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गर्म पानी शोधन की वायरल कीटाणुशोधन प्रभावकारिता का निर्धारण

Published: June 21, 2022 doi: 10.3791/64164
Automatic Translation
*1, *1, 2, 3, 2, 2, 2, 4, 2
1Office of Research and Development, Center for Environmental Solutions and Emergency Response, Homeland Security and Materials Management Division, U.S. Environmental Protection Agency, 2Jacobs Technology Inc., 3Science Systems and Applications Inc., 4CSS Inc.
* These authors contributed equally

Summary

गंभीर तीव्र श्वसन सिंड्रोम कोरोनावायरस 2 (सार्स-सीओवी-2) महामारी के जवाब में, कपड़े के चेहरे को ढंकने, सूती स्क्रब और डेनिम पैंट के गर्म पानी के शोधन की वायरल कीटाणुशोधन प्रभावकारिता का परीक्षण करने के लिए एक प्रयोगशाला प्रोटोकॉल विकसित किया गया था। फी 6 वायरस (बैक्टीरियोफेज) का उपयोग कीटाणुशोधन प्रभावकारिता का परीक्षण करने के लिए जीव के रूप में किया गया था।

Abstract

यह प्रोटोकॉल शोधन अध्ययनों के संचालन के लिए एक प्रयोगशाला प्रक्रिया का एक उदाहरण प्रदान करता है जो वायरल कीटाणुशोधन पर डेटा उत्पन्न करता है। जबकि प्रोटोकॉल को कोरोनोवायरस रोग 2019 (सीओवीआईडी -19) महामारी के दौरान अनुसंधान के लिए विकसित किया गया था, इसका उद्देश्य एक ढांचा है, जो अन्य वायरस कीटाणुशोधन अध्ययनों के अनुकूल है; यह परीक्षण वायरस तैयार करने, परीक्षण सामग्री को टीका लगाने, शोधन प्रक्रिया के कारण धुली हुई वस्तुओं में दृश्य और अखंडता परिवर्तनों का आकलन करने और वायरल लोड में कमी को निर्धारित करने के चरणों को प्रदर्शित करता है। इसके अतिरिक्त, प्रोटोकॉल यह सुनिश्चित करने के लिए आवश्यक गुणवत्ता नियंत्रण नमूनों को रेखांकित करता है कि प्रयोग संदूषण और माप / टिप्पणियों से पक्षपाती नहीं हैं, जिन्हें कई शोधन चक्रों के बाद व्यक्तिगत सुरक्षा उपकरण (पीपीई) वस्तुओं की भौतिक अखंडता को ट्रैक करने के लिए दर्ज किया जाना चाहिए। प्रोटोकॉल के साथ प्रस्तुत प्रतिनिधि परिणाम कपास स्क्रब, डेनिम और कपास के चेहरे को ढंकने वाली सामग्री पर लगाए गए फी 6 बैक्टीरियोफेज का उपयोग करते हैं और संकेत देते हैं कि सभी नमूनों के लिए वायरल लोड में 3-लॉग (99.9%) की कमी पर प्राप्त गर्म पानी के शोधन और सुखाने की प्रक्रिया (3-लॉग कमी अमेरिकी पर्यावरण संरक्षण एजेंसी के उत्पाद प्रदर्शन परीक्षण दिशानिर्देश 810.2200 में कीटाणुनाशक प्रदर्शन मीट्रिक है)। वायरल लोड में कमी पीपीई वस्तुओं पर विभिन्न स्थानों पर समान थी। इस वायरल कीटाणुशोधन प्रभावकारिता परीक्षण प्रोटोकॉल के परिणामों से वैज्ञानिक समुदाय को अन्य प्रकार के परीक्षण वायरस और शोधन प्रक्रियाओं के लिए होम लॉन्ड्रिंग की प्रभावशीलता का पता लगाने में मदद मिलनी चाहिए।

Introduction

कोरोनावायरस रोग 2019 (सीओवीआईडी -19) महामारी ने अभूतपूर्व वैश्विक आपूर्ति श्रृंखला व्यवधान पैदा किया और आवश्यक व्यक्तिगत सुरक्षा उपकरण (पीपीई) 1,2,3 सहित कई वस्तुओं की गंभीर कमी का कारण बना। उच्च जोखिम वाले व्यवसायों में उन लोगों को अनुशंसित संकट क्षमता रणनीतियों का उपयोग करके अनुकूलित करना पड़ा और जनता ने मुख्य रूप से स्रोत नियंत्रण के लिए कपड़े की सामग्री चेहरे को ढंकने जैसी गैर-विशिष्ट वस्तुओं के उपयोग को अपनाया, लेकिन पहनने वालों के लिए कुछ श्वसन सुरक्षा भी प्रदान की। संयुक्त राज्य अमेरिका में, विशेष श्वसन सुरक्षा (यानी, एन 95 एस जैसे फेसपीस रेस्पिरेटर्स (एफएफआर) को फ़िल्टर करना) आपूर्ति की कमी के दौरान इन उच्च जोखिम वाले व्यवसायों (जैसे, स्वास्थ्य देखभाल) में से कुछ के लिए आरक्षित किया गया था। जब गंभीर तीव्र श्वसन सिंड्रोम कोरोनावायरस 2 (सार्स-सीओवी-2) संचरण के बारे में बहुत कम जानकारी थी, तो महामारी5 की शुरुआत में कई अन्य प्रकार की कपड़ों की सामग्री को भी बाधा संरक्षण के रूप में माना जाता था। पहनने वाले की सुरक्षा के लिए उपयोग किए जा रहे कपड़ों की विविधता के साथ, इन वस्तुओं के उपयोग, पुन: उपयोग और कीटाणुशोधन / परिशोधन के बारे में सवाल उठे। जबकि संयुक्त राज्य अमेरिका में यह आम तौर पर स्वीकार किया गया था कि चेहरे को ढंकने और अन्य कपड़ों की वस्तुओं के नियमित होम मशीन लॉन्ड्रिंग ने उन सतहों पर वायरस को गैर-संक्रामक बना दिया, इस दावे को मान्य करने के लिए बहुत कम डेटा मौजूद था, और परीक्षण के लिए प्रकाशित प्रयोगशाला प्रोटोकॉल की कमी थी। यहां प्रस्तुत अनुसंधान प्रोटोकॉल का उद्देश्य शोधन अध्ययन करने के लिए एक प्रयोगशाला प्रक्रिया का एक उदाहरण प्रदान करना है जो वायरल कीटाणुशोधन पर डेटा उत्पन्न करता है। प्रोटोकॉल को कोविड-19 महामारी के दौरान अनुसंधान के लिए विकसित किया गया था, लेकिन इसका उद्देश्य अन्य वायरस कीटाणुशोधन अध्ययनों के अनुकूल एक ढांचा होना है।

