A Direct, Early Stage Guanidinylation Protocol for the Synthesis of Complex Aminoguanidine-containing Natural Products

这种直接合成方法在这里用于制备海洋天然产物 clavatadine A 的总体目标是减少制备含线性氨基胍的分子所需的化学转化次数。该方法可用于快速有效地制备天然和工程化合物，以进一步了解它们的生物学特性，从而可能为人类健康带来新的和更好的药物。早期胍酰化的主要优点是，如果设计适当的保护基团策略以避免后续反应中的化疗选择性问题，则质量胍可以保持完整。

首先，在分析天平上称取 0.933 克 2,4-二溴均质酸内酯。将此固体添加到圆底反应瓶中，该反应瓶在氮气伞下装有磁力搅拌棒。向培养瓶中加入 30 毫升无水二氯甲烷。

在环境温度下搅拌以溶解固体。接下来，通过注射器向烧瓶中加入 0.103 毫升 Hunig 碱。用橡胶隔膜盖住装有先前制备的未纯化异氰酸酯的圆底烧瓶的开口。

然后将培养瓶连接到 Schlenk 管路，并用氮气吹扫 10 分钟。向装有异氰酸酯的培养瓶中加入 30 毫升无水二氯甲烷。在环境温度下旋转烧瓶以溶解异氰酸酯。

然后，用 18 英寸长的 20 号金属套管的斜面金属尖端刺穿每个隔膜，直接连接两个烧瓶。从装有二溴内酯溶液的培养瓶中取出氮气入口，并将 2.5 厘米 16 号出口针插入隔膜。然后关闭用作 Schlenk 线出口的起泡器。

为了使用正内气压力安全地进行套管转移，并避免舒伦克管路中积聚过大的压力，请确保气体始终有畅通无阻的逸出路线。将金属套管的一端放入异氰酸酯溶液中，并在大约一小时内将整个溶液转移到装有二溴内酯溶液的烧瓶中。用两个连续的 5 毫升二氯甲烷冲洗装有异氰酸酯溶液的烧瓶。

将每个用套管冲洗的二氯甲烷转移到现在装有反应混合物的烧瓶中。接下来，取下出口针，同时重新打开流向喷水器的氮气流。将氮气入口从装有异氰酸酯溶液的培养瓶转移到装有反应混合物的培养瓶中。

取出套管，在环境温度下搅拌反应混合物 3 小时。三小时后，去除隔膜，将反应混合物暴露在空气中。然后使用搅拌棒回收器取出磁力搅拌棒。

使用旋转蒸发器蒸发烧瓶中的液体，浴槽温度设置为 40 摄氏度，旋转设置为 120 RPM。然后，使用二氯甲烷和乙醚的梯度洗脱，通过硅胶固定相，通过快速柱层析纯化粗品。通过制作由 60 克硅胶和足够体积的二氯甲烷组成的浆液来湿填充塔，以便将浆液倒入塔中。

利用气压迫使洗脱液通过色谱柱，使 e-flux 以平缓的液体流的形式流动。接下来，将粗品溶解在最小体积的二氯甲烷中。小心地将溶液加载到色谱柱中，不要干扰硅胶。

敲击色谱柱以确保硅胶顶部平整后，排空洗脱液，使其达到硅胶的水平。为避免在色谱柱洗脱过程中干扰硅胶，请在硅胶顶部加入沙子，形成一个高度约为 0.5 至 1 厘米的圆柱体。然后加入几毫升二氯甲烷打湿沙子。

排空洗脱液后，用二氯甲烷填充色谱柱。如前所述，使用气压迫使洗脱液通过硅胶。收集馏分，直到未反应的二溴内酯完全从色谱柱中逸出。

要确定何时发生这种情况，请在 TLC 板上每几分之一的柱馏分中发现一个。当未反应的二溴内酯从色谱柱中逸出时，用 90 比 10 的二氯甲烷和乙醚溶液更换洗脱液。继续收集馏分，直到所需的氨基甲酸酯产物完全从色谱柱中逸出。

将所有含有氨基甲酸酯的级分混合在去皮圆底烧瓶中。使用旋转蒸发器蒸发溶剂。在高真空下干燥所得的泡沫状固体。

然后通过质子和碳 anamar 光谱在氘代氯仿中分析产物。此时，在分析天平上称取 1.205 克氨基甲酸酯。将此固体添加到含有磁性搅拌棒的干净圆底反应瓶中。

接下来，向培养瓶中加入 12 毫升四氢呋喃。然后在环境温度下搅拌下加入 48 毫升一摩尔盐酸。轻轻放置一个 24/40 磨砂玻璃塞以覆盖培养瓶的孔径。

将培养瓶浸入已预热至 30 摄氏度的水浴中，置于温控加热板上。加热 20 小时后，通过中等孔隙率的烧结玻璃漏斗将所得悬浮液真空过滤到干净的去皮圆底烧瓶中。然后，使用旋转蒸发器蒸发烧瓶中的黄色溶液，浴槽温度设置为 50 摄氏度，旋转设置为 120 RPM。

在高真空下将所得的黄色至桃色无定形固体干燥至恒重。通过在 40 摄氏度的水浴中加热培养瓶来促进干燥。最后，通过质子和碳 anamar 光谱在无水氘代二甲基亚砜中分析得到的 clavatadine A 盐酸盐。

市售的 α ω 二胺的直接胍酰化，然后与三倍基因反应，得到反应性异氰酸酯 8 作为克拉瓦他定 A 的线性部分，产量高。当异氰酸酯 8 与二溴苯酚 3 在催化量的 Hunig 碱存在下结合时，氨基甲酸酯的形成提供了中等产率的化合物 9。色谱后重新分离二溴酚 3 表明，可能在反应条件下部分异氰酸酯分解。

或者产品在病情检查或色谱过程中可能部分水解。内酯在酸性条件下的水解伴随着胍保护基团的深度保护，导致最终分子 clavatadine A.一旦掌握了这种通用技术，就可以用于合成线性氨基胍含化合物。仔细规划将确定后续化学反应是否与胍保护基团相容。

最后，在进行非水反应时应用适当的无水技术很重要。不要忘记三飞气和溴是极其危险的化学物质。在使用它们之前，请查阅每种化学品的安全数据表。

为了限制接触，只能在工作通风橱中处理这些试剂，并使用适当的个人防护设备。