ERRATUM NOTICE
Important: There has been an erratum issued for this article. Read more …
Summary
Här beskrivs en headspace-gaskromatografi-tandem-kvadrupolmasspektrometri (HS-GC-MS/MS) metod lämplig för bestämning av trimetylamin (TMA) i animaliska läkemedel. Protokollet omfattar provförbehandling, headspace-behandling, analysförhållanden, metodologisk validering och bestämning av TMA i djurbaserade läkemedel.
Abstract
Läkemedel som härrör från djur har särskiljande egenskaper och betydande botande effekter, men de flesta av dem har en uppenbar fiskig lukt, vilket resulterar i dålig efterlevnad hos kliniska patienter. Trimetylamin (TMA) är en av de viktigaste fiskiga luktkomponenterna i djurbaserad medicin. Det är svårt att identifiera TMA exakt med den befintliga detektionsmetoden på grund av det ökade trycket i injektionsflaskan med huvudutrymme som orsakas av den snabba syrabasreaktionen efter tillsats av lut, vilket gör att TMA flyr från injektionsflaskan med huvudutrymme och stoppar forskningsframstegen för den fiskiga lukten av djurbaserad medicin. I denna studie föreslog vi en kontrollerad detektionsmetod som introducerade ett paraffinskikt som ett isoleringsskikt mellan syra och lut. Hastigheten för TMA-produktionen kunde effektivt kontrolleras genom att paraffinskiktet långsamt kondenserades genom termostatisk ugnsuppvärmning. Denna metod visade tillfredsställande linjäritet, precisionsexperiment och återvinningar med god reproducerbarhet och hög känslighet. Det gav tekniskt stöd för deodorisering av djurbaserad medicin.
Introduction
Behandling av mänskliga sjukdomar genom att använda produkter som härrör från djurdelar och / eller deras biprodukter (här kallade animaliska läkemedel) får ökad uppmärksamhet. De spelar en viktig roll vid behandling av cancer, hjärt-kärlsjukdom, levercirros, mastit och andra sjukdomar, med fördelarna med en stark effekt, liten dos och signifikant och specifik klinisk effekt. Djurbaserade läkemedel har dock i allmänhet en framträdande fiskig lukt, vilket i hög grad påverkar patienternas följsamhet och är särskilt ogynnsamma för barn 1,2. Den fiskiga lukten kommer huvudsakligen från proteiner, aminosyror, fetter och andra ämnen som ingår i läkemedlet, som sönderdelas genom fettsyraoxidation, aminosyranedbrytning och andra sätt att producera en mängd olika ämnen med en fiskig lukt 2,3,4. Bland dem är trimetylamin (TMA) en flyktig gas med en fiskig lukt som i stor utsträckning finns i ruttnande eller ruttna animaliska livsmedel5.
Hittills har gaskromatografi (GC), vätskekromatografi (LC), jonkromatografi, spektrofotometri, vätskekromatografi-masspektrometri (LC-MS) och sensormetoder ofta använts för att detektera TMA i miljön, maten och urinen 6,7,8,9. Med tanke på den låga kontamineringen av GC-kolonnen och injektionssystemet, liksom den höga känsligheten, reproducerbarheten och den låga detektionsgränsen (0,1-1 mg / kg), föredrogs headspace-gaskromatografi-masspektrometri (HS-GC-MS) -metoden för livsmedelsanalys och biologisk analys8. För närvarande har endast Kina etablerat en nationell standard för TMA i livsmedel, och HS-GC-MS är den första metoden i GB5009.179-2016 standard10. Därför valdes ovanstående HS-GC-MS-metod för att detektera TMA i djurbaserad medicin. I ett tidigt skede fann vår forskargrupp att HS-GC-MS-detektionsstandarden för TMA i livsmedel kunde upptäcka den fiskiga lukten i flera animaliska läkemedel. I kombination med resultaten av studierna11,12 kunde det bevisas att TMA är den vanligaste nyckelsubstansen för fisklukt i djurbaserade läkemedel. Det visade sig dock att reproducerbarheten av de experimentella resultaten var dålig, och det fanns problem som TMA-flykt och dålig stabilitet, vilket inte kunde verifieras med metoden. Detta kan bero på det faktum att luten injicerades i injektionsflaskan med huvudutrymme och den snabba syrabasreaktionen ledde till ökat tryck i injektionsflaskan, vilket innebar att TMA flydde från injektionsporen, vilket förhindrade en stabil och noggrann detektion av TMA. Därför föreslog denna studie en förbättrad headspace-gaskromatografi-tandem kvadrupolmasspektrometri (HS-GC-MS / MS) detektionsmetod för att ta itu med dessa problem.