रोग संचरण में कपड़ों की भूमिका को मापना एक कठिन अवधारणा है। होम हाइजीन पर अंतर्राष्ट्रीय वैज्ञानिक मंच ने संक्रामक रोग के प्रसार में कपड़ों की भूमिका की समीक्षा करके इस चुनौतीपूर्ण कार्य का प्रयासकिया, साथ ही घर की स्वच्छता प्रथाओं के जोखिम मूल्यांकन के साथ। इस काम में शामिल कई वैज्ञानिक अध्ययनों की समीक्षा थी, जिन्होंने ऊन और कपास जैसे विभिन्न प्रकार के कपड़ों पर विभिन्न वायरल उपभेदों के अस्तित्व की जांच की। प्रत्येक अध्ययन ने वैक्सीनिया, पोलियोवायरस, श्वसन सिंकेटियल वायरस, हर्पीसवायरस और इन्फ्लूएंजा वायरस सहित एक अलग प्रकार के वायरस पर ध्यान केंद्रित किया। कपड़ों पर विभिन्न वायरस के जीवित रहने का समय वायरस-सामग्री संयोजन के आधार पर 30 मिनट से 5 महीने तक था। कई अध्ययनों ने सामग्री से हाथों पर वायरल संदूषण के हस्तांतरण का भी प्रदर्शन किया। प्रकाशन के हिस्से के रूप में, ट्रांसमिशन को कम करने के लिए एक महत्वपूर्ण प्रबंधन तकनीक के रूप में प्रभावी शोधन पर चर्चा की गई थी, लेकिन यह स्वीकार किया गया कि रोग के बोझ को कम करने पर शोधन के प्रभाव का परिमाण विशिष्ट वायरल संदूषक पर निर्भर था और 7,8,9,10,11 को मापना मुश्किल था।

शोधन प्रक्रिया रासायनिक, भौतिक और थर्मल उपचार प्रक्रियाओं का उपयोग करके सूक्ष्मजीवों को नष्ट कर देती है। उदाहरण के लिए, साबुन और डिटर्जेंट मिट्टी को अलग कर सकते हैं और कुछ रासायनिक रूप से मध्यस्थ रोगाणुरोधी कार्रवाई प्रदान कर सकते हैं। शारीरिक रूप से, कमजोर पड़ने और आंदोलन वायरल लोड में कमी लाने में सहायता कर सकते हैं। तापमान और डिटर्जेंट के साथ और बिना गर्म पानी में धोने पर मानव कोरोनावायरस एचसीओवी-ओसी 43 की दृढ़ता की जांच करने वाले एक अध्ययन में पाया गया कि डिटर्जेंट के बिना गर्म पानी में धोने पर कोई पता लगाने योग्य वायरस नहीं था, लेकिन मिट्टी के भार (कृत्रिम लार) की उपस्थिति में, घरेलू धोने के चक्रों में नमूनों के लिए गैर-पता लगानेवाले वायरस लोडिंग के लिए डिटर्जेंट की आवश्यकता होती है। गर्म पानी स्वयं कुछ सूक्ष्मजीवों को नष्ट करने का एक प्रभावी साधन भी प्रदान कर सकता है 13,14.

वर्तमान कपड़े धोने की प्रथाओं की स्थिति को सारांशित करते हुए एक हालिया प्रकाशन में, कपड़े की संरचना, भंडारण की स्थिति, गंदगी भार, धोने का तापमान और समय, और सुखाने के तापमान जैसे कई कारकोंको शोधन की वैश्विक प्रथाओं में अलग-अलग के रूप में पहचाना गया था। जबकि लॉन्ड्रिंग आबादी के एक बड़े प्रतिशत के लिए एक आम सफाई विधि है, मौजूदा प्रथाओं में यह बड़ी भिन्नता इसे सुरक्षित और प्रभावी ढंग से करने के लिए विस्तृत मार्गदर्शन जारी करती है, जब कोई आइटम वायरस से दूषित हो सकता है, चुनौतीपूर्ण और विरल हो सकता है। कोविड-19 महामारी के दौरान, संयुक्त राज्य अमेरिका के रोग नियंत्रण और रोकथाम केंद्र (सीडीसी) ने16,17 घर के मालिकों के लिए वस्तुओं को वैध बनाने के तरीके पर मार्गदर्शन जारी किया। इस शोधन मार्गदर्शन का अधिकांश हिस्सा जीवाणु कीटाणुशोधन18,19 पर कई पुराने अध्ययनों पर आधारित था और कई बेंचटॉप अध्ययनों द्वारा समर्थित था, जिन्होंने पाया है कि वायरस डिटर्जेंट20,21 के साथ पानी में निष्क्रिय हैं। मार्गदर्शन को संक्षेप में प्रस्तुत किया जा सकता है 1) डिटर्जेंट के लिए निर्माता के निर्देशों का पालन करें, 2) सबसे गर्म उपयुक्त पानी सेटिंग का उपयोग करें, और 3) सूखी वस्तुओं को पूरी तरह से। इन सिफारिशों का तर्क यह था कि डिटर्जेंट के साथ गर्म से अधिक संभव चक्र पर धोने के साथ-साथ पूरी तरह से सूखने के साथ (यदि संभव हो तो गर्मी के साथ) सार्स-सीओवी-2 वायरस को मार देगा।

शोधन प्रक्रिया में संभावित भिन्नताओं की सरासर संख्या में एक समान प्रोटोकॉल की आवश्यकता होती है, जैसे कि यहां प्रस्तुत किया गया है, चर को अलग करने और विशिष्ट प्रक्रियाओं की वायरल कीटाणुशोधन प्रभावकारिता का परीक्षण करने में सक्षम होने के लिए। एक अनुदेशात्मक वीडियो के साथ युग्मित इस प्रोटोकॉल का इरादा अन्य शोध अध्ययनों में प्रतिकृति के लिए एक प्रयोगशाला-आधारित गर्म पानी शोधन प्रक्रिया का प्रदर्शन करना है। इसके अतिरिक्त, इस वायरल कीटाणुशोधन प्रभावकारिता परीक्षण के परिणामों को वायरल-आधारित महामारियों के दौरान होम लॉन्ड्रिंग की प्रभावशीलता में उपभोक्ता विश्वास का निर्माण करना चाहिए।

