Una strategia per lo studio delle cellule linfoidi produttrici di IL-9 nel modello di infezione da Nippostrongylus brasiliensis
March 3rd, 2023
Le cellule T e ILC2 che esprimono IL-9 sono indotte durante l'infezione da N. brasiliensis , ma la loro caratterizzazione è stata ampiamente trascurata nell'intestino infetto a causa della loro bassa frequenza e cinetica differenziale. Questo protocollo descrive l'isolamento di queste cellule da diversi organi bersaglio e la conferma della loro identità tramite citometria a flusso in diversi stadi di infezione.
Questo protocollo consente l'isolamento e la caratterizzazione di cellule linfoidi che esprimono IL-9 in tessuti non infetti da N. brasiliensis, compreso il taglio infetto che recentemente era tecnicamente invisibile. Questo protocollo fornisce anche un'alternativa per analizzare popolazioni di cellule provenienti da tessuti periferici precedentemente non apprezzati nell'infezione a causa delle difficoltà intrinseche di isolare le cellule da questi siti anatomici. Questo metodo consente lo studio di popolazioni difficili da isolare da N. brasiliensis e potrebbe essere applicato ad altre infezioni da elminti, ampliando la nostra comprensione delle infezioni da anchilostomi nell'uomo. A dimostrare la procedura sarà Ofelia Mu
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Panoramica
Questo protocollo descrive in dettaglio l'isolamento di cellule T e ILC2 che esprimono IL-9 da vari organi bersaglio durante l'infezione da N. brasiliensis. Sottolinea l'importanza di caratterizzare queste cellule, che sono state in gran parte trascurate a causa della loro bassa frequenza e della loro cinetica differenziale.
Componenti principali dello studio
Area della scienza
- Immunologia
- Malattie infettive
- Biologia cellulare
Contesto
- Le cellule T e ILC2 che esprimono IL-9 svolgono un ruolo nelle risposte immunitarie.
- Queste cellule sono indotte durante l'infezione da N. brasiliensis.
- La caratterizzazione di queste cellule è cruciale per comprenderne la funzione.
- La bassa frequenza e la cinetica differenziale complicano il loro studio.
Obiettivo dello studio
- Isolare le cellule T e ILC2 che esprimono IL-9 dai tessuti infetti.
- Confermare l'identità di queste cellule utilizzando la citometria a flusso.
- Investigare le dinamiche di queste cellule in diverse fasi dell'infezione.
Metodi utilizzati
- Isolamento di cellule da vari organi bersaglio.
- Citometria a flusso per l'identificazione delle cellule.
- Analisi della frequenza cellulare e della cinetica durante l'infezione.
- Confronto delle popolazioni cellulari in diverse fasi dell'infezione.
Principali risultati
- Isolamento riuscito di cellule T e ILC2 che esprimono IL-9.
- Caratterizzazione di queste cellule confermata tramite citometria a flusso.
- Osservazioni di cinetica differenziale durante le fasi dell'infezione.
- Incontri sul ruolo di queste cellule nella risposta immunitaria.
Conclusioni
- Le cellule T e ILC2 che esprimono IL-9 sono significative nell'infezione da N. brasiliensis.
- La caratterizzazione di queste cellule può migliorare la comprensione dei meccanismi immunitari.
- Sono necessarie ulteriori ricerche per esplorare i loro ruoli funzionali.
Domande frequenti
Chapters in this video
0:05
Introduction
1:03
Isolation of Mediastinal Lymph Nodes, Lungs, Mesenteric Lymph Node Chains, and Small Intestine
2:37
Preparation of Single-Cell Suspensions from the Small Intestine, Lung, and Lymph Nodes
6:20
Results: Flow Cytometry Analysis and Gating Strategy for the Identification of Th9 Cells and IL-9+ ILC2 Cells
7:48
Conclusion