Protokollet förbättrar provförbehandlingen genom att separera syrabasreaktanterna i förbehandlingen med hjälp av fast paraffin, ett bra fast-flytande fasförändringsmaterial. När paraffinet långsamt kondenserades med temperaturökningen i den termostatiska ugnen, frigjordes TMA också långsamt i den förseglade injektionsflaskan med huvudutrymme, vilket undvek den tryckökning som orsakades av den våldsamma och snabba syrabasreaktionen och säkerställde stabil och noggrann TMA-detektering. Vidare undertryckte headspace-injektionen i kombination med multipla reaktionsövervakningslägen (MRM) i GC-MS/MS effektivt matriskemisk interferens och säkerställde resultatens tillförlitlighet. Resultaten av den metodologiska valideringen visade att linjäriteten, precisionstestet och återvinningsgraden för den förbättrade detektionsmetoden kunde uppfylla kraven, med god reproducerbarhet och hög känslighet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Se tabell 1 för information om läkemedelssubstanserna för Pheretima, Periplaneta americana och Hirudo. De identifierades av professor Xu Runchun, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, som de torkade kropparna av Pheretima aspergillum (E.Perrier), Periplaneta americana L. och Whitmania pigra Whitman.
1. Extraktion av prover
- Krossa Pheretima, Periplaneta americana och Hirudo med en örtkvarn (se materialtabell), sikta det medicinska pulvret genom nr 2 (siktöppning: 0,8 mm) och nr 4 (siktöppning: 0,25 mm) standardläkemedelssiktar och samla pulvret mellan de två siktarna för att erhålla det erforderliga provpulvret.
OBS: Pheretima är fluffig efter krossning, så dess pulver behöver inte siktas. - Ta 1 g pulver (exakt till 0,001 g) i ett 50 ml plastcentrifugrör, tillsätt 20 ml 5% triklorättiksyralösning (TCA) (se materialtabell) och homogenisera vid 1 000 rmin-1 i 1 minut med en höghastighetsdispersionshomogenisator.
- Efter homogenisering, centrifugera vid 1,717 x g i 5 min vid rumstemperatur, tillsätt lite absorberande bomull i glastratten och filtrera supernatanten till en 50 ml mätkolv.
- Upprepa ovanstående extraktionsprocess två gånger med 15 ml och 10 ml 5% TCA-lösning. Kombinera filtratet och späd det till 50 ml med 5% TCA-lösning.
2. Beredning av reagens
- Förbered 20% natriumhydroxidlösning: väg 20 g natriumhydroxid och använd avjoniserat vatten för att fixera volymen i en 100 ml mätkolv.
- Bered 5% TCA-lösning: väg upp 25 g TCA och använd avjoniserat vatten för att fixera volymen i en 500 ml mätkolv.
3. Beredning av TMA-standardstamlösning
- Bered stamlösning av TMA-standard: väg upp 0,0162 g standardprov av TMA-hydroklorid, lös upp det i 5 % TCA-lösning och fixera volymen till 100 ml, lika med koncentrationen av 100 μg/ml stamlösning av TMA. Förvara den vid 4 °C.
- Bered TMA-standardlösning: ta en viss volym TMA-standardstamlösning och späd den steg för steg med 5 % TCA-lösning till koncentrationer på 0,1 μg/ml, 0,5 μg/ml, 1 μg/ml, 2 μg/ml, 5 μg/ml och 10 μg/ml TMA-standardlösning.