Protocol

Phi6 को एक सहयोगी प्रयोगशाला से ~ 1 एमएल जमे हुए एलिकोट के रूप में प्राप्त किया गया था और उपयोग तक -80 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत किया गया था। यह शुरू में अधिक वायरस स्टॉक का प्रचार करने के लिए इस्तेमाल किया गया था जो बाद में उपयोग तक -80 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत किया गया था। फी 6 को प्रदर्शन वायरस के रूप में चुना गया था क्योंकि यह आमतौर पर एक मॉडल लिफाफे वाले वायरस के रूप में उपयोग किया जाता है, इसे उच्च टिटर्स में प्रचारित किया जा सकता है, औरपरीक्षण 22,23,24 करने के लिए कम जैव सुरक्षा स्तर की प्रयोगशाला की आवश्यकता होती है।

1. वायरस स्टॉक समाधान तैयार करें

  1. बैक्टीरियल होस्ट स्यूडोमोनास सिरिंगे में बैक्टीरियोफेज फी 6 को एक संशोधित ट्राइप्टिक सोया एगर मीडिया तैयारी और नरम एगर ओवरले विधि का उपयोग करके प्रचारित करें जैसा कि नीचे वर्णित है।
    1. सारणी 1 से प्राप्त सामग्री को विआयनीकृत जल में मिलाकर संशोधित ट्राइप्टिक सोया आगर तैयार करें।
    2. पी. सिरिंगा की रात भर की संस्कृति तैयार करें, जिसमें 0.9 से 1.5 के बीच ऑप्टिकल घनत्व (ओडी600) के साथ पी. सिरिंगा का 1 एमएल एलिकोट, संशोधित ट्राइप्टिक सोया ब्रोथ (तालिका 1) के 100 एमएल को जोड़ा जाए और कमरे के तापमान (20-26 डिग्री सेल्सियस) पर ~ 260 आरपीएम पर एक हिलने वाले इनक्यूबेटर में इनक्यूबेट किया जाए।
    3. टेस्ट ट्यूबों में संशोधित ट्राइप्टिक सोया आगर (~ 6 एमएल) रखकर और एक ऑटोक्लेवेबल कैप के साथ कवर करके नरम एगर ट्यूब तैयार करें। उपयोग होने तक 4 डिग्री सेल्सियस पर स्टोर करें। 15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर नरम आगर ट्यूबों को पिघलाने के लिए। चढ़ाना तक 48 डिग्री सेल्सियस पर रखें। 48 डिग्री सेल्सियस पर संतुलन महत्वपूर्ण है अन्यथा वायरस को परख में निष्क्रिय किया जा सकता है।
    4. नरम आगर में 1 एमएल अनडिल्यूटेड केंद्रित वायरस एलिकोट जोड़ें और लॉग चरण के 100 μL (0.9 से 1.5 के बीच OD600 ) P. syringae संस्कृति जोड़ें। एक ठोस 100 मिमी व्यास संशोधित ट्राइप्टिक सोया एगर प्लेट की सतह पर नरम आगर डालें। बुलबुले और / या फैलने से रोकने के लिए, ठोस आगर की सतह पर नरम आगर को समान रूप से वितरित करने के लिए प्लेटों को धीरे से घुमाएं और कमरे के तापमान पर रात भर सेते रहें।
    5. धीरे से एक बाँझ सेल स्प्रेडर के साथ तीन प्लेटों की सामग्री को एक बाँझ 50 एमएल शंक्वाकार ट्यूब में खुरचें जिसमें 15 एमएल एसएम बफर होता है। भंवर ट्यूब अधिकतम 1-2 मिनट के लिए एगर को तोड़ने के लिए सेट करते हैं और फिर 15 मिनट के लिए 7,000 x g पर सेंट्रीफ्यूज करते हैं।
    6. सुपरनैटेंट निकालें और 0.2 μm सिरिंज फ़िल्टर के माध्यम से फ़िल्टर करें। उपयोग होने तक -80 डिग्री सेल्सियस पर क्रायोवियल्स में 1 एमएल एलिकोट स्टोर करें।

2. पीपीई आइटम का पूर्व-परीक्षण दृश्य मूल्यांकन करें

  1. प्रत्येक पीपीई आइटम को एक साफ, चिकनी सतह पर रखें (उदाहरण के लिए, एक डिस्पोजेबल पेपर लाइनर के साथ कवर की गई प्रयोगशाला बेंच)। प्रत्येक पीपीई आइटम का तीन प्रतियों में आकलन करें।
  2. पीपीई परीक्षा के दौरान उचित प्रकाश व्यवस्था सुनिश्चित करें। विभिन्न स्थानों पर बिना धोए गए वस्तुओं की लंबाई और चौड़ाई को मापें और रिकॉर्ड करें (चित्रा 1)।

Figure 1
चित्र 1. पीपीई पूर्व-परीक्षण मूल्यांकन माप स्थान। डेनिम, स्क्रब और फेस-कवरिंग स्थान जहां लॉंडरिंग प्रक्रिया से सामग्री परिवर्तनों को ट्रैक करने के लिए लंबाई दर्ज की गई थी। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

