Ein In-vitro-Assay zur Untersuchung der Interaktion zwischen Neutrophilen und Biofilm

Ein Biofilm ist eine Gemeinschaft von oberflächenhaftenden Bakterien, die in eine Matrix aus extrazellulären polymeren Substanzen, EPS, mikrobiellen Ursprungs eingebettet sind.

Um die Wechselwirkungen zwischen Immunzellen und Biofilmen in vitro zu untersuchen, nehmen Sie einen Objektträger mit einem Kanal, der einen Biofilm von Staphylococcus aureus enthält – einem opportunistischen Krankheitserreger. Die gentechnisch veränderten Bakterien exprimieren ein fluoreszierendes Protein für den mikroskopischen Nachweis. Der Kanal ist mit Behältern verbunden, die mit Medien gefüllt sind, um die Bakterien mit Nährstoffen zu versorgen.

Fügen Sie eine Suspension von Neutrophilen hinzu, die mit einem fluoreszierenden Zellverfolgungsfarbstoff markiert ist. Das Medium enthält auch ein Ethidium-Homodimer, das die DNA der abgestorbenen Zellen färbt. Unter physiologischen Bedingungen inkubieren.

Die Mustererkennungsrezeptoren auf Neutrophilen binden an die Erreger-assoziierten molekularen Muster auf den Bakterien. Die Bindung veranlasst Neutrophile, die Bakterien zu phagozytieren und extrazelluläre reaktive Sauerstoffspezies oder ROSs zu produzieren, die die Bakterien abtöten.

Um der Immunantwort z