JoVE-Enzyklopädie der Experimente
Mikrobiologie
0 Aufrufe • 2:42 Min. • February 26th, 2026
Beginnen Sie mit einer eingeschläferten Maus, die mit einem antibiotikaresistenten Bakterienstamm infiziert ist und chronische Darminfektionen modelliert.
Legen Sie die Bauchhöhle frei, um Zugang zum Dekum und zur Milz zu bekommen.
Entnehmen Sie das Mürsen- und Milzgewebe, die intestinale und systemische Stellen der bakteriellen Besiedlung darstellen.
Jedes Gewebe wird in ein separates Rohr gelegt, das einen Puffer und eine Stahlperle enthält.
Homogenisieren Sie das Gewebe, indem Sie die Röhren schnell bewegen, wodurch die Stahlperlen mit dem Gewebe kollidieren, es abbauen und Bakterien in die Suspension freisetzen.
Führen Sie serielle Verdünnungen der Homogenate im Puffer durch, um die bakterielle Konzentration zu reduzieren.
Plattenaliquoten aus jeder Verdünnung auf Nährstoffagar mit einem Antibiotikum ergänzt, um antibiotikaresistente Bakterien selektiv zu gewinnen.
Inkubieren Sie die Platten, damit lebensfähige Bakterien in Kolonien wachsen können.
Zählen Sie die Kolonien, um die Anzahl lebensfähiger Bakterien pro Gramm Gewebe zu schätzen, und vergleichen Sie die Bakterienbelastung im Äkum und in der Milz.
Zuerst setzen Sie 2 Milliliter-Safe-Lock-Mikroröhren mit rundem Boden aus, fügen
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