3. कूपन तैयार करें

  1. पीपीई काटकर 2 सेमी x 4 सेमी परीक्षण कूपन बनाएं, प्रति फेस कवरिंग दो कूपन तैयार करें (तीन फेस कवरिंग का परीक्षण किया गया था), प्रति डेनिम पैंट पांच कूपन (तीन डेनिम पैंट का परीक्षण किया गया था), और प्रति स्क्रब शर्ट तीन कूपन (तीन स्क्रब का परीक्षण किया गया था)।
  2. प्रत्येक सामग्री प्रकार के लिए 2 सेमी x 4 सेमी प्रक्रियात्मक रिक्त कूपन (एक पूर्ण आकार के पीपीई आइटम के लिए एक सेट) का एक सेट तैयार करें जिसे टीका नहीं लगाया जाएगा, लेकिन इसे वैध बनाया जाएगा। फेस-कवरिंग प्रयोगों के हर दिन के लिए दो कूपन, डेनिम प्रयोगों के हर दिन के लिए पांच कूपन और स्क्रब प्रयोगों के हर दिन के लिए तीन कूपन तैयार करें।
  3. 2 सेमी x 4 सेमी सकारात्मक नियंत्रण कूपन का एक सेट तैयार करें जिसे टीका लगाया जाएगा, लेकिन शोधन नहीं किया जाएगा। फेस-कवरिंग प्रयोगों के हर दिन के लिए दो कूपन तैयार करें (तीन चेहरे को ढंकने का परीक्षण किया गया था), डेनिम प्रयोगों के हर दिन के लिए पांच कूपन (तीन डेनिम पैंट का परीक्षण किया गया था), और स्क्रब प्रयोगों के हर दिन के लिए तीन कूपन (तीन स्क्रब का परीक्षण किया गया था), और तीन स्टेनलेस स्टील कूपन।
    नोट: आइटम के आकार के आधार पर प्रतिकृति की विभिन्न संख्याओं का चयन किया गया था। उदाहरण के लिए, चेहरे को ढंकने पर पांच कूपन का पालन करना शारीरिक रूप से मुश्किल है, और दो कूपन डेनिम पैंट के सीमित क्षेत्र का प्रतिनिधित्व करेंगे। स्थानों को कवरेज को अधिकतम करने और उन क्षेत्रों में चुना गया था जो शोधन के दौरान मुड़ सकते हैं और साफ करना अधिक कठिन हो सकता है।

4. टीकाकरण करें

  1. 1x फॉस्फेट बफर्ड खारा के 10 एमएल की कुल मात्रा में 1 ग्राम बीफ निकालने को भंग करके 10% बीफ निकालने का घोल तैयार करें। 0.2 μm सिरिंज फ़िल्टर का उपयोग करके पूरे वॉल्यूम को फ़िल्टर करें।
  2. कमरे के तापमान पर खंड 1 में तैयार वायरस स्टॉक समाधान को पिघलाएं। उपयोग के दिन, पिघले हुए फी 6 स्टॉक के 100 μL को 10% गोमांस निकालने के घोल के 900 μL में जोड़ें।
  3. पीपीई आइटम पर घोल की 10 μL की बूंद को पाइप करके और पिपेट की नोक का उपयोग करके बूंद को फैलाकर ~ 107 पीएफयू / नमूने के साथ परीक्षण कूपन और सकारात्मक नियंत्रण कूपन का टीकाकरण करें। पीपीई सामग्री के आधार पर, बूंदें अलग हो जाएंगी और अलग-अलग तरीके से फिर से एकत्र होंगी।
  4. टीका लगाए गए कूपन को जैव सुरक्षा कैबिनेट में सूखने दें। अपनी विशिष्ट सामग्रियों के लिए अवलोकन के माध्यम से शुष्क समय निर्धारित करें। यहां प्रस्तुत परिणामों के लिए, निम्नलिखित समय का उपयोग किया गया था: स्क्रब = 30 मिनट शुष्क समय; चेहरा ढंकना = 60 मिनट शुष्क समय; डेनिम = 30 मिनट शुष्क समय; स्टेनलेस स्टील = 120 मिनट शुष्क समय।
  5. सुरक्षा पिन और सड़न रोकनेवाला तकनीकों का उपयोग करके चित्रा 2 के अनुसार पूर्ण आकार के पीपीई आइटम में टीका लगाए गए कूपन संलग्न करें।

Figure 2
चित्र 2. डेनिम, स्क्रब और फेस कवरिंग पर कूपन स्थानों का परीक्षण करें। अक्षर ए-डी सभी शोधन प्रयोगों के लिए अद्वितीय कूपन पहचानकर्ताओं से मेल खाता है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

5. शोधन करें

  1. निम्नानुसार लॉंडरिंग डिटर्जेंट तैयार करें।
    1. नल के पानी को निष्फल करें जो वाशिंग मशीन में उपयोग किया जाएगा और बाँझपन की जांच के लिए 10 एमएल आटोक्लेव पानी एकत्र करें। इस प्रोटोकॉल के लिए, 60 मिनट के तरल चक्र पर 7 लीटर नल का पानी ऑटोक्लेव करें।
    2. निर्माता के कमजोर पड़ने के निर्देशों के अनुसार शोधन समाधान तैयार करें। इस प्रोटोकॉल के लिए, 3.5 लीटर बाँझ नल के पानी में 1.54 मिलीलीटर डिटर्जेंट घोलें। एक गर्म प्लेट और हिलाने वाली पट्टी का उपयोग करके 50 डिग्री सेल्सियस तक शोधन समाधान को गर्म करें। शोधन समाधान के पीएच और तापमान को मापें और रिकॉर्ड करें। बाँझपन की जांच के लिए 10 एमएल घोल एकत्र करें।
  2. एक निष्फल वॉशर (3.25 एल) में शोधन समाधान डालें। परीक्षणों के बीच वाष्पस हाइड्रोजन पेरोक्साइड के 250 पीपीएम -4 एच चक्र का उपयोग करके प्री-स्टरलाइज़ वॉशर।
  3. एक स्टरलाइज़ किए गए वॉशर में पीपीई आइटम रखें। प्रति वॉशर एक डेनिम पैंट और एक स्क्रब शर्ट जोड़ें। प्रति वॉशर में एक टीका लगाए गए चेहरे को ढंकने और चार गैर-दूषित फिल मास्क जोड़ें; फिल मास्क में कूपन संलग्न नहीं थे।
  4. पीपीई आइटम को 18 मिनट के लिए धोएं (सामान्य आंदोलन के साथ दो 9 मिनट धोने चक्र)।। फोम को हटाने के लिए वॉशर को छान लें और कमरे के तापमान नल के पानी (हर बार 5 लीटर) के साथ कुल्ला करें। कमरे का तापमान स्टरलाइज़्ड नल का पानी वॉशर (3.25 एल) में जोड़ें और 9 मिनट लंबा कुल्ला चक्र करें।
  5. पीपीई आइटम (ओं) को वॉशर के स्पिन साइड में ले जाएं और 5 मिनट के लिए स्पिन करें। पीपीई आइटम (ओं) को ड्रायर में ले जाएं और उच्च गर्मी सेटिंग (93 डिग्री सेल्सियस) पर 80 मिनट के लिए सुखाएं।
  6. पीपीई को ड्रायर से बाँझ कार्यक्षेत्र में ले जाएं और प्रत्येक आइटम से कूपन को हटा दें और उन्हें शंक्वाकार ट्यूबों में रखें। ट्यूबों को 10% डे-एंगली शोरबा निष्कर्षण बफर के 10 एमएल के साथ प्री-फिल करें और एल्यूमीनियम पन्नी के साथ कवर करें।

