过碘酸雪夫染色或PAS染色：一种评估肾小球结构畸形的方法

肾小球是肾脏内一个复杂的毛细血管网络，可过滤血液中的废物并清除多余液体。肾脏的滤过率依赖于这一特殊结构，该结构可通过过碘酸-希夫（PAS）染色进行观察。

首先，取一张载玻片上的石蜡包埋肾皮质切片。用二甲苯处理载玻片。二甲苯分子可溶解组织切片中的石蜡。接着，将样本依次置于浓度递减的酒精中。酒精可去除残留的二甲苯，同时使组织切片重新水化，以便后续染料的结合。

现在，向样本中加入过碘酸。过碘酸可将组织多糖（如糖原或黏液素）中的二醇基团转化为醛基。这些醛基与希夫试剂（品红-亚硫酸复合物）发生反应，生成品红色染料，使组织切片着色。用清水冲洗玻片，以去除多余的染料。

染色后冲洗，加入铁苏木精，一种与DNA结合并将其染成紫色的核复染剂。洗涤以去除多余的染料。最后，用浓度递增的酒精脱水，再用二甲苯透明，二甲苯在此作为透明剂。此步骤有助于提高组织切片在显微镜检查时的对比度。

肾小球疾病可表现为基底膜增厚、毛细血管改变以及与肾功能受损相关的异常细胞。

为了清晰显示肾小球细胞和系膜基质，将固定的石蜡包埋肾皮质样本在37摄氏度下干燥1小时，随后依次浸入二甲苯和梯度乙醇中进行脱蜡。将样本在蒸馏水中水化5分钟，然后将切片置于通风橱内的过碘酸溶液中孵育。

5分钟后，用100毫升蒸馏水洗涤载玻片三次，每次5分钟，随后在希夫试剂中孵育15分钟。孵育结束后，将载玻片置于流动的自来水下洗涤5分钟，再用苏木精复染3秒，最后在流动的自来水下彻底冲洗15分钟。

然后，依次用梯度乙醇进行脱水，并用二甲苯连续浸洗两次，每次3分钟。空气干燥后，可用含二甲苯的封片剂封片，于光学显微镜下以400倍放大倍数观察肾小球结构。