Präzise und Hochdurchsatzanalyse des Bakterienwachstums mit einem Mikroplattenleser

Beginnen Sie mit Bakterien, die in einem Glycerol-Bestand erhalten sind, der zuvor bis zur frühen exponentiellen Phase gezüchtet wurde, um einheitliche physiologische Zustände und reproduzierbares Wachstum zu gewährleisten.

Fügen Sie Wachstumsmedium und einen Wirbel hinzu, um die Bakterien gleichmäßig wieder zu suspendieren.

Die Suspension in Serie mit frischem Medium zu verdünnen, um eine Reihe von Startzelldichten zu erhalten.

Laden Sie die Proben in die inneren Brunnen einer Mehrfachbohrlochplatte und lassen Sie die Randbrunnen mit Blankmaterial gefüllt, um die verdunstungsbedingte Variabilität zu minimieren.

Setzen Sie die Platte in einen Mikroplattenleser, der das ständige Schütteln und eine optimale Temperatur für das Bakterienwachstum ermöglicht.

Mit der Vermehrung der Bakterien steigt die optische Dichte oder OD der Kultur.

Messen Sie den OD in festen Abständen.

Subtrahieren Sie die initialen OD-Werte, die aus den leeren Brunnen erhalten werden, um die Hintergrundabsorption zu korrigieren.

Anschließend wird die Wachstumsrate aus aufeinanderfolgenden OD-Werten berechnet, die in definierten Zeitintervallen gemessen werden, was einen hohen Durchsatz und eine präzise Quantifizierung de