使用顶空固相微萃取与气相色谱-质谱联用分析黑醋栗果实中的挥发性化合物

这里描述了一个顶空固相微萃取气相色谱平台，用于在成熟的黑醋栗果实中快速、可靠和半自动地进行挥发性鉴定和定量。该技术可用于增加有关水果香气的知识，并选择具有增强风味的品种以进行育种。

改善水果香气是育种计划的主要目标之一。为此，我们需要一种可靠的技术，使我们能够测量水果中的挥发性成分。该技术快速且半自动化，每天最多可测量22个样品。

此外，它相对便宜，需要最少的样品处理。这种方法可以很容易地应用于所有水果品种，例如具有重要经济意义的浆果作物。此外，检测化合物的库大小可以很容易地增加。

首先，将一毫升氯化钠溶液加入含有涉水冷冻样品的五毫升管中。摇动试管，直到样品完全解冻并匀浆。然后在室温下以5， 000次g离心五分钟。

切下1， 000微升移液器吸头的末端，并用它来转移到含有顶空的氯化钠的上清液中。向每个含有顶空文件的样品中加入五微升内标。将封闭的顶部空间文件置于室温下的GC-MS自动采样器中，以进行自动HS-SPME / GC-MS运行，确保生物重复不会放置在自动采样器中的连续位置。

在52摄氏度下预孵育顶空锉育10分钟，以17倍G的搅拌将SPME装置插入小瓶中，将纤维暴露在顶空，并在50摄氏度下进行30分钟的VOC提取，以17倍G的搅拌进行VOC提取.将纤维以无分裂模式在250摄氏度下将纤维引入注射口一分钟以进行挥发性解吸。然后在SPME清洁站中用氮气在250摄氏度下清洁纤维五分钟。使用与离子阱质谱仪耦合的气相色谱仪分析VOC，如检测手稿中所述。

打开原始 GC-MS 配置文件。为了鉴定化合物，请将保留时间、质谱和Kovats线性保留指数与从真实标准品中获得的保留指数进行比较。对于每个商业标准，注释最丰富的质量中的保留时间以对离子进行充电。

然后为每个VOC选择一个特定的M×Z离子。计算每个VOC相对于内标的峰面积，以最大限度地减少仪器变化和强度漂移。对于批量效应校正，将每个样品的VOC峰面积归一化为同一运行中分析的对照样品中的相应峰面积。

通过HS-SPME/GC-MS获得的成熟黑醋栗果实挥发性总离子色谱图谱鉴定了属于酯类、醛类、醇类、酮类、萜烯和呋喃的63种VOCs，该库是为分析浆果果实种类而开发的。观察到的一些最丰富的峰对应于两种单萜，芳樟醇和松油醇，以及两种C6化合物，2-己烯醛和3-己烯醛。从黑色电流剖面获得的质谱与纯商业标准品的光谱进行比较，显示了2-己烯醛和松油醇。

4种不同黑流品种VOC剖面的PCA表明，PC1根据其位置分离样品，因此环境对挥发性含量有强烈影响。使用PC2可以观察到有效的基因型，因为Ben Tirran与其余品种明显分离。芳樟醇和2-己烯醛在4个评估的黑色电流品种中的相对含量证实，芳樟醇含量在波兰普遍高于苏格兰，而2-己烯醛则呈现相反的趋势。

芳樟醇的比例在Ben Tirran品种中最高，在Ben Tron品种中，2-Hexenal的比例最高。重要的是从冷冻材料开始，研磨成细粉，以确保适当的挥发性提取。提取后，应尽快将样品放入自动取样器中。

该方法可以与其他代谢平台相结合，鉴定其它重要的代谢，对于食品的味道或营养价值，培育出具有增强感官特性的品种。