用于定量植物组织中非结构性碳水化合物的比色测定

可消化的碳水化合物是植物组织的非结构成分，它们是植物生长和新陈代谢的储备能量来源。

为了量化非结构性碳水化合物，请在试管中取适量的植物组织。将稀释的硫酸加入管中，并加热样品。加热后，硫酸将可消化碳水化合物的多糖水解成各自的单糖亚基。

冷却样品。离心管以沉淀未消化的植物材料并获得含有单糖的上清液。

上清液吸入新鲜管中，用苯酚溶液处理单糖，然后加入硫酸。涡旋管以混合内容物并孵育。

孵育过程中，硫酸使单糖脱水以产生糠醛衍生物。这些糠醛衍生物与苯酚反应产生黄金溶液。

谱测定黄金溶液在490纳米处的吸光度，该吸光度对应于植物样品中的碳水化合物含量。

接下来，取不同浓度的葡萄糖溶液并重复苯酚-硫酸处理以产生不同的颜色强度，并绘制标准曲线。将未知碳水化合物样品的吸光度值与葡萄糖标准品进行比较，得到植物组织中可消化碳水化合物的含量。

首先，将每个组织样本的重复物称入 15 毫升玻璃管中。标记试管，并记录每个样品的确切质量。

接下来，向每个管中加入 1 毫升 0.1 摩尔硫酸，并盖紧盖子。然后，将试管放入沸水浴中 1 小时。

试管转移到温水浴中冷却。然后，将试管中的内容物倒入标记的 1.5 毫升微量离心管中。之后，将试管以 15,000 g 离心 10 分钟。使用微量移液器将上清液转移到新的标记的 1.5 毫升管中。

使用移液器，将每个未知样品的 15 微升转移到自己的试管中。然后，向每个管中加入 385 微升蒸馏水。

在通风橱中，向每个标准和未知样品试管中加入 400 微升 5% 苯酚。此后，立即向每管中加入 2 毫升硫酸。

确保将硫酸添加到溶液表面。

试管孵育 10 分钟后，涡旋试管。然后，将试管再孵育 30 分钟。

将 800 微升从每个样品管转移到三个聚苯乙烯 1.5 毫升半微比色皿中。然后，将分光光度计设置为读数为 490 纳米，并用空白比色皿进行校准。

最后，将每个比色皿通过分光光度计，并记录吸光度。