तर पर अनुवाद करने के लिए इन विट्रो अनुसंधान के क्षेत्र में अनुमति देने के बाद से व्यापक जैव चिकित्सा अनुसंधान के संचालन में आवश्यक हैं। उदाहरण के लिए, छोटे स्तनपायी, अर्थात् कृन्तकों, साथ अनुसंधान दवाओं के विकास में और उपलब्ध दवाओं के सुधार में आवश्यक सिद्ध किया गया है। हालांकि, जटिलता (आर्थिक रूप से और logistically) यह लगभग असंभव निर्माण और प्रयोग छोटे अनुसंधान शैक्षिक संस्थानों में प्रस्ताव है के लिए कृंतक सुविधाओं को बनाए रखने के लिए कर सकता है। बहरहाल, इन विवो अनुसंधान कम विस्तृत रसद की आवश्यकता होती है कि अन्य जानवरों की प्रजातियों का उपयोग किया जा सकता है। जेबराफिश (देनियो rerio) सफलतापूर्वक आनुवंशिकी, विकास, pathophysiology, और औषध विज्ञान 1,2,10,11,12 अध्ययन करने के लिए एक Vivo में मॉडल के रूप में इस्तेमाल किया गया है। प्रयोग के लिए zebrafish के घर के लिए आवश्यक सुविधाओं आर जब की तुलना में अपेक्षाकृत सरल है और काफी कम महंगे हैंodent सुविधाएं। किम एट अल। 3 हाल ही में विस्तार से भागों और श्रम लागत दोनों शामिल है जो लगभग 1500 $, के लिए बनाया जा सकता है कि एक 80 टैंक zebrafish हाउसिंग प्रणाली का वर्णन किया है। यह वाणिज्यिक आपूर्तिकर्ताओं में से किसी भी नंबर से तैयार कर दिया है, 80 टैंक प्रणाली की खरीद करने के लिए आवश्यक होगा कि लगभग $ 8500 के विपरीत में खड़ा है। हालांकि, किम एट अल द्वारा दिए गए विवरण। मछली अनुसंधान के novices के लिए पालन करने के लिए जटिल और मुश्किल हो सकता है। हम एक zebrafish सुविधा 1,500 डॉलर की एक निवेश के लिए सरल तरीके से निर्माण किया जा सकता है कि विश्वास करते हैं।
छोटे शैक्षिक संस्थानों में एक Vivo में सुविधा की स्थापना के उनके संकायों और अधिक शक्तिशाली और पूरी तरह से अनुसंधान करने के लिए उत्पादन के साथ जो एक अतिरिक्त उपकरण प्रदान करता है। इन विवो परिणामों के द्वारा समर्थित इन विट्रो डेटा आम तौर पर इन विट्रो दृष्टिकोण में ही उपयोग कर प्राप्त डेटा की तुलना में अधिक व्यापक जैव चिकित्सा अनुसंधान का उत्पादन। इसलिए,एक vivo में अनुसंधान सुविधा के कार्यान्वयन काफी अपने समग्र अनुसंधान प्रयासों में संस्था की सफलता में वृद्धि होगी (बाह्य वित्त पोषण, आदि के अनुसंधान, प्रकाशन, संचार, पीछा करने के लिए छात्र के संपर्क में।)।
इस अध्ययन में वर्णित एक तरह एक zebrafish सुविधा के निर्माण के फाइनेंशियल टाइम्स में बाधा के दौरान (vivo में अनुसंधान सुविधाओं के बिना या संस्थाओं) सीमित सुविधाओं के साथ अनुसंधान शैक्षिक संस्थानों के लिए आदर्श है।
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Protocol
नोट: इन प्रोटोकॉल प्रेस्बिटेरियन कॉलेज IACUC के दिशा निर्देशों का पालन करें।
तालिका 1 में सूचीबद्ध 1. मोल सामग्री।
2. निर्माता के निर्देशों के अनुसार 5 शेल्फ क्रोम इकट्ठे। यह सुविधा घर के लिए इस्तेमाल किया जाएगा।
3. पानी जलाशय और छानने का काम प्रणाली (आंकड़े 1 ए और 2) का निर्माण।
- एक गाइड के रूप में चित्रा 1 ए का प्रयोग, अंतिम स्थापना स्थान और आकार निर्धारित करने के लिए 18 गैलन बाल्टी, पंप, फिल्टर और यूवी दीपक लेआउट।
- भागों बाहर रखी हैं एक बार, उपाय और विधानसभा के लिए आवश्यक लंबाई के लिए ¾ "पीवीसी पाइप काट दिया। विशिष्ट अंतरिक्ष की जरूरत है और सीमाओं के अनुसार सभी पाइप की लंबाई बदलती हैं।
- पीवीसी प्राइमर और सीमेंट का प्रयोग पहले से बाहर रखी रूप में पाइप और फिटिंग इकट्ठे, नीचे (3.3.2 और 3.3.3) देखें।
- रेत sandpaper के साथ पाइप की कटौती किनारों वे स्पर्श एक करने के लिए चिकनी कर रहे हैं जब तकD नहीं मलबा नहीं है।
- प्रधानमंत्री पाइप के बाहर और पीवीसी प्राइमर से शामिल झाड़ू के साथ खरीदा पीवीसी प्राइमर के साथ फिटिंग के अंदर।
- शामिल झाड़ू का उपयोग कर पाइप के बाहर करने के लिए परमवीर चक्र सीमेंट लगाने से एक साथ पाइप और फिटिंग सीमेंट। पीवीसी जोड़नेवाला की जरूरत है कि सभी चरणों के लिए दोहराएँ।
- शेल्फ निर्माण के एक तरफ करने के लिए 18 गैलन बाल्टी रखें।