4. Exempel på headspace-bearbetning
- Väg noggrant upp 2 ml natriumhydroxidlösning och 0,5 g fast paraffin (smältpunkt: 58–60 °C) i en 20 ml injektionsflaska med huvudutrymme (se Materialtabell).
- Placera injektionsflaskan med huvudutrymmet i en ugn vid 70 °C i ca 30 minuter. Det fasta paraffinet smälter helt.
- Ta ut den och låt den svalna till rumstemperatur så att paraffinet stelnar. Det stelnade paraffinet kommer att täta natriumhydroxid.
- Ta 2 ml av varje provextraktionslösning och lägg den ovanpå paraffinskiktet, tryck på locket och försegla.
- Sätt injektionsflaskan med förseglat huvudutrymme på maskinen (se Materialförteckning) för mätning.
5. Fastställande av analysvillkor för HS-GC-MS/MS
- Se tabell 2 för headspace-förhållanden och GC-MS-förhållanden.
- Se tabell 3 för joninformation.
6. Standard kurva ritning
- Se provets bearbetning av huvudutrymmet i steg 4.1–4.3 för att förbereda injektionsflaskan med huvudutrymme som innehåller tätningsskiktet för lut och paraffin.
- Aspirera 2 ml 0,1 μg/ml, 0,5 μg/ml, 1 μg/ml, 2 μg/ml, 5 μg/ml och 10 μg/ml TMA-standardlösning till en 20 ml injektionsflaska med huvudutrymme, försegla locket och mät på maskinen.
7. Precisionsprovning
- Se provets bearbetning av headspace i steg 4.1-4.3 för att förbereda injektionsflaskan med huvudutrymmet som innehåller lut och förseglingsskiktet för paraffin.
- Aspirera 2 ml 0,1 μg/ml TMA-standardlösning i en 20 ml injektionsflaska med huvudutrymme och försegla locket. Utför sex parallella tester i maskinen enligt tillverkarens instruktioner (se Materialförteckning).
8. Experiment med återhämtningsgrad
- Ta ett parti Pheretima, Periplaneta Americana och Hirudo (S02, S05, S07; Tabell 1) som representativa läkemedel för återhämtningsfrekvensexperimentet.
- Ta flera omgångar provpulver (S02, S05, S07) och grädda dem i ugn vid 50 °C i 72 timmar tills TMA inte påvisas.
- Se provberedningsmetoden i avsnitt 4-6 för att detektera innehållet av TMA i bakat medicinpulver.
- Ta 1 g bakat pulver (exakt till 0,001 g), lägg det i ett 50 ml plastcentrifugrör och tillsätt 50 μL TMA-standardlösning.
OBS: Koncentrationen av TMA-standardlösning är 100 μg / ml, 1000 μg / ml och 10000 μg / ml. - Tillsätt 20 ml 5% TCA-lösning och homogenisera vid 1000 rmin-1 i 1 min.
- Efter homogenisering, centrifugera vid 1717 x g i 5 minuter, tillsätt lite absorberande bomull i glastratten och filtrera supernatanten till en 50 ml mätkolv.
- Upprepa ovanstående extraktionsprocess två gånger med 15 ml och 10 ml 5% TCA-lösning; kombinera filtratet och späd det till 50 ml med 5% TCA-lösning.
9. Bestämning av detektionsgränser (LOD) och kvantifiering (LOQ)
- Bestäm bestämningen med motsvarande koncentration när signal-brusförhållandet (S/N) = 3.
- Bestäm LOQ med motsvarande koncentration när S/N = 10.
