Encyclopedia of Experiments: Biology
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- शुरू करने के लिए, 3 पेट्री व्यंजनों में भ्रूण उगाएं। पहले एक नियंत्रण प्लेट है जिसमें हैंक का समाधान होता है- एक संतुलित नमक समाधान। दूसरी और तीसरी प्लेटों में विभिन्न सांद्रता पर संभावित न्यूरोटॉक्सिक यौगिक के साथ हैंक का समाधान होता है।
एक्सपोजर समाधान में न्यूरोटॉक्सिक यौगिक निष्क्रिय प्रसार द्वारा भ्रूण की बाहरी झिल्ली में प्रवेश करता है और तंत्रिका तंत्र की प्रक्रियाओं जैसे ध्यान, समन्वय और मांसपेशियों की गतिविधि को बदल देता है। एक बार भ्रूण उचित उम्र के लार्वा में विकसित होते हैं, प्रत्येक लार्वा को 48 अच्छी प्लेट के एक व्यक्ति कुएं में स्थानांतरित करते हैं। प्रत्येक जानवर के लिए उपचार की स्थिति का ट्रैक रखें।
वेल प्लेट को रिकॉर्डिंग प्लेटफ़ॉर्म पर स्थानांतरित करें और कवर को नीचे खींचें। लार्वा को 10 मिनट के लिए अनुकूलित करें। सॉफ्टवेयर का उपयोग करके प्रकाश और अंधेरे अवधि के बारी-बारी से चक्र सेट करें।
ज़ेब्राफ़िश लार्वा आम तौर पर अंधेरे में अधिक आंदोलन और प्रकाश में कम आंदोलन प्रदर्शित करता है। प्रत्येक अवधि में नियंत्रण के लार्वा और एक्सपोजर समूहों द्वारा कूच की गई कुल दूरी को रिकॉर्ड करें। यदि यौगिक न्यूरोटॉक्सिक है, तो लार्वा अंधेरे में और नियंत्रण जानवरों की तुलना में प्रकाश में और भी अधिक आंदोलन दिखाता है।
निम्नलिखित प्रोटोकॉल में, हम न्यूरोटॉक्सिक यौगिकों के संपर्क में आने वाले जेब्राफिश लार्वा पर व्यवहार परीक्षण करेंगे।
- एक प्रयोग करने से कम से कम 2 घंटे पहले, कमरे के तापमान को 28 डिग्री सेल्सियस तक सेट करें और 48 अच्छी तरह से माइक्रोप्लेट के प्रत्येक कुएं में एक्सपोजर समाधान के 800 माइक्रोलीटर जोड़ें। 200 माइक्रोलीटर में एक लार्वा को स्थानांतरित करने के लिए एक संशोधित टिप के साथ 1 मिलीलीटर पिपेट का उपयोग करें।
जब सभी पैरामीटर सेट हो जाएं, तो परीक्षण कक्ष में प्रकाश को बंद कर दें और लार्वा को 10 मिनट के लिए सिस्टम में स्वीकार करने की अनुमति दें। अभिनंदन अवधि के अंत में, प्रयोग और निष्पादित पर क्लिक करें, और फ़ोल्डर बनाएं जिसमें प्रायोगिक फ़ाइलों को सहेजा जाना है। फिर परिणाम का नाम दर्ज करें और बैकग्राउंड और स्टार्ट करें।
प्रयोग के अंत में, प्रयोग और स्टॉप पर क्लिक करें। 48 अच्छी तरह से माइक्रोप्लेट को बाद के प्रयोगों के लिए वापस प्रकाश इनक्यूबेटर में वापस करें।