- जलाशय टैंक के पक्ष में एक दिवार कनेक्टर को स्थापित करें।
- दिवार को एक ¾ "पीवीसी पाइप संलग्न।
- ¾ "एक ¾ का उपयोग कर पंप प्रवेश करने के लिए पाइप" के दूसरे छोर संलग्न फिटिंग बनाने पिरोया।
- दो 90 डिग्री कोहनी और ¾ "पीवीसी पाइप का उपयोग पंप करने के लिए फिल्टर कनेक्ट करें।
- पानी में क्लोरीन और रासायनिक स्तर को मलबे से बाहर फिल्टर और कम करने के क्रम में एक सक्रिय कार्बन फिल्टर द्वारा पीछा एक कागज फिल्टर का प्रयोग करें।
- फिल्टर accordi यूवी दीपक कनेक्टनिर्माता के निर्देशों के एनजी।
- तार संबंधों का उपयोग कर रैक के पहले शेल्फ के ऊपर की ओर करने के लिए पंप और फिल्टर प्रणाली संलग्न। चुना शेल्फ / रैक के आकार और लेआउट के अनुसार विधानसभा और लगाव के क्रम में भिन्नता है।
- पंप और फिल्टर प्रणाली को इकट्ठा किया और शेल्फ से जुड़े होते हैं एक बार पानी जलाशय में पानी के गैलन प्रति एक bioball जोड़ें।
4. मुख्य आपूर्ति लाइन (आंकड़े 1 बी और 2) का निर्माण।
- उपाय और मुख्य आपूर्ति करने के लिए यूवी लैंप कनेक्ट करने के लिए पीवीसी पाइप "¾ का एक टुकड़ा काट
- यूवी फिल्टर से आने वाले पीवीसी निकास "¾ करने के लिए टी जोड़ने के द्वारा मुख्य आपूर्ति लाइन शुरू करने के लिए पीवीसी टी" एक ¾ का प्रयोग करें। .
- प्रणाली के रखरखाव निस्तब्धता के लिए एक नाली के रूप में सेवा करने के लिए पीवीसी टी के नीचे करने के लिए एक पर बंद वाल्व जोड़ें।
- परमवीर चक्र "¾ मापने और कटौती से पीवीसी टी" ¾ के ऊपर से मुख्य आपूर्ति लाइन शुरूवांछित लंबाई में पाइप रैक पर अलमारियों में से प्रत्येक के लिए फ़ीड पाइप प्रदान करने के लिए।
- स्थापित करें ¾ "रैक में से प्रत्येक शेल्फ में प्रवेश करेंगे कि क्षैतिज लाइनों के लिए पीवीसी टीज़।
- वैकल्पिक रूप से (और सुझाव दिया), एक जोड़ ¾ "पर बंद वाल्व प्रत्येक शेल्फ की आपूर्ति लाइन के लिए प्रत्येक शेल्फ के अलगाव और प्रणाली के एक मॉड्यूलर डिजाइन के लिए अनुमति देने के लिए।
- शीर्ष शेल्फ पर लाइन को कम करने के लिए एक दबाव के रूप में एक ¾ "पीवीसी पाइप का प्रयोग करें। इस लाइन शेल्फ की पीठ पर चलता है, तो भंडारण के लिए इस शेल्फ का उपयोग करें। मुख्य निकास लाइन एक ¾ के साथ (चित्रा 1 बी) "पर बंद वाल्व में रेखा को कम करने का दबाव खत्म होता है।
- ऊपर के चरणों, प्रधानमंत्री पूरी की और जलाशय और छानने का काम प्रणाली के निर्माण जब पहले किया रूप में एक साथ पीवीसी पाइप सीमेंट किया गया है एक बार।
5. मुख्य निकास रेखा (आंकड़े 1C और 2) का निर्माण।
- रैक एफ के दूसरी तरफ मुख्य निकास लाइन के ऊर्ध्वाधर लंबाई चलानेमुख्य आपूर्ति लाइन रोम। प्रत्येक शेल्फ से मछली टैंक से ऊपर और नाली लाइनों में मुख्य आपूर्ति लाइन प्राप्त करने के लिए इस ऊर्ध्वाधर लाइन के लिए एक 2 "पीवीसी पाइप का प्रयोग करें।
- "ऊर्ध्वाधर मुख्य निकास लाइन के लिए पीवीसी पाइप और 2 का उपयोग करें" 2 के टुकड़े काटें प्रत्येक शेल्फ से मछली टैंक नाली लाइनों प्राप्त करने के लिए पीवीसी टीज़। एक स्पंज फिल्टर से अधिक पुनर्नवीनीकरण पानी को निष्कासित करने के लिए शेयर की टंकी में मुख्य निकास लाइन खत्म होता है।
- 2 "पीवीसी पाइप के टुकड़े की पूरी लंबाई खोलने एक एक इंच कट और पीवीसी मछली टैंक से क्षैतिज नाली लाइनों के लिए Tees के साथ खड़ी मुख्य निकास लाइन के लिए देते हैं।
- पीवीसी टोपी 2 "एक दो के साथ क्षैतिज नाली लाइनों" टोपी।
- प्रधानमंत्री और आवश्यक फिटिंग (कनेक्टर्स, निपल्स या कोहनी) का उपयोग टुकड़े सीमेंट।
6. मछली टैंक (चित्रा 3) का निर्माण।
- ड्रिल के साथ, एक छेद देखा के साथ ऊपरी किनारे से नीचे "मछली टैंक एक की पीठ पर छेद" एक एक 1/8 काटा।
- देते हैं और एक 90 डिग्री 04/03 कसने 'मछली टैंक निकास पाइप बनाने के लिए पुरुष एडाप्टर के लिए पीवीसी कोहनी पिरोया। निकास प्रणाली के माध्यम से जाने के लिए zebrafish को रोकने के लिए होल्डिंग अखरोट पंगा लेना से पहले ठीक जाल का एक टुकड़ा जोड़ें।
- टैंक के पीछे निकासी लाइन के खुले अंतरिक्ष में अपने निकास पाइप समाप्त होने के साथ मछली टैंक जगह
