Induktion einer experimentellen autoimmunen Enzephalomyelitis im Mausmodell

Nehmen Sie eine adjuvante Emulsion, die Myelin, Oligodendrozyten, Glykoproteine oder MOGs – ein Nervenmyelinscheidenprotein – und inaktiviertes Mycobacterium tuberculosis enthält. Injizieren Sie es subkutan in den Rücken der Maus.

Als nächstes injizieren Sie intraperitoneal von Bakterien abgeleitete Exotoxine, die die Blut-Hirn-Schranke stören.

Das subkutan injizierte Mycobacterium ahmt eine lokale Infektion nach und zieht Immunzellen an, einschließlich Antigen-präsentierende Zellen oder APCs.

APCs interagieren mit MOGs, verarbeiten sie und präsentieren sie auf den wichtigsten Histokompatibilitätskomplexen, MHCs.

Aktivierte APCs wandern in die Lymphknoten, wo T-Zellen mit APCs interagieren und zu autoreaktiven T-Zellen werden.

Diese T-Zellen gelangen in den Blutkreislauf, überqueren die Barriere und infiltrieren das zentrale Nervensystem, das ZNS.

Im ZNS interagieren autoreaktive T-Zellen mit MOG-exprimierenden Zellen und fördern so die Infiltration von Immunzellen.

Infiltrierte Monozyten differenzieren sich zu Makrophagen, die entzündliche Zytokine und reaktive Sauerstoffspezies freisetzen, die den Zelltod der myelinproduzierenden Oligodendrozyten verursachen.

B-Zellen interagieren mit autoreaktiven T-Zellen, differenzieren sich zu Plasmazellen und sezernieren Autoantikörper gegen MOG, was zum Abbau der Myelinscheide führt.

Die Demyelinisierung beeinträchtigt die Signalübertragung der Nerven und führt zu einer autoimmunen Enzephalomyelitis.

Beginnen Sie mit der subkutanen Injektion von 200 Mikrogramm Myelin-Oligodendrozyten-Glykoprotein an 10 bis 13 Wochen alte weibliche Mäuse, emulgiert in 200 Mikrolitern des vollständigen Freund-Adjuvans, das 400 Mikrogramm Mycobacterium tuberculosis enthält. Sofort und 24 Stunden später injizierten Sie den Mäusen intraperitoneal 0,2 Mikrogramm Pertussis-Toxin in 200 Mikroliter PBS.

Es ist wichtig, dass die Mäuse vor der Induktion sowohl an die Handhabung als auch an die Versuchsumgebung angepasst wurden, um Stress zu vermeiden, der die Entwicklung klinischer Symptome verhindern kann.

Eine Woche nach der Injektion untersuchen Sie die Mäuse täglich auf klinische Symptome, wie in der Tabelle beschrieben.