10. Bestämning av TMA-provhalten
- Ta ca 1 g fint pulver av Pheretima, Periplaneta americana respektive Hirudo, extrahera provet enligt ovanstående metod och bestäm det på maskinen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Schematiska diagram över förbehandlingsprincipen och driften av detta protokoll visas i figur 1 respektive figur 2. Topptiden för TMA var 2,3 min, med en skarp toppform och ingen störning från andra föroreningar (figur 3). Genom att mäta det linjära området 0,1-10 μg/ml TMA-standardlösning, med TMA-koncentration som abscissa och topparea som ordinat, ritades en standardkurva. Den linjära regressionsekvationen erhölls som y = 2522482x + 24255, med korrelationskoefficienten (R2) = 0,9998, vilket visar ett bra linjärt förhållande. LOD och LOQ beräknades med S/N = 3 respektive S/N = 10. LOD var 0,03 mg/kg och LOQ var 0,11 mg/kg. För att undersöka precisionen hos denna metod bestämdes innehållet av TMA (0,1 μg/ml) sex gånger parallellt med en relativ standardavvikelse (RSD) på 5,84%, vilket bevisade metodens goda precision. En grupp prover från Pheretima, Periplaneta americana och Hirudo valdes ut som representativa prover för återhämtningsexperimentet (S02, S05, S07, respektive); dessa utsattes för spikade återhämtningstester genom torkning för att minska TMA i örterna, och den genomsnittliga återvinningsgraden var 84,49%, 94,66% respektive 85,67%, med noggrannheten som uppfyllde analyskraven (tabell 4). TMA detekterades i nio satser av örter från Pheretima, Periplaneta Americana och Hirudo, med koncentrationer från 13,23-271,63 mg/kg (tabell 5). Denna protokollmetod har goda metodologiska valideringsresultat och detekterade också TMA-innehåll i animaliska läkemedel med en uppenbar fiskig lukt.
Figur 1: Schematiskt diagram över reaktionsprincipen för lutparaffinextraktionslösning. (1) Väg noggrant upp 2 ml natriumhydroxidlösning i en 20 ml injektionsflaska med huvudutrymme. (2) Tillsätt 0,5 g fast paraffin till injektionsflaskan med huvudutrymmet. (3) Värm för att smälta det fasta paraffinet, som är skiktat med natriumhydroxidlösning och flyter ovanför natriumhydroxidlösningen. (4) Efter kylning stelnar paraffinet och tätar ordentligt över natriumhydroxidlösningen. (5) Ta 2 ml provextraktionslösning och lägg den ovanpå paraffinskiktet, tryck på locket och försegla. (6) Sätt injektionsflaskan med förseglat huvudutrymme på maskinen för mätning. Uppvärmningen av den termostatiska ugnen smälter paraffinskiktet och syrabasreaktanterna ovanför och under paraffinskiktet reagerar för att producera TMA i en sluten miljö. Headspace-bearbetningen av provet utförs grovt i avsnitten 1–6. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 2: Schematiskt diagram över provets förbehandling . A) Förseglingstopp: steg 4.1–4.3 i protokollet. B) Extraktion av prov: avsnitt 1 och steg 4.4 i prövningsprotokollet. C) TMA-detektion: steg 4.5 och avsnitt 5 i protokollet. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 3: Totalt jonkromatogram av TMA. Spektrogram av 1 μg/ml TMA-standardlösning. Klicka här för att se en större version av denna figur.
| Batch | Ursprung | |
| Pheretima | S01 | Leshan City, Sichuanprovinsen |
| Pheretima | S02 | Dianbai, Guangdongprovinsen |
| Pheretima | S03 | Maoming City, Guangdong-provinsen |
| Periplaneta americana | S04 | Xichang, Liangshan Yi autonoma prefektur, Sichuanprovinsen |
| Periplaneta americana | S05 | Midu, Dali prefektur, Yunnan-provinsen |
| Periplaneta americana | S06 | Bozhou City, Anhui-provinsen |
| Hirudo | S07 | Weishan, Jining City, Shandong-provinsen |
| Hirudo | S08 | Kunshan City, Jiangsu-provinsen |
| Hirudo | S09 | Laiwu-distriktet, staden Jinan, Shandong-provinsen |
Tabell 1: Information om läkemedel av animaliskt ursprung.
