Fractionnement innovant du tissu adipeux pour transformer la graisse en composants spécialisés

Notre recherche vise à fractionner le tissu adipeux pour créer des composants ciblés et étudier leur effet. La représentation graphique traditionnelle des graisses présente des problèmes tels qu’une absorption imprévisible et des propriétés uniformes. Notre protocole résout ce problème en créant des composants adipeux spécialisés pour des applications ciblées. Notre laboratoire se concentrera sur la façon dont les facteurs externes, tels que les facteurs du patient et l’environnement chirurgical, affectent la transplantation de composants adipeux.

[Narrateur] Pour commencer, laissez la graisse recueillie placée dans une seringue de 60 millilitres sans être dérangée pendant 10 minutes pour permettre aux composants liquides de se déposer au fond. Jetez soigneusement la portion liquide. Conservez la graisse collectée dans la seringue de 60 millilitres et centrifugez-la à 1 200 G pendant trois minutes à température ambiante pour stratifier davantage les composants, Après centrifugation, jetez à nouveau la partie liquide au fond et conservez la couche de graisse supérieure maintenant définie comme graisse Coleman. Maintenant, transférez les deux tiers supérieurs de la graisse Coleman dans une seringue de 60 millilitres, en la définissant comme une graisse de faible densité. Ensuite, transférez le tiers inférieur restant dans une autre seringue de 60 millilitres, en le définissant comme une graisse à haute densité. Pour la préparation de complexes de matrice adipeuse, passez la graisse à haute densité à travers un dispositif de filtrage avec un manchon et trois tamis internes espacés de 1,5 millimètre. Récupérez le tissu attaché et déshydratez-le dans un sac filtrant de 100 mailles enveloppé dans de la gaze. À l’aide d’une pince, déterminez que la déshydratation est complète lorsqu’aucune gouttelette visible ne tombe du tissu lors du soulèvement. Définir le produit final comme un complexe de matrice adipeuse. Pour l’extraction en gel de fraction vasculaire stromale, émulsionnez mécaniquement la graisse de faible densité en la faisant passer entre deux seringues, reliées par un connecteur de verrouillage de leurre femelle à femelle d’un diamètre interne de 1,4 millimètre à raison de 10 millilitres par seconde pendant une minute. Centrifugez la graisse émulsionnée de faible densité à 1 600 G pendant trois minutes et collectez la couche intermédiaire semblable à un gel sous forme de gel de fraction vasculaire stromale. Pour la production de fragments de collagène adipeux, pulvérisez la graisse de faible densité à l’aide d’un extracteur spécialisé à 30 000 tours par minute pendant 60 secondes pour obtenir une suspension de graisse. Transférez la suspension de graisse dans une seringue de 20 millilitres et fixez un filtre unidirectionnel de 0,25 millimètre, poussez le piston et récupérez le filtrat dans la deuxième seringue. Ensuite, fixez un filtre unidirectionnel de 0,15 millimètre à la deuxième seringue, poussez à nouveau le piston et recueillez le filtrat final dans une troisième seringue. Enfin, centrifugez la suspension de graisse à 3000 G pendant trois minutes et récupérez la partie solide au fond sous forme de fragment de collagène adipeux. Le composant de la matrice adipeuse, ou AMC, présentait une matrice extracellulaire et une teneur en collagène significativement plus élevées par rapport à la graisse de Coleman, comme le montre la coloration dense dans les images histologiques et de microscopie électronique à balayage, et la teneur en collagène dans l’AMC a été quantifiée à environ 45 % contre environ 15 % dans la masse grasse de Coleman. La coloration de Masson a montré que le collagène était répandu dans tout le champ dans l’ACF, tandis que dans la graisse de Coleman, il était limité aux zones autour des cellules adipeuses. La bio-informatique et l’analyse protéomique de l’ACF ont identifié une grande abondance de protéines membranaires et nucléaires plasmiques et un enrichissement dans le métabolisme et les processus d’organisation du collagène avec une présence prédominante de collagène de types 1, 6 et 4.