7. पानी की व्यवस्था शुरू
- ऐसे जलाशय के लिए इस्तेमाल एक के रूप में कई कंटेनरों में, प्रणाली के भीतर निहित पानी की तीन गुना राशि को मापने। इस पानी को 48 घंटे के लिए कंडीशनिंग के लिए कमरे के तापमान पर खड़े हैं।
- व्यवस्था करने के लिए पानी जोड़ें और यह तीन दिनों की एक न्यूनतम के लिए प्रसारित करते हैं।
- संदूषकों था की प्रणाली से मुक्त करने के क्रम में संचलन के प्रारंभिक तीन दिनों के दौरान सख्ती प्रणाली में पानी बदलेंटी पाइप के भीतर रहते हैं।
- स्टार्टर zebrafish जोड़ें और नाइट्रोजन चक्र स्थापित करने के लिए अनुमति देते हैं। एक सुसंगत 7. पीएच को मानक के अनुसार 1.8 एल प्रति सात zebrafish रखें, और Linbo 4 और McNabb के 6 ने सुझाव दिया है के रूप में सप्ताहांत के दौरान एक बार दैनिक सप्ताह के दिनों के दौरान दो बार दैनिक उन्हें खिलाने और।
- नाइट्रेट मॉनिटर (<75 मिलीग्राम / एल), नाइट्राइट (<10 मिलीग्राम / एल), और अमोनियम मछली जोड़ने के बाद पहले सप्ताह के दौरान दैनिक (0 मिलीग्राम / एल), और दो बार साप्ताहिक एक बार वांछित स्तर को नियमित रूप से पानी में परिवर्तन के साथ बनाए रखा गया है ।
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Representative Results
पम्प और Flters प्रणाली के निर्माण
रैक इकट्ठा किया और पहले कदम के लिए स्थापित हो जाने के बाद पंप और फिल्टर प्रणाली का निर्माण करने के लिए है। फिल्टर प्रणाली पंप से जुड़े रहे हैं और आसान फिल्टर रखरखाव और प्रतिस्थापन के लिए अनुमति देता है जो पहले शेल्फ के नीचे के स्तर से ऊपर स्थित हैं। इसी तरह, यूवी दीपक फिल्टर करने के लिए पीवीसी पाइप के साथ जुड़ा हुआ है और जरूरत (चित्रा -4 ए) के रूप में यूवी लैंप के आसान प्रतिस्थापन के लिए अनुमति देने के लिए प्लास्टिक तार संबंधों के साथ जगह में आयोजित किया जाता है। इसके तत्काल बाद एक कागज फिल्टर, सक्रिय कार्बन फिल्टर, और एक यूवी दीपक पीवीसी पाइप के माध्यम से स्थापित कर रहे हैं पंप निम्नलिखित। Bioballs नाइट्रेट को विषाक्त अमोनिया अपशिष्ट धर्मान्तरित जो जीवाणुओं के विकास के लिए सतह प्रदान करने के लिए टैंक के लिए जोड़ रहे हैं। प्रणाली में पानी के गैलन प्रति एक bioball बैक्टीरियल वृद्धि की अनुमति देने के लिए पर्याप्त क्षेत्र है। अतिप्रवाह के मामले में bioballs जलाशय में रहेगा और contamina की संभावना है, ताकि प्लास्टिक जलाशय के ढक्कन लगाया जा सकता हैtion के कम से कम कर रहे हैं। एक अतिप्रवाह घटना बहुत संभावना नहीं है, भले ही एक निकासी प्रणाली (जलाशय के शीर्ष पर एक पाइप नाली जोड़कर) प्रणाली के लिए किया जा सकता है कि एक आसान है।
मुख्य आपूर्ति लाइन का निर्माण
दूसरे चरण के लिए zebrafish टैंक (4B चित्रा) में शामिल होंगे कि हर डिब्बे फीड होगा कि मुख्य पानी की आपूर्ति लाइन को इकट्ठा करने के लिए है। इस लाइन पीवीसी पाइप के एक टुकड़े के साथ यूवी चिराग से जुड़ा है। इस लाइन का एक पीवीसी टी के माध्यम से रैक करने के लिए खड़ी है और पार्श्व चलाता है। टी के नीचे अंत पूरी प्रणाली के लिए एक नाली वाल्व के रूप में काम करेगा कि पीवीसी पाइप के एक टुकड़े कनेक्ट करने के लिए प्रयोग किया जाता है।
चार डिब्बों को क्षैतिज चलाने के टैंकों को खिलाने कि मुख्य लाइनों: पांचवें शेल्फ की दूसरी शेल्फ के शीर्ष पर, तीसरे शेल्फ के शीर्ष पर, तीसरे शेल्फ के शीर्ष और नीचे। , दूसरे, तीसरे और चौथे शेल्फ लाइनों के ऊपर मछली टैंक को पानी उपलब्ध कराने के बाद से वे midlin में चलाअलमारियों के ई। इन पंक्तियों के प्रत्येक व्यक्ति के डिब्बों के नियंत्रण की अनुमति देता है जो व्यक्ति पर बंद वाल्व, कर सकते है।
एक 9 बंदरगाह सिंचाई कई गुना क्षैतिज लाइनों के अंत से जुड़ा हुआ है, और इन irrigators लचीला ¼ "ट्यूबिंग (4B चित्रा) के माध्यम से मछली टैंक के लिए पानी की आपूर्ति। सिंचाई कई गुना की हर बंदरगाह एक बंद पर निर्मित वाल्व है। इसके अलावा, एक पर बंद वाल्व आसान उपयोग और पानी के प्रवाह पर नियंत्रण के लिए, मछली टैंक प्रवेश द्वार के पास, एक बंदरगाह से जुड़ी ट्यूबिंग के अंत में रखा गया है। ट्यूबिंग ढक्कन में drilled छेद से टैंक में डाला जाएगा। यह दृढ़ विश्वास है कि टैंक में डाला ट्यूबिंग रखने में सहायता करेगा।