| Headspace skick | |
| Temperatur på termostatisk ugn | 80 °C |
| Tid för prov b termostatering | 30 minuter |
| Nåltemperatur i huvudutrymmet | 100 °C |
| Urvalets storlek | 1 ml |
| GC-MS-villkor | |
| Kromatografisk kolonn | SH-flyktig amin, 30m × 0.32mm × 5μm |
| Program för kolonntemperatur | 40 °C (0,5 min) _20 °C/min _200 °C (5 min) |
| Injektorens temperatur | 200 °C |
| Regulatoriskt läge för bärargas | konstant linjär hastighet |
| Injektionsläge | delad injektion |
| Delat förhållande | 10:01 |
| Kolumnflöde | 2 ml/min |
| Urvalets storlek | 1 ml |
| Joniseringsläge | EI |
| Jonkällans temperatur | 200 °C |
| GC-MS-gränssnittets temperatur | 230 °C |
| Detektor spänning | Trimspänning +0,6 kV |
| Information om förvärvsläge | MRM |
Tabell 2: Headspace-tillstånd och GC-MS/MS-förhållanden.
| Sammansatt namn | CAS | Kvarhållningstid (min) | Kvantitativ jon (m/z) | CE | Referensjon (m/z) | CE |
| Trimetylamin | 75-50-3 | 2.308 | 58>42 | 20 | 58>30 | 7 |
Tabell 3: Information om TMA-föreningar.
| Prov | Provkoncentration (mg/kg) | Spikad koncentration (mg/kg) | Uppmätt koncentration (mg/kg) | Genomsnittlig återvinningsgrad (%) | RSD (%) |
| S02 | 128.99 | 500.00 | 548.50 | 84.49 | 2.12% |
| S05 | 49.08 | 500.00 | 520.93 | 94.66 | 0.96% |
| S07 | 101.36 | 500.00 | 527.07 | 85.67 | 1.87% |
Tabell 4: Resultat av återhämtningsfrekvensexperiment för TMA i djurbaserade läkemedel.
| Prov | Provkoncentration (mg/kg) |
| S01 | 88.11 |
| S02 | 137.34 |
| S03 | 18.63 |
| S04 | 19.10 |
| S05 | 40.50 |
| S06 | 13.23 |
| S07 | 271.63 |
| S08 | 69.73 |
| S09 | 67.70 |
Tabell 5: Resultat av bestämning av TMA-koncentration i djurläkemedel.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Läkemedel av animaliskt ursprung kommer från hela kroppen, organ eller vävnader, fysiologiska eller patologiska produkter, utsöndringar eller sekret och bearbetade produkter från djur. TMA är en viktig källa till fiskliknande lukt i läkemedel av animaliskt ursprung. Det är ett typiskt illaluktande ämne med en mycket låg lukttröskel (0,000032 × 10-6 V / V) och en stark fiskig lukt13. För närvarande kan den vanliga HS-GC-MS-metoden inte detektera TMA i animaliska läkemedel på ett stabilt och exakt sätt.
Detta protokoll förbättras i flera aspekter: (1) TMA är mer polär och alkalisk. I detta protokoll väljs en speciell kolonn för flyktig amingaskromatografi för att detektera TMA, vilket säkerställer noggrannheten och känsligheten för TMA-detektering. (2) I provberedningsprocessen för HC-GC-MS-metoden i GB5009.179-2016 injiceras en högkoncentrerad natriumhydroxidlösning i den förseglade injektionsflaskan med huvudutrymme10. Vid denna tidpunkt leder förekomsten av syrabasreaktionen till en ökning av trycket i injektionsflaskan med huvudutrymme, vilket kan orsaka utsläpp av TMA, vilket resulterar i felaktig detektion av TMA. Detta protokoll hänvisade till detektionsmetoden för svaveldioxidrester i traditionell kinesisk medicin14. I provförbehandlingen används fast paraffin som ett medium för att isolera syrabasreaktanter. Efter att injektionsflaskan med huvudutrymmet har förseglats smälter paraffinet långsamt under uppvärmningen av den termostatiska ugnen, undviker den allvarliga syrabasreaktionen och ger en god lufttät miljö för TMA-reaktion, vilket säkerställer stabiliteten och noggrannheten vid TMA-detektering. (3) Detta protokoll använder MRM-läget i GC-MS / MS för insamling och optimerar detekteringsparametrarna (kolonntemperaturprogram etc.) för att säkerställa analytisk effektivitet och noggrannhet.
