Name: Titel der Verkapselung von Zellen durch Tröpfchen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-10-01T13:09:54.000+00:00
Duration: 13 min 10 s
Description: Erfahren Sie die Zellverkapselung durch Tröpfchenausstoß für 3D-Bioprinting und Gewebetechnik. Diese Methode nutzt Magnetventile und Druckluft zur präzisen Zellpositionierung und unterstützt die Entwicklung komplexer Zellstrukturen.

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NIH3T3-Zellen der Zubereitung: A. Zellen für Ejection <ol><li> Trypsinize Zellen, dann verdünnt 1:1 mit Zell-Medien und Übertragung von einem T75 Kolben in ein 15 ml Falcon-Röhrchen </li><li> Spin down-Zellen zu einem Pellet durch Zentrifugation, Absaugen des Überstandes und waschen Sie die Zellen mit DPBS </li><li> Spin down-Zellen zu einem Pellet erneut, und saugen Überstand </li><li> Die Zellen in den Medien </li><li> Bestimmen Sie die Zelldichte mit Zählkammer (~ 200 X 10 4 Zellen / ml pro Flasche T75) </li><li> Zentrifugenzelle Lösung absaugen Überstand und resuspendieren in entsprechender Höhe von Medien für unterschiedliche Zell-Konzentrationen </li></ol> B. Zell-Ausstoß <ol><li> Vortex-Zellen, bevor Sie zum Auswerfen </li><li> Transfer-200 ul der Zell-Lösung in die Spritze </li><li> Festlegen geeigneter Modus Impulsgeber <ol><li> Zum Auswerfen einzelner Tropfen und mehrere Tröpfchen (Bursts), setzen Impulsgeber zu &quot;E. BUR&quot;-Modus </li><li> Für die kontinuierliche Tröpfchenausstoß setzen Impulsgeber auf &quot;NORM&quot;-Modus </li></ol></li><li> Ändern Signal-Einstellungen <ol><li> Set hohen und niedrigen Ausgangsspannung: HIL bis 5 V und LOL auf 0 V und sicherstellen, dass die &quot;LIM&quot; LED ist an </li><li> Set-Signal als Rechteckimpuls </li><li> Ändern Sie die Höhe der Zeit das Magnetventil ist offen für Tröpfchenausstoß indem Sie den Wert für &quot;WID&quot; oder Ändern Einschaltdauer (&quot;Pflicht&quot;) </li><li> Ändern Sie die Frequenz eines Rückschlags indem Sie den Wert für &quot;PRO&quot; </li><li> Ändern Sie die Anzahl der Tropfen in einem Ausbruch, indem der Wert für &quot;BUR&quot; ausgeworfen </li></ol></li><li> Eject Zelle Lösung auf den vorbereiteten Untergrund für die Bildgebung mit Mikroskop </li></ol> C. Färbung <ol><li> Make up Farbstofflösung mit 0,5 ul Calcein-AM und 2 ul Ethidium Homodimer pro ml DPBS </li><li> Tauchen vorbereiteten Untergrund in Farbstofflösung </li><li> Lassen Sie Probe für 10 Minuten bei 37 ° C inkubieren, bevor Bildgebung </li></ol> Experiment Validation <ol><li> Auf einem Nikon Eclipse TE-2000 U Fluoreszenzmikroskop <ol><li> Spot fortschrittliche Software (Diagnostics, Inc.) </li><li> Live / Dead Assay </li></ol></li></ol>

Die Autoren haben nichts offenzulegen.

<table><tbody><tr><td>Fluoreszenzmikroskop</td><td></td><td>Nikon Instruments</td><td>Eclipse TE-2000 U</td><td></td></tr><tr><td>Zellen-Auswurfvorrichtung mit Magnetventil</td><td></td><td></td><td></td><td>Betriebsfrequenz: 1 kHz, 30 psi, 50 nl bis 0,5 µl. 12-V-Ventiltreiber: 2,5 A Ansteuerstrom</td></tr><tr><td>5-Gallonen-tragbarer Lufttank</td><td></td><td>Coleman</td><td>Powermate CT5</td><td>Druckluft: 30 psi</td></tr><tr><td>Druckregler</td><td></td><td>Marsh Bellofram</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pulsgenerator</td><td></td><td></td><td>HP8112A</td><td>Erzeugung der Ansteuerfrequenz: 50 MHz</td></tr><tr><td>XYZ-Stage</td><td></td><td>Newmark Systems</td><td></td><td>Mit Schrittmotor: xy-Stage mit 6-Zoll-Verfahrweg (NLS4-6-25), z-Stage mit 2,5-Zoll-Verfahrweg (NLS4-2.5-25), 3-Achsen-Controller (NSC-G3), 0,1-µm-Auflösung</td></tr><tr><td>NIH 3T3</td><td>Zelllinie</td><td></td><td></td><td>Fibroblasten</td></tr><tr><td>Trypsin</td><td></td><td></td><td></td><td>0,05%-ige Lösung</td></tr><tr><td>NIH-3T3-Zellmedium</td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>DPBS</td><td>Puffer</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>T75</td><td></td><td></td><td></td><td>Gewebekulturgefäße</td></tr><tr><td>Kunststoff-konische Röhrchen</td><td></td><td></td><td></td><td>15 ml, für Gewebekultur</td></tr></tbody></table>