पांचवें शेल्फ के शीर्ष पर चलता है कि लाइन एक दबाव रिलीवर के रूप में प्रयोग किया जाता है और यह एक व्यक्ति पर बंद वाल्व के साथ नियंत्रित किया जाता है। यह इस क्षेत्र के भंडारण के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है, ताकि पांचवें शेल्फ की पीठ पर चलाने के लिए इस लाइन की सिफारिश की है। माई के बादn लाइन रैक के पक्ष के midline में, यह एक पीवीसी कोहनी और पीवीसी पाइप के एक टुकड़े का उपयोग कर वापस करने के लिए लाया जाता है चलाता है, और फिर इसे एक और पीवीसी कोहनी और एक टुकड़े का उपयोग कर दबाव रिलीवर पंक्ति के रूप में अनुलंबीय (क्षैतिज) चलाता है पीवीसी पाइप की। दबाव रिलीवर लाइन रैक के दूसरे पक्ष में खड़ी चलाता है और (नीचे देखें इस निकास लाइन, 2 "पीवीसी पाइप से बना है) पानी जलाशय में समाप्त हो जाती है कि मुख्य निकास लाइन में समाप्त होता है।
मुख्य निकास लाइन का निर्माण
तीसरे चरण के लिए पानी जलाशय में रखा गया है जहां पक्ष (चित्रा 4C) में, रैक करने के लिए पार्श्व चलाता है जो निकास प्रणाली, इकट्ठा करने के लिए है। इस प्रणाली के 2 "पीवीसी पाइप का उपयोग करने और दबाव रिलीवर लाइन से आता है पानी एकत्र, और मछली टैंक से (नीचे मछली टैंक निर्माण देखें) draining बनाया गया है। मुख्य निकास लाइन पानी पुनः में रैक के शीर्ष पर दबाव रिलीवर लाइन को जोड़ने और समाप्त खड़ी चलाताservoir। इसके अलावा, मुख्य निकास लाइन पीवीसी टीज़ के माध्यम से मुख्य निकास लाइन से कनेक्ट कि क्षैतिज 2 "पीवीसी पाइप के माध्यम से मछली टैंक से नाली प्राप्त करता है। ये क्षैतिज निकास पाइप मछली टैंक (देखें नीचे) से नाली का पानी प्राप्त करने के लिए एक एक 'अनुदैर्ध्य काट दिया है। ये क्षैतिज नाली लाइनों पीठ पर और अलमारियों के नीचे के अंगों पर चलाने के लिए और सूखा पानी गंभीरता से मुख्य निकास लाइन को चलाने के लिए अनुमति देता है कि एक छोटी सी इच्छा है। मछली टैंक नाली के पानी स्पंज पर पड़ता है और मलबे से बाहर फिल्टर इतना है कि स्पंज फिल्टर पैड क्षैतिज नाली लाइनों को जोड़ रहे हैं। एक पूरी इकट्ठे प्रणाली चित्रा 5 में चित्रित किया गया है।
मछली टैंक का निर्माण
एक प्रतिनिधि मछली टैंक चित्रा 6 में दिखाया गया है। मछली टैंक नाली लाइन के अंत (निकास लाइन पर खंड ऊपर देखें) क्षैतिज नाली लाइन में रखा गया है। एक तार की जाली को रोकने के लिए मछली टैंक में नाली लाइन में डाला जाता हैटैंक से बाहर तैराकी से zebrafish। ये विशेष टैंकों भागने से मछली को रोकने के लिए और भी संदूषण के अवसरों को कम से कम कि पलकों है। अतिप्रवाह होती है, तो टैंक lids के फर्श पर गिरने से मछली को रोकने जाएगा। Lids के साथ टैंक आदर्श होते हैं, लेकिन एक प्रणाली तो एक छोटा सा छेद टैंक के शीर्ष के निकट drilled किया जा सकता है पलकों के बिना टैंक शामिल हैं जो बनाया गया है। इस भागने से मछली को रोकने, जबकि पानी से बचने के लिए अनुमति देगा।
कार्यकरण
एक zebrafish कॉलोनी अन्यत्र 3- 6 वर्णित उपलब्ध है और स्थापित प्रोटोकॉल द्वारा बनाए रखा जा सकता है। संक्षेप में, हमारी सुविधा लगभग 85 मिलीग्राम / मिनट (या लार्वा मछली टैंक के लिए 45 मिलीग्राम / मिनट) पर प्रणाली पंप, हर वयस्क के लिए प्रवाह दर को एडजस्ट करने के लिए (या लार्वा मछली टैंक) द्वारा सिस्टम वॉल्यूम घंटा प्रति लगभग 75 बार प्रसारित करने की अनुमति देता है । पानी की गुणवत्ता सक्रिय जैविक छानने का काम और छोटे पैमाने पर पानी में परिवर्तन द्वारा बनाए रखा है (~ प्रणाली मात्रा का 5%) जरूरत के रूप में। दैनिक निगरानीपीएच, चालकता, भंग ऑक्सीजन (डीओ) का स्तर, और तापमान लगातार शर्तों रखने के लिए आवश्यक हैं। किट व्यावसायिक रूप से पीएच को मापने के लिए उपलब्ध हैं और स्तरों करते हैं। चालकता मीटर भी खरीद के लिए उपलब्ध हैं। दैनिक इन चर का परीक्षण जलाशय से पानी की 250 मिलीलीटर हटाने के लिए और विश्लेषण करने के लिए आदेश में। पीएच स्तर 7.2 पर बनाए रखा जाना चाहिए, क्या 500 μS और 1300 μS के बीच कम से कम 6 मिलीग्राम, और चालकता होना चाहिए। (स्रोत यहाँ) तापमान 28.5 डिग्री सेल्सियस पर बनाए रखा जाना चाहिए। नियमित प्रणाली रखरखाव (3-4 सप्ताह) एक अनुमानित 30% पानी परिवर्तन और सफाई और फिल्टर पैड और लकड़ी का कोयला के प्रतिस्थापन शामिल है।
