nog 小鼠多发性骨髓瘤异种移植的多模态生物发光和正电子发射成形断层扫描成像

该方法可用于回答有关骨髓微环境作用和骨髓瘤肿瘤生存性等关键问题。该程序的主要优点是，它可以应用于纵向抗药物研究，并用于以非侵入性的方式检测多种生化途径。在实验当天，首先将8226个路西拉酶转成细胞在200 RCF的冰冷PBS中三次清洗，每200个RCF进行5分钟的离心，并在新鲜冰冷PBS中重新供应颗粒，每200微升冰冷PBS的5倍至第6个细胞。

接下来确认在麻醉的四到六周大的NOG小鼠中对手趾捏缺乏反应，并在动物的眼睛上涂抹眼科软膏。将细胞装入装有26针的一毫升胰岛素注射器。将整个细胞体积注入动物的尾静脉，然后将鼠标返回到其笼子，进行监测，直到完全恢复。

挑战后10至20天，在无菌盐水内注射200微升体内D-西西芬基质。注射后 5 至 10 分钟内将麻醉动物放在小型动物成像系统中的上角位置。测量相应成像软件中选定感兴趣区域的平均辐射。

对于8226路西法酶肿瘤的靶向治疗，在测量了每个动物的基线生物发光后，随机将动物分为治疗组，并用一系列200微升IP注射Temsirolimus或盐水对照治疗每只小鼠。每周测量路西法酶活性两次，并绘制生物发光随时间的变化。要测量肿瘤代谢的变化，首先从小鼠的家笼中取出食物24小时，以避免过量的非特异性放射性标记的氟化物葡萄糖吸收。

第二天，将无菌盐水中18个氟放射性标记氟化物葡萄糖探针的500至100微曲线稀释至每只小鼠100微升的最终体积，并记录探头的时间和活性，使用剂量校准器。当探头准备就绪时，将第一只麻醉动物放在加热垫上，头部朝向，并使用装有 26 量针的屏蔽一毫升胰岛素注射器将探针的 100 微升注射到尾静脉中。使用剂量校准器测量针头和注射器中的残余放射性，并记录活性和时间。

然后测量与小型动物 PET CT 成像系统中的带辐射肿瘤的 Fludeoxyglucose 在选定感兴趣区域中的活性。如证明，通过生物发光成像可以证实一个成功的骨髓肿瘤移植。多个动物的串行成像可用于可视化骨髓移植多发性骨髓瘤肿瘤的分布。

此外，光学成像 X 射线分析显示快速和非侵入性测定小鼠骨架内多发性骨髓瘤肿瘤的确切位置和分布。这些被感染的肿瘤细胞产生的生物发光可以连续和非侵入性测量，以评估肿瘤生长的变化。此外，使用mTOR抑制剂Temsirolimus治疗的小鼠的生存情况可以监测，正电子发射和计算断层扫描分析的肿瘤放射性标记氟化物吸收可用于证明特姆西罗利莫斯调节葡萄糖代谢的变化。

执行此过程时，注射细胞 IEV 非常重要。我们发现，如果不将细胞注射到静脉中，在注射部位附近形成非骨髓移植的肿瘤细胞。按照这个程序，其他方法，如免疫组织化学和微CT可用于解决肿瘤对骨骼结构的影响以及骨髓环境的非肿瘤细胞和分子成分的问题。