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AirID-basierte Proximity-Markierung für Protein-Protein-Interaktion in Pflanzen
 
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AirID-basierte Proximity-Markierung für Protein-Protein-Interaktion in Pflanzen

Article DOI: 10.3791/64428-v 08:36 min September 16th, 2022
September 16th, 2022

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Hier stellen wir ein Schritt-für-Schritt-Protokoll für die Durchführung des Proximity-Labeling-Experiments (PL) in Gurken (Cucumis sativus L.) unter Verwendung AT4G18020 (APRR2)-AirID-Proteins als Modell vor. Die Methode beschreibt die Konstruktion eines Vektors, die Transformation eines Konstrukts durch Agroinfiltration, Biotininfiltration, Proteinextraktion und die Reinigung von Biotin-markierten Proteinen durch Affinitätsreinigungstechnik.

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AirID Proximity Labeling Protein-Protein-Interaktion PL-Ansätze modifizierte Ascorbatperoxidase APEX Escherichia coli Biotin Ligase BirA BioID TurboID Einschränkungen Neuartige Version Pflanzensysteme AT4G18020 (APRR2) Protein Schritt-für-Schritt-Protokoll Vektorkonstruktion Agroinfiltration Biotintransformation Proteinextraktion Affinitätsreinigungstechnik Analyse von PPIs in Pflanzen
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