चित्रा 1: एक zebrafish सुविधा के तीन प्रमुख घटक। ए पंप और फिल्टर प्रणाली पहले शेल्फ के नीचे हिस्से (पर स्थित हैंशेल्फ) और प्रमुख आपूर्ति लाइन के साथ पानी स्टॉक टैंक कनेक्ट। बी प्रमुख आपूर्ति लाइन यूवी चिराग से निकला और मछली टैंक होते हैं कि तीन ऊपरी समतल करने के लिए पानी की आपूर्ति करती है। हर शेल्फ कम्पार्टमेंट स्वतंत्र रूप से आपूर्ति की है और व्यक्तिगत रूप से एक वाल्व के माध्यम से (या बंद) नियंत्रित किया जा सकता है कि ध्यान दें। यह मुख्य लाइन भी नीचे अंत में मुख्य निकासी वाल्व है, और ऊपरी छोर पर मुख्य निकास लाइन में समाप्त हो जाती है कि एक दबाव रिलीवर पंक्ति के रूप में जारी है। सी मुख्य निकास लाइन दबाव रिलीवर रेखा से और अलग से पानी प्राप्त करता है मछली टैंक डिब्बों और पानी स्टॉक टैंक में समाप्त होता है। हर शेल्फ पीवीसी पाइप रहे हैं और अनुलंबीय व्यक्ति मछली टैंक के लिए पानी प्राप्त करने के लिए खुले हैं, जो एक मछली टैंक निकास लाइन है कि ध्यान दें। इन लाइनों से थोड़ा पानी मुख्य निकास लाइन को गंभीरता से चलाने के लिए अनुमति देने के लिए इच्छुक हैं।इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
चित्रा 2:। तीन प्रमुख इकट्ठे एक zebrafish सुविधा के घटकों और आसानी से कार्यात्मक पानी स्टॉक टैंक पहले से ही bioballs है कि ध्यान दें। मुख्य निकास लाइन से पानी जल स्तर (स्पष्टता के लिए इस आंकड़े में दर्शाया नहीं है) के ऊपर जाल पर रखा एक स्पंज फिल्टर पर गिर जाएगी। स्पष्टता के लिए दूसरे शेल्फ दिखाया सिंचाई का साधन केवल चार आपूर्ति ट्यूबों है, दर्शाया केवल कुछ मछली टैंक है, और मछली टैंक निकास लाइन पारदर्शी है कि ध्यान दें। रैक की हर शेल्फ नौ 1 एल मछली टैंक पकड़ और एक 9 बंदरगाह सिंचाई का साधन हो सकता है।
चित्रा 3:। मछली टैंक इकाई मछली टैंक एक नियमित रूप से पालतू जानवर की दुकान में हासिल कर लिया और इसे ए मछली टैंक draining प्रणाली के पीछे की ओर एक एक 1/8 "छेद ड्रिलिंग के द्वारा निर्माण किया है एक दो एल क्षमता है। टैंक, तो 04/03 पीवीसी कोहनी एल 'एक 3/4 का उपयोग कर आकार "" पीवीसी पाइप के टुकड़े एक औंधा में रखा जाता है। " इस draining प्रणाली मछली टैंक के पीछे स्थित मछली टैंक निकास लाइनों के खुले पक्ष में गिर जाएगी। बी छवि मछली टैंक draining प्रणाली में एक जाल की स्थापना का चित्रण। मेष निकास लाइनों को सूखा जा रहा से zebrafish रोकता है।
चित्रा 4: अलग अलग हिस्सों निर्माण। ए तीन फिल्टर और पंप प्रणाली प्रणाली के नीचे रैक पर है। पंप तीन mechan से जुड़ा हैएक यूवी फिल्टर द्वारा पीछा राजनैतिक फिल्टर प्रणाली पानी से contaminants को खत्म करने के लिए। बी क्षैतिज आपूर्ति लाइन प्रत्येक टैंक के लिए ताजा पानी और ऑक्सीजन की आपूर्ति करेगा जो एक 9 बंदरगाह सिंचाई कई गुना, में समाप्त होता है। प्रत्येक शेल्फ को आपूर्ति लाइन की सफाई और संगरोध प्रयोजनों के लिए प्रत्येक शेल्फ के लिए पानी को रोकने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है कि एक पर बंद वाल्व है। सी मछली टैंक निकास लाइन परिसंचरण फिर से दर्ज करने के लिए मुख्य निकास लाइन में खाली। दबाव राहत लाइन भी मुख्य निकास लाइन में खाली।
चित्रा 5:। पूरी की प्रणाली पूरा सिस्टम एक निहित परिसंचरण तंत्र के लिए एक पंप और फिल्टर प्रणाली, एक मुख्य खड़ी आपूर्ति लाइन, प्रत्येक शेल्फ के लिए एक क्षैतिज आपूर्ति लाइन, एक टैंक निकास लाइन, एक दबाव राहत लाइन, और एक मुख्य निकास पंक्ति में शामिल ।