Följande punkter måste beaktas vid tillämpningen av detta protokoll: (1) En lämplig mängd fast paraffinvax måste väljas. En mindre paraffindosering leder till ett oförseglat paraffinskikt och omedelbar reaktion av syrabasreaktanter, vilket resulterar i generering och utsläpp av TMA före tätning. En högre paraffindos kan hindra frisättning, anrikning och detektion av TMA. (2) Körteln måste vara tät och tätningen intakt. Dessutom finns det vissa begränsningar i protokollet. TMA i läkemedel av animaliskt ursprung är endogent och kan inte avlägsnas rent genom torkning. en låg koncentration av standardlösningen TMA-hydroklorid användes i återvinningsexperimentet, men effekten var otillfredsställande. Därför valdes endast samma koncentration av TMA-hydrokloridstandardlösningen för återvinningsexperimentet i detta protokoll.
Sammanfattningsvis tillhandahöll detta protokoll en provförbehandlingsmetod och noggrann detektion av TMA i djurbaserade läkemedel. Etableringen av denna metod fyllde luckan i detektionsmetoden för TMA i djurläkemedel och gav tekniskt stöd till forskning om fiskiga luktämnen i djurbaserade läkemedel, vilket är av stor betydelse för att främja forskning, utveckling och tillämpning av djurbaserade läkemedel.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Författarna har inget att avslöja.
Acknowledgments
Detta arbete stöddes av bidrag från National Natural Science Foundation of China (82173991) och Sichuan Science and Technology Program (2022YFS0442).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Centrifuge | Beckman Coulter Trading (China) Co. | SSC-2-0213 | |
| Chinese herbal medicine grinder | Zhejiang Yongkang Xi'an Hardware and Pharmaceutical Factory | HX-200K | |
| Convection oven | Sanyo Electric Co., Ltd | MOV-112F | |
| Decapper for 20 mm Aluminum caps | ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc | V1750004 | |
| Electronic balance | Shimadzu Corporation Japan | AUW220D | |
| Gas chromatography mass spectrometry | Shimadzu Corporation Japan | TQ-8050 NX | |
| Headspace Vial | ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc | 25760200 | |
| Homogenizer | Shanghai biaomo Factory | FJ200-SH | |
| Preassembled Cap | ANPEL Laboratory Technologies (Shanghai) Inc | L4150050 | |
| Sample sieve | Zhenxing Sieve Factory | / | |
| SH-Volatile Amine | Chengdu Meimelte Technology Co., Ltd | 227-3626-01 | |
| Sodium hydroxide | Chengdu Chron Chemicals Co., Ltd | 2022101401 | |
| Solid paraffin wax | Shanghai Hualing Kangfu apparatus factory | 20221112 | |
| Trichloroacetic acid | Chengdu Chron Chemicals Co., Ltd | 2022102001 | |
| Trimethylamine hydrochloride | Chengdu Aifa Biotechnology Co., Ltd | AF22022108 | |
| Ultra-pure water system | Sichuan Youpu Ultrapure Technology Co., Ltd | UPR-11-5T |
References
- Fan, H., et al. Material basis of stench of animal medicine: a review. China Journal of Chinese Materia Medica. 47 (20), 5452-5459 (2022).
- Deng, Y. J., et al. Progress on formation and taste-masking technology of stench of animal medicines. China Journal of Chinese Materia Medica. 45 (10), 2353-2359 (2020).
- Casaburi, A., Piombino, P., Nychas, G. J., Villani, F., Ercolini, D. Bacterial populations and the volatilome associated to meat spoilage. Food Microbiology. 45 (Pt A), 83-102 (2015).