6. कूपन पर वायरल लोड निकालें और गणना करें

  1. अपने उपकरण की अधिकतम सेटिंग पर 2 मिनट के लिए भंवर करके शोरबा को बेअसर करने वाले शोरबा को बेअसर करने के लिए 10% डे-एंगली के 10 एमएल में कूपन निकालें।
  2. एक पारंपरिक नरम शीर्ष आगर ओवरले विधि26 का उपयोग करके प्लेट अर्क।
    1. खंड 1 में वर्णित नरम संशोधित ट्राइप्टिक सोया एगर और पी सिरिंगे संस्कृति की ट्यूब तैयार करें। परीक्षण के दिन, एगर को पिघलाने के लिए 15 मिनट के लिए 121 डिग्री सेल्सियस पर नरम आगर ट्यूबों को ऑटोक्लेव करें। नरम आगर को 48 डिग्री सेल्सियस पर चढ़ाना तक पकड़ें। 48 डिग्री सेल्सियस पर संतुलन महत्वपूर्ण है अन्यथा परख में वायरस को थर्मल रूप से निष्क्रिय किया जा सकता है।
    2. शोधन अध्ययन में उपयोग किए जाने वाले प्रत्येक परीक्षण नमूने के लिए 1x फॉस्फेट-बफर्ड खारा में दस गुना कमजोर पड़ने की श्रृंखला तैयार करें। प्लेटिंग के लिए क्रमिक रूप से पतला (100 μL) और अनडिल्यूटेड (1 mL और 100 μL) एलिकोट दोनों का उपयोग करें।
    3. नरम एगर ट्यूब में परीक्षण नमूना एलिकोट जोड़ें जिसमें 6 एमएल नरम आगर और लॉग चरण पी सिरिंगे संस्कृति का 100 μL होता है (0.9-1.5 के बीच OD600 )। नरम आगर को एक ठोस संशोधित ट्राइप्टिक सोया आगर प्लेट की सतह पर डालें। समान रूप से प्लेट को घुमाकर ठोस आगर की सतह पर नरम आगर वितरित करें।
    4. कमरे के तापमान पर रात भर प्लेटों को इनक्यूबेट करें और प्रत्येक प्लेट पर पट्टिका बनाने वाली इकाइयों की गिनती करके अगले दिन मैन्युअल रूप से गणना करें।

7. पीपीई आइटम (ओं) का पोस्ट-टेस्ट दृश्य मूल्यांकन करें

  1. परीक्षण के लिए उपयोग किए जाने वाले विभिन्न पीपीई आइटम में निम्नलिखित दस्तावेज करें: लुप्त, मलिनकिरण और / या क्षति के संकेत (जैसे, फाड़ना, स्ट्रेचिंग); गंध; छोटे छेद, कट, या आँसू (नुकसान की तलाश के लिए एक छोटी टॉर्च का उपयोग करें); परतों का पृथक्करण, गायब धागे, ऐसे क्षेत्र जहां बंधन क्षतिग्रस्त है; सीम या जिपर को नुकसान; लोचदार के खिंचाव को मापें और रिकॉर्ड करें।

Representative Results

इस प्रोटोकॉल के पूरा होने के बाद कई अलग-अलग प्रकार के गुणवत्ता नियंत्रण डेटा और परिणाम उत्पन्न होते हैं। निकाले गए नमूना मात्रा के साथ पट्टिका बनाने वाली इकाई (पीएफयू) प्लेट गणना प्रति परीक्षण कूपन पीएफयू की संख्या की गणना को सक्षम करती है। तालिका 2 सीरियल कमजोर पड़ने / चढ़ाना परिणामों के लिए डेटा रिकॉर्डिंग शीट का एक उदाहरण है। तालिका 1 से कमजोर पड़ने वाले कारक, नमूना मात्रा और प्लेट गणना का उपयोग करते हुए, तालिका 3 चेहरे को ढंकने वाले परीक्षण के लिए प्रतिनिधि वायरल रिकवरी परिणाम दिखाती है। ध्यान दें कि इन आंकड़ों में परीक्षण कूपन और इनोकुलम, कूपन और धोने के पानी (डिटर्जेंट के साथ और बिना) के लिए गुणवत्ता नियंत्रण नमूने शामिल हैं। प्रक्रियात्मक रिक्त और बाँझपन गुणवत्ता नियंत्रण नमूने यह पुष्टि करने के लिए महत्वपूर्ण हैं कि पानी के समाधान और पीपीई सामग्री फी 6 से दूषित नहीं थे। संदूषण का संकेत कीटाणुशोधन प्रभावकारिता की गलत गणना का कारण होगा और परीक्षण को दोहराने की आवश्यकता होगी। सकारात्मक नियंत्रण नमूनों का उद्देश्य यह सत्यापित करना है कि प्रयोगों के दौरान वायरस स्टॉक समाधान पर्यावरणीय / स्वाभाविक रूप से खराब नहीं हुआ, जिससे वायरल लोड में कमी में शोधन प्रक्रिया के प्रभाव को बढ़ाया गया। परीक्षण कूपन परिणामों को स्वीकार करने के लिए इन नमूनों को इनोकुलम नियंत्रणों के 1 लॉग पीएफयू के भीतर रहना चाहिए। सकारात्मक नियंत्रण नमूनों के पीएफयू में एक बड़ी कमी यह भी इंगित करती है कि कूपन टीकाकरण के सभी चरणों की सावधानीपूर्वक समीक्षा की जानी चाहिए ताकि यह सुनिश्चित किया जा सके कि विश्लेषक उचित पाइपिंग और फैलाने वाली तकनीकों के साथ प्रोटोकॉल को निष्पादित कर रहा है।