चित्रा 6:। प्रतिनिधि मछली टैंक मछली टैंक प्रणाली में क्षैतिज निकासी लाइनों के साथ कनेक्ट करेगा कि एक निकासी लाइन में शामिल है।
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Discussion
इस लेख का मुख्य उद्देश्य एक कार्यात्मक zebrafish सुविधा के निर्माण के जटिल नहीं है और कम से कम निर्माण ज्ञान के साथ नौसिखिया मछली शोधकर्ताओं द्वारा बनाया जा सकता है कि प्रदर्शन करने के लिए है। इसके अलावा, इस आलेख में इस कार्यात्मक zebrafish सुविधा के लिए सामग्री स्थानीय पालतू आपूर्ति भंडार या हार्डवेयर की दुकानों से आसानी से और affordably हासिल किया जा सकता है कि पता चलता है। सभी सामग्री और उपकरण प्रणाली के निर्माण का अधिग्रहण किया गया है और मछली टैंक के बारे में एक दिन काम लेता है एक बार। 72 घंटा पहले रन निर्धारित किया जाना है इस तरह के लीक या कम पानी के दबाव के रूप में सिस्टम में किसी भी विफलता, की अनुमति देता है। प्रणाली के भीतर contaminants के प्रचलन से हटाया जा करने के लिए यह पहला रन भी अनुमति देता है। उदाहरण के लिए, पीवीसी गोंद संचलन के पहले कई घंटों के दौरान हटा दिया जाएगा कि खतरनाक जैविक सामग्री हो सकती है। प्रणाली की अनुमति देता है और mainten के लिए मात्रा और पानी के प्रतिस्थापन के समायोजन की सुविधा है कि एक मुख्य निकासी वाल्व है मंजूरी। इसके अतिरिक्त, इस प्रणाली को भी पानी के दबाव के समायोजन की सुविधा है कि एक दबाव रिलीवर लाइन है। यह पानी के दबाव के नियमन की अनुमति देता है के बाद से केवल एक या दो डिब्बों (समतल) का उपयोग किया जाएगा जब यह पंक्ति उपयोगी है।
सुविधा व्यक्ति शोधकर्ताओं की क्षमता की जरूरतों को पूरा करने के लिए 1, 2 या 3 डिब्बों के उपयोग (1.8 एल के 36 मछली टैंक) की अनुमति के लिए डिजाइन में मॉड्यूलर है। प्रत्येक डिब्बे में रखा पर बंद वाल्व प्रणाली के विभिन्न भागों के अलगाव की सुविधा। यह वाल्व प्रणाली संभावित संक्रमण के प्रसार से बचने के लिए, और डिब्बों से सिस्टम की सफाई की सुविधा के लिए भी उपयोगी है। इसके अलावा, हर मछली टैंक पानी की आपूर्ति दो वाल्व, 9 बंदरगाह सिंचाई का साधन पर एक और मछली टैंक के प्रवेश द्वार पर लचीला ट्यूबिंग में से एक है। इस दोहरे वाल्व प्रणाली पानी के दबाव के ठीक ट्यूनिंग की अनुमति देता है और यह भी सफाई प्रक्रियाओं या मछली निकासी या हेरफेर की सुविधा।
टी "> अमोनिया, नाइट्राइट और नाइट्रेट का एक उचित दस्तावेज सुविधा के समुचित कार्य के लिए आवश्यक है। वे विकास के लिए nitrifying बैक्टीरिया के लिए पर्याप्त सतह प्रदान के बाद से इस के लिए, bioballs महत्वपूर्ण हैं। मछली कॉलोनी स्थिर है एक बार, सुविधा कर सकते हैं आसानी से बड़े या छोटे मछली टैंक का उपयोग करने के लिए संशोधित किया जाना है। इसके अलावा, सुविधा साहित्य 5 में उपलब्ध प्रोटोकॉल का पालन zebrafish प्रजनन के लिए संशोधित किया जा सकता है। इसके अलावा, सुविधा प्रणाली की क्षमताओं का विस्तार करने के लिए अन्य मॉड्यूल या रैक जोड़ने के लिए संशोधित किया जा सकता है ।एक अतिरिक्त oxygenator जोड़ने के लिए कोई जरूरत नहीं है कि इतनी टैंक में ताजा पानी के प्रवाह के लिए पर्याप्त ताजा ऑक्सीजन प्रदान करता है। पानी जलाशय में होता है कि हवा का आदान-प्रदान ऑक्सीजन की पर्याप्त स्रोत है। बड़ा टैंक तो इस्तेमाल कर रहे हैं तो एक अतिरिक्त ऑक्सीजन स्रोत जोड़ा जा सकता है। यह भी टैंक में ताजा पानी के प्रवाह के बिना मछली दम जाएगा उल्लेखनीय है कि है, इसलिए यह महत्वपूर्ण है कि किया जाना चाहिए जल प्रवाह बीबारीकी से कुछ भी नहीं सुनिश्चित करने के लिए निगरानी की ई पानी की लाइनें अवरुद्ध है। यह पानी का तापमान 28.5 डिग्री सेल्सियस पर बनाए रखा जाना आवश्यक है। एक निरंतर तापमान प्रणाली 28.5 डिग्री सेल्सियस पर रखे है जो में कमरे के तापमान को बनाए रखने के द्वारा प्राप्त किया जा सकता है। वैकल्पिक रूप से, एक मछलीघर हीटिंग स्रोत एक निरंतर तापमान बनाए रखने के लिए खरीदा जा सकता है। पानी की गुणवत्ता को बनाए रखने के अनुरूप प्रयोगात्मक परिणामों के लिए आवश्यक है। प्रयोगात्मक शर्तों के आधार पर सटीक पानी की गुणवत्ता के मानकों का निर्धारण में मदद करने के लिए उपलब्ध कई स्रोत हैं।
