Live Cell Imaging von F-Aktin Dynamics über Fluorescent Speckle Microscopy (FSM)

Die Fluoreszenz-Speckle-Mikroskopie wird eingesetzt, um die Dynamik verschiedener Proteine des Zytoskeletts in lebenden Zellen zu untersuchen. Bei richtiger Anwendung können quantitative Messungen der Geschwindigkeits- und Umsatzkinetik von Zytoskelettproteinen durchgeführt werden. Wir beginnen dieses Verfahren, indem wir ein kleines Volumen fluoreszenzmarkierten Aktons in lebende Zellen mikroinjizieren.

Dann bauen wir die Bildgebungskammer zusammen, um die Auswirkungen des Photobleachings zu reduzieren. Die ersten beiden Stücke doppelseitiges Klebeband werden auf beiden Seiten des Mikroobjektträgers platziert, wo unser Zellabdeckschirm aufliegt. Dann wird das bildgebende Medium in die Kammer pipettiert, indem das Medium in der Nähe eines der offenen Schlitze abgegeben wird.