यह प्रोटोकॉल प्रोटोकॉल से संबंधित शोधन और गुणवत्ता नियंत्रण जानकारी के कारण कपड़ों की वस्तुओं के भौतिक गुणों में परिवर्तन का आकलन करने के लिए जानकारी भी प्रदान करता है (तालिका 4 और चित्रा 3)। ये डेटा कई कारणों से उपयोगी हैं। पीपीई वस्तुओं के माप में रुझानों को रिकॉर्ड करने से विनिर्माण दोष के साथ एक आइटम की पहचान करने की अनुमति मिलती है। यह पहचान आउटलायर माइक्रोबियल डेटा की व्याख्या करने और उत्पाद व्यवहार में भिन्नता को प्रासंगिक बनाने में मदद कर सकती है। गंध या क्षति का नोट लेना एक संकेत भी प्रदान कर सकता है कि क्या वॉशर या ड्रायर एक प्रयोग के दौरान उप-बेहतर रूप से काम कर रहा था और यदि परीक्षणों को दोहराया जाना चाहिए या उपकरण की सेवा की जानी चाहिए। इसके अतिरिक्त, यदि परीक्षण योजना एक ही पीपीई आइटम के कई लॉन्ड्रिंग चक्रों की मांग करती है, तो डेटा यह निर्धारित करने में मदद कर सकता है कि लॉन्ड्रिंग के दौरान उपयोग के लिए पीपीई आइटम कितने समय तक अपनी अखंडता बनाए रखते हैं। डिटर्जेंट समाधान के पीएच का रिकॉर्ड रखने से जल स्रोत या डिटर्जेंट उत्पाद में परिवर्तन के लिए एक चेतावनी मिलती है। शोधन चरणों का एक समय लॉग बनाए रखना यह सुनिश्चित करता है कि वॉशर और ड्रायर पर टाइमर प्रयोगात्मक प्रोटोकॉल में बदलाव का कारण नहीं बनता है।

अंततः, इन आंकड़ों का उपयोग वायरल रोगजनकों के लिए सरोगेट के खिलाफ गर्म पानी शोधन प्रक्रिया की कीटाणुशोधन प्रभावकारिता की रिपोर्ट करने के लिए किया जाता है। शोधन कीटाणुशोधन प्रभावकारिता (समीकरण 1) की गणना पीपीई पॉजिटिव नियंत्रण परिणामों से औसत लॉग10 वायरस रिकवरी से पीपीई परीक्षण कूपन से औसत लॉग10 वायरस रिकवरी के घटाव द्वारा की जाती है (चित्रा 4)। परीक्षण कूपन परिणामों के लिए जो गैर-पता लगाने वाले हैं, पहचान सीमा के लॉग10 का उपयोग कीटाणुशोधन प्रभावकारिता गणना में किया जाता है। अन्य वायरल कीटाणुशोधन तकनीकों और मानकों के साथ तुलना के लिए लॉग मानों के रूप में कीटाणुशोधन प्रभावकारिता की रिपोर्ट करना आम है।

कीटाणुशोधन प्रभावकारिता = औसत लॉग10 (सकारात्मक नियंत्रण) - औसत लॉग10 (टेस्ट कूपन) (Eqn. 1)

Figure 3
चित्र 3. स्थान के आधार पर पीपीई आयामों में परिवर्तन। 3 = पूर्व-परीक्षण माप - पोस्ट-टेस्ट माप। एक नकारात्मक मान निर्दिष्ट स्थान पर आइटम के खिंचाव से मेल खाता है और एक सकारात्मक मान संकोचन से मेल खाता है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Figure 4
चित्र 4. फी6 से चेहरे को ढंकने, डेनिम और स्क्रब पीपीई सामग्री को कीटाणुरहित करने में गर्म पानी शोधन की प्रभावकारिता। तारे पूर्ण कीटाणुशोधन को दर्शाते हैं (परीक्षण कूपन पर गैर-पता लगाता है)। त्रुटि पट्टियाँ मानक विचलन (n = 3) को इंगित करती हैं. स्थान अक्षर चित्र 2 में दर्शाए गए प्लेसमेंट के अनुरूप हैं। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

तालिका 1. समाधान व्यंजनों. ट्राइप्टिक सोया एगर, ट्राइप्टिक सोया शोरबा और बीफ निकालने के समाधान तैयार करने के लिए आवश्यक सामग्री और मात्रा। कृपया इस तालिका को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें.

तालिका 2. एक सीरियल कमजोर पड़ने / चढ़ाना परिणाम पत्रक का एक उदाहरण भाग। कच्चे माइक्रोबियल डेटा की रिपोर्ट करने के लिए टेम्पलेट। कृपया इस तालिका को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें.

तालिका 3. चेहरे को ढंकने वाले माइक्रोबियल परिणाम। संसाधित पट्टिका बनाने वाली इकाई (पीएफयू) डेटा के लिए उदाहरण सारांश पत्रक। कृपया इस तालिका को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें.

तालिका 4. स्क्रब गुणवत्ता नियंत्रण और सामग्री मूल्यांकन लॉग। पीएच जांच के अंशांकन, डिटर्जेंट समाधान के पीएच, पूर्व और बाद के वॉश माप और शोधन चक्र समय की रिपोर्टिंग के लिए टेम्पलेट। कृपया इस तालिका को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Discussion

यह प्रोटोकॉल पूर्ण आकार के पीपीई / कपड़ों की वस्तुओं से वायरल कीटाणुशोधन की शोधन प्रभावशीलता का आकलन करने के लिए व्यवस्थित प्रयोगशाला परीक्षण निष्पादित करने के लिए विकसित किया गया था। प्रक्रियाएं वायरस तैयार करने, परीक्षण सामग्री को टीका लगाने, शोधन प्रक्रिया के कारण वस्तुओं में परिवर्तन का आकलन करने और शोधन (मशीन धोने और सुखाने) प्रक्रिया के परिणामस्वरूप वायरल लोड में कमी को निर्धारित करने के लिए महत्वपूर्ण कदमों को रेखांकित करती हैं। इसके अतिरिक्त, प्रोटोकॉल यह सुनिश्चित करने के लिए आवश्यक गुणवत्ता नियंत्रण नमूनों को रेखांकित करता है कि प्रयोग संदूषण और माप / टिप्पणियों से पक्षपाती नहीं हैं जिन्हें कई शोधन चक्रों के बाद पीपीई वस्तुओं की भौतिक अखंडता को ट्रैक करने के लिए दर्ज किया जाना चाहिए। फी 6 का उपयोग करने वाले परिणामों से संकेत मिलता है कि इस प्रोटोकॉल में उपयोग की जाने वाली गर्म पानी शोधन प्रक्रिया ने सभी नमूनों (चेहरे को ढंकने, स्क्रब और डेनिम पैंट) के लिए वायरल लोड में 3-लॉग से अधिक की कमी हासिल की। पीपीई/कपड़ों की वस्तुओं पर विभिन्न स्थानों पर वायरल लोड में कमी भी समान थी। 3-लॉग कमी प्रदर्शित करने के लिए, इस प्रोटोकॉल को एक उच्च वायरल लोड और एक स्थिर एजेंट (गोमांस निकालने) के उपयोग की आवश्यकता होती है जो सभी स्थितियों के लिए मिट्टी के भार का प्रतिनिधि नहीं हो सकता है।