10 दिन और बाद में पुन: उपयोग करने से पहले 70% शराब के साथ स्प्रे - मछली टैंक हर 7 साफ कर रहे हैं। यह भी क्रोम रैक साफ और जंग को रोकने और निर्माण करने के लिए इस बिंदु पर सूख जाना है कि सुझाव दिया है। संक्रमण के लक्षण मनाया जाता है, तो व्यक्ति टैंक एक 2% ब्लीच समाधान 8 के साथ कीटाणुरहित कर रहे हैं। जनरल स्वास्थ्य संक्रमण के लक्षण के लिए विशेष ध्यान के साथ नजर रखी है (त्वचा अल्सर, सूजन, exolpthalmia, बंद रंग आदि।), गैस बुलबुला रोग (कारण) supersaturated गैस की सांद्रता, पानी के तापमान में तेजी से बदलाव, पाइपलाइन प्रणाली में समस्याओं), गिल हाइपरप्लासिया (पानी में अमोनिया, तांबा, जस्ता या सक्रिय गायक के उच्च स्तर पर (पेट की दीवार से बाहर धक्का कारण है कि मादा अंडे अवधारण करने के लिए) या अंडा जुड़े सूजन और fibroplasias (कारण विटामिन सी की कमी करने के लिए) स्कोलियोसिस।
इस सुविधा का निर्माण लचीला है और एक छोटे या विस्तारित प्रणाली के लिए अनुमति देता है। बुनियादी निर्माण विचारों लेने से, इस सुविधा के विभिन्न आकारों की बुनियादी अनुसंधान की जरूरत है फिट करने के लिए व्यवस्था की जा सकती है। निर्माण संस्था द्वारा भिन्न हो सकते हैं, क्योंकि प्रोटोकॉल में सबसे महत्वपूर्ण कदम 72 घंटा पहले रन और निर्माण के पहले सप्ताह के दौरान अमोनियम नाइट्रेट, और नाइट्राइट स्तर की दैनिक निगरानी कर रहा है। उत्कृष्ट पानी की गुणवत्ता मछली के स्वास्थ्य को बनाए रखने में सहायता करेगा। एक सस्ती मछली syste के लिए उपलब्ध मौजूदा प्रोटोकॉल की कईएम एक खुली हवा में पानी के प्रवाह 3 की आवश्यकता होती है। खुली हवा से संरक्षित पानी होने का पानी प्रदूषण और वाष्पीकरण के लिए मौका कम करता है। एक बंद व्यवस्था पर रखरखाव आम खुली हवा प्रणालियों की तुलना में जब कम है।
समस्याओं सुविधा के निर्माण में उत्पन्न होती हैं (आदि लीक, कम पानी के दबाव,।) एक बस सुविधा में चिंता का क्षेत्र दूर काटने और एक ही कदम-वार ढंग से भागों की जगह से एक पुख्ता पाइप की जगह ले सकता उपरोक्त के रूप में । इस प्रणाली के कारण किसी का ध्यान नहीं छोड़ा अगर मछली के लिए खतरनाक हो सकता है, जो छोटे लीक, करने के लिए बड़ी पानी की कमी के लिए असुरक्षित हो सकता है। एक न्यूनतम निवेश के लिए एक नाव बंद डिवाइस जल स्तर एक सुरक्षित सीमा से नीचे गिरा दिया गया है जब पता लगाने और सिस्टम बंद हो जाएगा। प्रणाली की करीब से निगरानी उपलब्ध नहीं है, तो यह आवश्यक हो सकता है। सही संशोधनों के साथ, इस प्रणाली गतिशीलता की कमी के अलावा चेहरे, बहुत कुछ सीमाएं हैं। इस प्रणाली का निर्माण हो जाने के बादयह कुछ भागों में कटौती और नए स्थान में उन्हें recementing बिना स्थानांतरित करने के लिए बहुत मुश्किल है एड। इस गतिशीलता सीमा प्रणाली आदर्श रूप से एक कार्यक्षेत्र में बनाए रखा जा करने की आवश्यकता होगी कि इसका मतलब है। गतिशीलता वांछित है लचीलेपन को बढ़ाने के लिए किया जा सकता है कि छोटे संशोधनों कर रहे हैं। पार्श्व प्रत्येक आपूर्ति, दबाव राहत लाइन, पंप निर्वहन की शुरुआत में एक यूनियन जोड़ें, और नाली वाल्व से ऊपर। नाली लाइनों ड्राई फिट करने के बजाय जगह में पुख्ता किया जा सकता है। पंप अनुभाग के लिए एक लचीला युग्मन जोड़ना भी गतिशीलता में सहायता करेगा। यह एक अतिरिक्त है
इस प्रणाली का सरल निर्माण और रखरखाव के साहित्य में पाया मौजूदा प्रोटोकॉल छोटे अनुसंधान संस्थानों 1,2,10-12 के लिए उपलब्ध हैं कि इसका मतलब है। रखरखाव इस स्नातक छात्र अनुसंधान के लिए एक आदर्श व्यवस्था बनाने सरल है। इस प्रणाली को भी, स्वतंत्र अनुसंधान और शिक्षण प्रयोगशालाओं के लिए उत्कृष्ट है।
