April 25th, 2012
介绍一种新的技术来记录颅骨内的压力。微创的方法是使用一个光纤压力传感系统,准确地测量不会造成重大的脑外伤颅内压(ICP)在麻醉大鼠。该技术可以用在广泛的实验模型。
该程序的总体目标是在动物模型中简单准确地测量颅内压。在这种情况下,rat.这是通过首先在头骨上钻两个小孔来实现的。
接下来,将 ICP 监测螺钉和锚固螺钉插入颅骨并粘合到位 螺钉插入后,将光纤压力传感器插入监测螺钉,用于硬膜外腔的 ICP 测量。在最后一步中,在监测螺钉中的压力传感器周围形成气密密封,以密封颅穹窿。最终,通过使用硬膜外光纤压力传感器,可以获得显示颅内压生理轨迹的结果。
这种方法的视觉演示至关重要,因为关键步骤很难学习,因为大脑在手术过程中很容易受损并混淆实验结果。与侵入性脑室内或脑实质内 ICP 测量等现有方法相比,该技术的主要优点是我们的硬膜外 ICP 测量技术通过保持脑膜完整来防止对大脑的损伤。用脚捏确认完全麻醉后,将大鼠俯卧在加热板上,将大鼠的鼻子置于麻醉鼻锥中,剃掉头皮,然后用洗必泰清洗消毒,用长效局部麻醉剂浸润切口部位的皮肤,同时保持麻醉。
将头部固定在立体定位框架中并插入耳杆,直到头部稳定。确保呼吸不受影响。一旦动物就位,做一个 1.5 厘米的皮肤中线头部切口。
接下来,钝道解剖软组织和周围肌肉,以清楚地定位 lambda 和 bgma。通过使用无菌纱布拭子对暴露的颅骨施加压力,收缩皮肤和结缔组织以阻止任何出血。使用带有 1 毫米尖端毛刺的牙钻在右侧顶骨上钻一个 2 毫米宽的孔,用于中风研究。
从 Breg MA 向外侧 2 毫米和后侧 2 毫米处生一个孔,以避免上矢状窦,并确保 ICP 传感器的位置位于缺血区域上方,将孔埋入硬脑膜上方颅骨变得半透明的深度。然后在头骨开始开裂时,使用 0.5 毫米的尖端毛刺去除孔底部的头骨。使用 45 度镊子去除所有剩余的头骨,确保孔底有碎屑。
要使用车床和 0.7 毫米钻头通过六角头螺钉钻出 0.7 毫米的孔,请将监控螺钉旋转约 1.5 圈,将其插入孔中。小心不要损坏任何底层组织。使用一毫米的钻头在左顶骨上钻第二个孔,用于锚固螺钉,距马外侧两毫米,后侧两毫米,但不要完全穿透颅骨。
将 2 x 4 毫米的六角头螺钉插入第二个孔中。该螺钉有助于将牙科粘固剂和监测螺钉固定在颅骨上。使用移液管混合,然后将牙科粘接剂、单体和聚合物涂抹在螺钉头的底部,使用白色修正液让粘接剂干燥至少 10 分钟,在距离尖端 4 毫米处标记光纤传感器,用无菌盐水填充监测螺钉的孔,并确保螺钉内没有气泡。
将颅内压探头或 ICP 探头插入螺钉 4 毫米,使探头尖端与螺钉末端齐平。确保尖端不会刺穿硬脑膜。调整螺钉内的探头尖端,直到可以观察到反映通气和血压脉搏波的 ICP 轨迹。
气密密封对于准确的 ICP 读数至关重要,以一比一的比例创建粘性生物相容性填缝材料单体和聚合物的第一次混合物,在探头和监测螺钉的头部周围涂上一层薄薄的填缝剂。小心不要移位 ICP 探针。让第一层凝固 5 分钟后,在整个监测螺钉和探头周围涂上第二层填缝材料。
确保没有液体从填缝材料的任何缝隙中泄漏。取下耳栏,让大鼠保持俯卧姿势。在 ICP 监测期间,在 ICP 监测完成后,可以通过轻轻地将导管从螺钉中拉出并填缝材料来移除 ICP 传感器,立即将光纤传感器放入 1% 酶溶液中以防止尖端腐蚀。
所示的填缝材料中剩余的孔应用额外的填缝材料层覆盖。以下是基线时 10 秒内的 ICP 读数。Wistar 大鼠的平均 ICP 为 6 毫米汞柱。
较短振幅的事件反映血压脉搏波,而较长周期的事件显示通气事件 为了验证光纤传感器在每个实验中的位置,应测试 ICP 轨迹对腹部按压的反应。在这里,腹部暂时受压,导致颅内容量增加,导致脑静脉回流减少,因此只有在初始 ICP 升高后,动脉压才会升高。在大多数涉及自主呼吸动物的实验中观察到呼吸暂停期。
这些事件在此处显示的生理记录中通过呼吸和动脉压力轨迹上没有呼吸偏转来识别。ICP 轨迹中的等效更改验证了 ICP 探针在此处的位置。显示了移除耳杆后的典型 ICP 轨迹,耳杆的初始插入导致颅骨轻微压迫,随之而来的破坏、颅内体积,从而增加 ICP。
如果传感器位置正确,一旦掌握了耳杆,ICP 将掉落至少 4 到 5 毫米的汞柱。如果执行得当,这项技术可以在大约 30 分钟内完成。看完这个视频后,您应该对如何使用微创技术正确准确地测量颅内压有了很好的了解。
这种技术最困难的部分是这里的螺钉插入。穿过颅骨时必须小心,以防止损伤下面的脑膜和大脑。
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本文描述了一种新颖的技术,用于测量麻醉大鼠的颅内压(ICP),使用微创光纤压力传感系统。该方法旨在提供准确的ICP测量,而不会造成显著的脑部创伤,使其适用于各种实验模型。