मिनी वॉशर और कॉम्पैक्ट ड्रायर का चयन प्रतिकृति प्रयोगों की संख्या को अनुकूलित करने के लिए किया गया था जो अंतरिक्ष-विवश सेटिंग में आयोजित किए जा सकते हैं और प्रयोगशाला कर्मचारियों के लिए प्रबंधनीय प्रयोगों के दौरान उपयोग किए जाने वाले उपकरणों और पानी की मात्रा की नसबंदी को बनाए रखने के लिए। मिनी वॉशर का उपयोग करने के परिणामस्वरूप, कुल्ला करने के चरण अधिकांश होम लॉन्ड्रिंग अनुप्रयोगों की तुलना में मैन्युअल थे जो पूरी तरह से स्वचालित हैं। यह याद रखना भी महत्वपूर्ण है कि मशीन धोने विकसित देशों में प्रबल है, लेकिन हाथ धोने का अभ्यास अभी भी दुनिया भर में कियाजाता है। इसके अतिरिक्त, कुछ को धोने के लिए गर्म पानी तक पहुंच नहीं हो सकती है, और अन्य मशीन सुखाने के बजाय मैन्युअल रूप से हवा से सूखे कपड़े। इस वर्तमान प्रोटोकॉल में शोधन प्रथाओं में इन अंतरों को संबोधित नहीं किया गया था, लेकिन आसानी से मामूली संशोधनों के साथ जांच की जा सकती है जैसे कि बाल्टी और क्लोज लाइन का उपयोग करके धोने और सुखाने के चरणों को प्रतिस्थापित करना।

वैज्ञानिक साहित्य में वायरल रूप से दूषित चेहरे को ढंकने और सड़क के कपड़ों की सफाई / कीटाणुरहित करने पर पूरे पैमाने पर न्यूनतम ध्यान दिया गया है। आमतौर पर, अध्ययन बार-बार धोने और सुखाने के बाद चेहरे को ढंकने के निस्पंदन प्रदर्शन का आकलन करते हैं लेकिन वायरल कीटाणुशोधन प्रभावकारिता27,28 का मूल्यांकन नहीं करते हैं। उदाहरण के लिए, क्लैप एट अल ने कपड़े के मास्क और संशोधित प्रक्रिया मास्क की फिट निस्पंदन दक्षता का मूल्यांकन किया और प्रदर्शन में व्यापक भिन्नता पाई, जिसमें सरल संशोधनों के साथ फिट और निस्पंदन दक्षतामें वृद्धि हुई। एक अन्य अध्ययन ने विभिन्न सामग्रियों30 के चार कपड़े के मास्क की निस्पंदन दक्षता को देखा, फिर से स्रोत नियंत्रण या व्यक्तिगत सुरक्षा पर ध्यान केंद्रित किया। यह एक ही प्रयोगशाला में माइक्रोबियल भाग और यांत्रिक परीक्षण दोनों के लिए विशेषज्ञता की कमी के कारण हो सकता है। यहां प्रस्तुत प्रोटोकॉल कीटाणुशोधन प्रभावकारिता के साथ-साथ भौतिक गिरावट का मूल्यांकन प्रदान करता है।

डिस्पोजेबल श्वसन सुरक्षा (मुख्य रूप से एन 95 एस) के लिए कई परिशोधन / कीटाणुशोधन विधियां हाल ही में वैज्ञानिक साहित्य 31,32,33 में प्रकाशित हुई हैं। एफएफआर (जैसे, एन 95 एस) पर प्राथमिक ध्यान स्वास्थ्य कर्मियों और अन्य फ्रंट-लाइन व्यवसायों के लिए प्रदान की जाने वाली महत्वपूर्ण श्वसन सुरक्षा के कारण है। श्वसन यंत्र परिशोधन के लिए प्राथमिक प्रौद्योगिकियों में वाष्पीकृत हाइड्रोजन पेरोक्साइड (वीएचपी), पराबैंगनी कीटाणुनाशक विकिरण (यूवीजीआई), और वायरस निष्क्रियता के लिए नम गर्मी (भाप) शामिल थे। विस्कुसी एट अल ने एफएफआर और यूवीजीआई के लिए पांच परिशोधन विधियों का मूल्यांकन किया; एथिलीन ऑक्साइड और वीएचपी को सबसे आशाजनक परिशोधन विधियां31 पाया गया। फिशर एट अल ने सार्स-सीओवी-2 के साथ संदूषण को कम करने की उनकी क्षमता और एन 95 रेस्पिरेटर फ़ंक्शन32 पर उनके प्रभाव के लिए चार अलग-अलग परिशोधन विधियों- यूवी प्रकाश, शुष्क गर्मी, 70% इथेनॉल और वीएचपी का मूल्यांकन किया। एफएफआर के लिए प्रभावी परिशोधन प्रौद्योगिकियों पर कई अतिरिक्त अध्ययन हैं जिन्हें संक्षेप में प्रस्तुत किया गया था और 202033 में प्रकाशित किया गया था। हालांकि, ये विशेष विधियां औसत घर या छोटे व्यवसाय के मालिक द्वारा सुरक्षित रूप से उपयोग करने के लिए सुलभ या डिज़ाइन नहीं की गई हैं।