- Rouger, A., Tresse, O., Zagorec, M. Bacterial contaminants of poultry meat: sources, species, and dynamics. Microorganisms. 5 (3), 50 (2017).
- Baliño-Zuazo, L., Barranco, A. A novel liquid chromatography-mass spectrometric method for the simultaneous determination of trimethylamine, dimethylamine and methylamine in fishery products. Food Chemistry. 196, 1207-1214 (2016).
- Zhao, C., et al. Ultra-efficient trimethylamine gas sensor based on Au nanoparticles sensitized WO3 nanosheets for rapid assessment of seafood freshness. Food Chemistry. 392, 133318 (2022).
- Bota, G. M., Harrington, P. B. Direct detection of trimethylamine in meat food products using ion mobility spectrometry. Talanta. 68 (3), 629-635 (2006).
- Neyer, P., Bernasconi, L., Fuchs, J. A., Allenspach, M. D., Steuer, C. Derivatization-free determination of short-chain volatile amines in human plasma and urine by headspace gas chromatography-mass spectrometry. Journal of Clinical Laboratory Analysis. 34 (2), e23062 (2020).
- Mitsubayashi, K., et al. Trimethylamine biosensor with flavin-containing monooxygenase type 3 (FMO3) for fish-freshness analysis. Sensors & Actuators B: Chemical. 103 (1-2), 463-467 (2004).
- National Health and Family Planning Commission of the People's Republic of China. GB 5009. 179-2016. , 12 (2016).
- Liu, X. M., et al. Study on material basis and processing principle of fishy smell of Pheretima aspergillum by electronic nose and HS-GC-MS. Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae. 26 (12), 154-161 (2020).
- Zheng, X., Sun, F., Du, L., Huang, Y., Zhang, Z. Comparison on changes of volatile components in Gecko before and after processing by HS-SPME-GC-MS. Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae. 28 (15), 145-152 (2022).
- Yoshiharu, I. Odor olfactory measurement. , Japan Association on Odor Environment. Tokyo. (2004).
- Jia, Z. W., Mao, B. P., Miao, S., Mao, X. H., Ji, S. Determination of sulfur dioxide residues in sulfur fumigated Chinese herbs with headspace gas chromatography. Acta Pharmaceutica Sinica. 49 (2), 277-281 (2014).
Tags
Kemi utgåva 193 djurbaserad medicin trimetylamin fiskig lukt gaskromatografi-tandemkvadrupolmasspektrometriErratum
Formal Correction: Erratum: An Improved Technique for Trimethylamine Detection in Animal-Derived Medicine by Headspace Gas Chromatography-Tandem Quadrupole Mass Spectrometry
Posted by JoVE Editors on 11/28/2023.
Citeable Link.
An erratum was issued for: An Improved Technique for Trimethylamine Detection in Animal-Derived Medicine by Headspace Gas Chromatography-Tandem Quadrupole Mass Spectrometry. The Authors section was updated from:
Hui Ye1
Xuemei Liu1
Haozhou Huang2
Lin Huang1
Yang Bao1
Hongyan Ma1
Junzhi Lin3
Xiaoming Bao4
Dingkun Zhang1
Runchun Xu1
1State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, Pharmacy School, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
2Innovative Institute of Chinese Medicine and Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
3TCM Regulating Metabolic Diseases Key Laboratory of Sichuan Province, Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
4Shimadzu (China) Co., Ltd
to:
Hui Ye1
Xuemei Liu1
JiaBao Liao2
Haozhou Huang3
Lin Huang1
Yang Bao1
Hongyan Ma1
Junzhi Lin4
Xiaoming Bao5
Dingkun Zhang1
Runchun Xu1
1State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, Pharmacy School, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
2China Resources Sanjiu Modern Chinese Medicine Pharmaceutical Co., Ltd
3Innovative Institute of Chinese Medicine and Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
4TCM Regulating Metabolic Diseases Key Laboratory of Sichuan Province, Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine
5Shimadzu (China) Co., Ltd