titel der verkapselung von zellen durch tröpfchen

Title Cell Encapsulation by Droplets

Titel der Verkapselung von Zellen durch Tröpfchen

Mein Name ist Hang Moon. Ich arbeite mit dem Professor für Kondome zusammen. Er und ich arbeiten mit dem XYJ-Stage, um eine 3D-Struktur einer Zelle herzustellen.Hallo, ich bin PE und Lynn und arbeite am Zell-Druck-Projekt mit Zell-Einschluss sowie Medium und Gele. Dies ist ein Magnetventil zur Ausstoßung einer Zelle und einer Zellmischung über das Zellmedium. Das Magnetventil wird durch zwei Signalleitungen aktiviert.Die Signalleitung stammt von hier aus einer Trockenplatine. Das Signal kommt von hier. Jene Leitung, die durch diese Leitung führt, ist der Funktionsgenerator erster Ordnung.Als Erstes wird durch unsere programmierte Methode erzeugt. Wenn Sie also möchten, können Sie die Brieftasche ändern, indem Sie das Programm mit der entsprechenden Schaltzeile ändern oder den Prozessgenerator am Computer steuern. Das zelluläre Ventil wird durch ein elektrisches Signal geöffnet und geschlossen, aber die Zelle wird über diese Leitung versorgt.Die Zelle und das Medium oder Agar-Gel werden über Spritzen zugeführt. Die Spritzen befinden sich im Wasser, und der Druck in der Spritze wird durch Luft erzeugt. Die Druckluft wird aus einem Tank über eine Leitung zugeführt.Die kleine Leitung u

Research

Forschung

JoVE Journal

Biology

Biologie

Wir präsentieren Protokolle für die 3-dimensionale (3D) Verkapselung von Zellen innerhalb synthetischen Hydrogelen. Die Kapselung Verfahren ist für zwei häufig verwendete Methoden der Vernetzung (Michael-Addition und Licht-initiierte radikalische Mechanismen), sowie eine Reihe von Techniken für die Beurteilung der eingekapselten Zellen Verhalten skizziert.

Cellular Encapsulation in 3D Hydrogele für Tissue Engineering

Das Kombinieren der monodispersen Tropfenerzeugung mit Beschleunigungssensoren Anordnung von Zellen und Partikeln, beschreiben wir ein Verfahren, um eine gewünschte Anzahl von Zellen oder Teilchen in einem einzelnen Tropfen mit kHz Preise zu kapseln. Wir demonstrieren die Effizienz zweimal höher sind als die von ungeordneten Kapselung für Single-und Double-Teilchen-Tropfen.

High-Throughput-Einzel-Zell-und Multiple-Zelle Mikroverkapselung

Dieses Video demonstriert eine Technik zur Immunfärbung von Zellen, die in einem 3D-Hydrogel eingekapselt sind. Die Hydrogelkultur, die neurale Vorläuferzellen enthält, wird fixiert, permeabilisiert und mit einer Blockierungslösung behandelt, um eine unspezifische Immunfärbung zu verhindern. Ein primärer Antikörpercocktail wird zugegeben, um spezifische Proteine zu binden, gefolgt von fluoreszenzmarkierten Sekundärantikörpern und einer Kernfärbung. Die Probe wird dann auf einen Objektträger...

Immunfärbung von Zellen, die in einem 3D-Hydrogel-System verkapselt sind

Dieses Video und Manuskript beschreiben ein Emulsions-basiertes Verfahren zur Einkapselung von Säugetierzellen in 0,5% bis 10% Alginatperlen, die in großen Chargen unter Verwendung eines einfachen Rührkessels hergestellt werden können. Die eingekapselten Zellen können in vitro kultiviert oder für zelluläre Therapieanwendungen transplantiert werden.

Säugetierzellverkapselung in Alginatperlen unter Verwendung eines einfachen gerafften Gefäßes

Dieser Artikel stellt ein Protokoll für die Aussaat knappe Bevölkerung der Zellen mittels Pipettenspitzen Tröpfchen mikrofluidischen Geräten um höhere Effizienz der Kapselung von Zellen in Tröpfchen zu bieten.

Eine Pipettenspitze basierte Methode für das Seeding Zellen Tröpfchen mikrofluidischen Plattformen

Hier wird ein Protokoll zur Verwendung von Alginat als Polymer bei der Mikroverkapselung von verewigten Zellen zur langfristigen Lieferung von Biologika an Nagetieraugen vorgestellt.

Gekapselte Zelltechnologie für die Lieferung von Biologika an das Mausauge

Wasser-in-Öl-Tröpfchen-Assays sind nützlich für die analytische Chemie, die Enzymevolution und die Einzelzellanalyse, erfordern jedoch typischerweise Mikrofluidik, um die Tröpfchen zu bilden. Hier beschreiben wir die Partikel-Template-Emulgierung, einen mikrofluidikfreien Ansatz zur Durchführung von Tröpfchenassays.

Partikel-Template-Emulgierung ermöglicht mikrofluidsäurefreie Tröpfchen-Assays

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Dieser Artikel stellt eine einfache Methode zur schnellen Herstellung von riesigen unilamellären Vesikeln mit verkapselten zytoskelettalen Proteinen vor. Die Methode erweist sich als nützlich für die Bottom-up-Rekonstitution von Zytoskelettstrukturen in Enstrikt- und Zytoskelett-Membran-Interaktionen.

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Erfahren Sie die Zellverkapselung durch Tröpfchenausstoß für 3D-Bioprinting und Gewebetechnik. Diese Methode nutzt Magnetventile und Druckluft zur präzisen Zellpositionierung und unterstützt die Entwicklung komplexer Zellstrukturen.

Titel der Verkapselung von Zellen durch Tröpfchen

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