इस प्रोटोकॉल को फी6 का उपयोग करके विकसित किया गया था, जो सार्स-सीओवी-2 के समान एक आवरण वाला बैक्टीरियोफेज है, जिसमें स्पाइक प्रोटीन है, और सभी परीक्षणों के लिए समान आकार (80-100 एनएम) 34 है। चूंकि Phi6 एक ज्ञात रोगज़नक़ नहीं है, इसलिए इसे एक सामान्य सूक्ष्मजीवविज्ञानी जैव सुरक्षा स्तर 1 (बीएसएल -1) प्रयोगशाला में हेरफेर किया जा सकता है। Phi6 के खिलाफ प्रभावकारिता अन्य लिफाफे वाले वायरस की प्रभावकारिता का संकेत दे सकती है, हालांकि, रुचि के प्रत्येक वायरस के लिए अनुभवजन्यसत्यापन आवश्यक है। एक समान, नॉनपैथोजेनिक वायरल एजेंट का उपयोग करके, यह आशा की जाती है कि इस प्रोटोकॉल को कहीं और दोहराया जा सकता है और भविष्य में वायरल महामारियों / महामारियों का अध्ययन करने के लिए उपयोग किया जा सकता है। भविष्य के शोध में डिटर्जेंट के अलावा कीटाणुनाशक (जैसे, ब्लीच) का उपयोग और हाथ धोने और लाइन सुखाने के लिए एक मानकीकृत प्रोटोकॉल शामिल हो सकता है।

Disclosures

खुलासा करने के लिए हितों का कोई ज्ञात टकराव नहीं है।

Acknowledgments

अमेरिकी पर्यावरण संरक्षण एजेंसी (ईपीए) ने अपने अनुसंधान और विकास कार्यालय के माध्यम से जैकब्स टेक्नोलॉजी इंक के साथ ईपी-सी -15-008 के तहत यहां वर्णित अनुसंधान का निर्देशन किया। एजेंसी द्वारा इसकी समीक्षा की गई है लेकिन जरूरी नहीं कि यह एजेंसी के विचारों को प्रतिबिंबित करे। कोई आधिकारिक समर्थन अनुमान नहीं लगाया जाना चाहिए। ईपीए किसी भी वाणिज्यिक उत्पादों या सेवाओं की खरीद या बिक्री का समर्थन नहीं करता है। लेखक ईपीए आरटीपी माइक्रोबायोलॉजी की निगरानी के लिए ईपीए ठेकेदार डेनिस एसलेट, ब्रायन फोर्ड, राचेल बार्टमैन्स और लेस्ली मेंडेज़ सैंडोवल को ईपीए आरटीपी माइक्रोबायोलॉजी लैब में इस परियोजना पर उनके काम के लिए धन्यवाद देना चाहते हैं, ईपीए गुणवत्ता आश्वासन समीक्षा प्रदान करने के लिए रमोना शर्मन, और ईपीए तकनीकी समीक्षा प्रदान करने के लिए वर्थ कैलफी और शैनन सेरे।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
 Freezer (- 80 °C) ThermoFisher Scientific FDE30086FA
 Hot Plate VWR 97042-714
 Safety Pins (steel) Singer 319921
 Shaker Lab-Line Instruments, Inc. 3525
 SM buffer Teknova,  Hollister, CA S0249
 Syringe filter (0.2 μm) Corning, Corning, NY PES syringe filters, 431229
1X Phosphate Buffered Saline Teknova, Hollister, CA P0196, 10X PBS solution
Agar Becton Dickinson 214010
Autoclavable caps DWK Life Sciences, Millville, NJ KIM-KAP Caps, 73663-18
Autoclave Steris AMSCO 250LS Steam Sterilizer Model 20VS
Beef Extract Sigma-Aldrich, Millipore Sigma, St. Louis, MO, USA P/N B4888-100g
Calcium chloride Sigma-Aldrich 793639
Cell spreaders Busse Hospital Disposables 23600894
Centrifuge ThermoFisher Scientific 75004271 Heraeus MegaFuge 16R Centrifuge
Certified Timer https://nist.time.gov/ Not Applicable
Conical tubes (50 mL) Corning Life Sciences 352098 Falcon 50-mL high-clarity polypropylene conical centrifuge tubes
Cryovials Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA AY509X33
Denim Wrangler Rustler Regular Fit Straight Leg Jean Four Pocket Jean with Scoop Front Pockets, PN:87619PW
Detergent Proctor and Gamble Tide Original Scent Liquid Laundry Detergent Product Number (PN): 003700023068
Dextrose Fisher BP350
Dey-Engley neutralizing broth Becton Dickinson DF0819172
Dryer Magic Chef MCSDRY15W
Face Coverings Felina Reusable Organic Cotton Face Masks, PN: 990121P4
Incubator (top agar) Symphony 414004-596
Laboratory Notebook Scientific Notebook Company 2001
Magnesium chloride Sigma-Aldrich M9272
Media sterilization and dispensing system Integra Media Clave/Media Jet
Petri Dishes (100 mm) VWR 25384-342
pH Meter Orion/Oakton STARA1110/EW-35634-35
pH Probe Orion 8157BNUMD
pH Standards Oakton 00654-(00/04/08)
Phi 6 and Pseudomonas syringae Battelle Memorial Institute, Columbus, OH Not Applicable
Pipette & Tips Rainin (Pipettes) 17014391, 17002921; (Pipette Tips) 30389239, 17014382
Refrigerator True Manufacturing Co., Inc. GDM-33
Scrubs Gogreen cool PN: WS19100PT
Sodium chloride Sigma-Aldrich 57656
Stir Bar Fisherbrand 16-800-512
Tape Measure Lufkin PS3425
Test Tubes for Soft agar (14 mL) Corning, Corning, NY 352059
Thermometer Fisherbrand 14-983-19B
Tryptone Sigma-Aldrich T9410
Vaporous hydrogen peroxide sterilization bags STERIS 62020TW
Vortex (during the plating process) Daigger Scientific, Inc 3030A Vortex Genie 2
Vortex (for sample extraction) Branson Ultrasonics 58816-115 Multi-Tube vortexer
Washer Kuppet KP1040600A
Washer Sterilization Steris STERIS VHP ED1000 generator
Yeast extract Gibco 212750

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References

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इंजीनियरिंग अंक 184
गर्म पानी शोधन की वायरल कीटाणुशोधन प्रभावकारिता का निर्धारण
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Mikelonis, A., Archer, J., Wyrzykowska-Ceradini, B., Morris, E., Sawyer, J., Chamberlain, T., Abdel-Hady, A., Monge, M., Touati, A. Determining Viral Disinfection Efficacy of Hot Water Laundering. J. Vis. Exp. (184), e64164, doi:10.3791/64164 (2022).

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