अंत में, इस प्रकार केसुविधा, सस्ती बनाने के लिए आसान है, और इन विवो प्रयोग के लिए कार्यात्मक है। यह सुविधा सीमित संसाधनों और सीमित पशुपालन अंतरिक्ष के साथ संस्थानों के लिए आदर्श है। Zebrafish अनुसंधान औषध विज्ञान, शरीर विज्ञान, विकास, या यहां तक कि आनुवंशिक अध्ययनों सहित पढ़ाई के कई प्रकार, के लिए प्रयोग किया जाता है कि एक क्षेत्र है। वास्तव में, उपलब्ध उत्परिवर्ती या ट्रांसजेनिक zebrafish के बड़ी संख्या में बायोमेडिसिन के लगभग सभी क्षेत्रों में अनुसंधान के अभिनव लाइनों का समर्थन करता है। इसके अलावा, इस प्रणाली के छोटे से मुख्य रूप से स्नातक संस्थानों में अनुसंधान के अवसरों और विज्ञान की बड़ी कंपनियों के लिए कक्षा अनुभवों को बढ़ाने और जैव चिकित्सा वैज्ञानिकों की अगली पीढ़ी को प्रेरित करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है।
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Disclosures
लेखकों के लिए इस अखबार के लिए ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा।
Acknowledgments
लेखकों अनुसंधान एवं सहयोग (स्पार्क) पुरस्कार के लिए लघु फार्मेसी पुरस्कार के माध्यम से इस परियोजना की वित्तीय सहायता के लिए फार्मेसी प्रेस्बिटेरियन कॉलेज स्कूल के अनुसंधान के कार्यालय को धन्यवाद देना चाहूंगा। लेखकों श्री जॉन Smink, जलीय पशु अनुसंधान प्रयोगशाला के प्रबंधक, Clemson विश्वविद्यालय, Clemson, उसकी तकनीकी सहायता पांडुलिपि संशोधन के लिए अनुसूचित जाति धन्यवाद।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Item | Brand | Quantity | |
| 74-in H x 48-in W x 18-in D 5-shelf Steel Freestanding Shelving Unit | Style Selections | 1 | |
| 18-Gallon General Bucket/Tote | Centrex Plastics: LLC Rugged Tote | 1 | |
| 6-Outlet Power Strip With 15-Ft. Cord | Master Electrician | 1 | |
| 9-Watt UV Water Garden Clarifier FiIter and UV lamp | Smartpond | 1 | |
| Whole House Water Replacement Filter | Whirlpool | 6 | |
| Opaque Whole-House Pre-Filtration Housing | Whirlpool | 2 | |
| Thread Seal Tape | William H Harvey | 1 | |
| 8-fl oz LO-VOC PVC Cement | Oatey | 1 | |
| 8-fl oz LO-VOC Primer | Oatey | 1 | |
| 1/4-in x 100-ft Vinyl Drip Irrigation Distribution Tubing | Mister Landscaper | 1 | |
| 1/4-in Barbed Drip Irrigation On/Off Valve | Mister Landscaper | 33 | |
| 9-Port NPT Irrigation Manifold with Filter | Mister Landscaper | 6 | |
| Drop-In Filter with House | Whirlpool | 6 | |
| 2-in Dia 90-Degree PVC Elbow | LASCO | 3 | |
| 2-in Dia 90-Degree Tee | LASCO | 3 | |
| 3/4-in Dia 90-Degree Slip Elbow | LASCO | 15 | |
| 3/4-in Dia PVC Adapter | LASCO | 7 | |
| 3/4-in Dia PVC Tee | LASCO | 12 | |
| 2-in Dia PVC Cap | LASCO | 3 | |
| 1-in Dia x 3/4-in Dia PVC Adapter | LASCO | 2 | |
| 3/4-in PVC Socket In-Line Ball Valve | American Valve | 5 | |
| 1/2-in Dia x 3/4-in Dia PVC Adapter | Lasco | 8 | |
| 3/4-in Dia PVC Cap | Lasco | 1 | |
| 2-In x 5-Ft Pvc Pipe | Charlotte Pipe | 4 | |
| ¾-In x 10-Ft Pvc pipe | Charlotte Pipe | 3 | |
| 11/16x1-7/80 PVC ring | SXT | 10 | |
| ½” PVC male adapter | SXT | 1 | |
| ¾” PVC coupling | SXT | 1 | |
| ½” PVC female adapter | SXT | 1 | |
| link | |||
| 1.8 L Dual Beta Keeper | Top Fin | 27 | |
| ¾” PVC male adapter (w/ #18 O-ring) | SXT | 28 | |
| 90-degree ¾” threaded PVC elbow | SXT | 27 | |
| Fine Mesh | N/A | 1 yard | |
| Bulkhead Connector | N/A | 1 | |
| Hacksaw | N/A | 1 | |
| Drill | N/A | 1 | |
| Hole saw | N/A | 1 | |
| Adjustable Wrench | N/A | 1 | |
| Pliers | N/A | 1 | |
| Tape Measure | N/A | 1 | |
| Safety Glasses | N/A | 1 | |
| Work Gloves | N/A | 1 |
References
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- Linbo, T. L. Zebrafish (Danio rerio) husbandry and colony maintenance at the Northwest Fisheries Science Center. U.S. Dept. Commer., NOAA Tech. Memo. 62, (2009).
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