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DOI: 10.3791/53080-v
Mariateresa Tedesco1, Monica Frega1,2, Sergio Martinoia1, Mattia Pesce3, Paolo Massobrio1
1Department of Informatics, Bioengineering, Robotics and System Engineering (DIBRIS),University of Genova, 2Donders Institute for Brain, Cognition and Behaviour, Department of Cognitive Neuroscience,Radboud University Medical Center, 3Fondazione Istituto Italiano di Tecnologia (IIT)
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study presents a novel experimental model that integrates 3D neuronal cultures with planar Micro-Electrode Arrays (MEAs). Neurons are seeded in a scaffold of glass microbeads, allowing them to grow and form interconnected 3D structures.
In dieser Arbeit wird ein neuartiges experimentelles Modell, in dem 3D-Neuronenkulturen an planare Mikroelektrodenarrays (MEAs) gekoppelt sind, presented. 3D Netzwerke aufgebaut werden, indem Neuronen in ein Gerüst aus Glasmikrokügelchen eingepflanzt werden, auf dem Neuronen wachsen und miteinander verbundene 3D-Strukturen bilden.
Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, ein neuartiges Modell von in vitro dreidimensionalen neuronalen Netzwerken zu präsentieren, die an Mikroelektrodenarrays gekoppelt sind. Dies wird erreicht, indem zunächst der zentrale Teil des MEA mit einer gemischten Lösung aus Poly-de-Lysin und Laminin konditioniert wird, dann die Mikrokügelchen mit Adhäsionsproteinen, Laminin und Polylysin überzogen werden. Der zweite Schritt besteht darin, die Suspension der behandelten Mikrokügelchen auf eine Multi-Well-Platte zu verteilen, wo sie sich selbst zusammensetzen und eine gleichmäßige Schicht bilden.
Der dritte Schritt des Verfahrens besteht darin, die Zellen mit einer Dichte von 2000 Zellen pro Quadratmillimeter auf die aktive Fläche des MEA aufzuplättieren, um neuronale 2D-Netzwerke zu erzeugen. Sechs bis acht Stunden nach der Beschichtung wird die Suspension von den Multi-Well-Platten auf die MEA übertragen und die Mikrokügelchen können sich in einer hexagonalen, kompakten Struktur selbst zusammensetzen. Letztendlich wird die konfokale Mikroskopie verwendet, um die 3D-Netzwerke zu visualisieren, die mit den herkömmlichen neuronalen 2D-Netzwerken verglichen werden, die über MEA gewachsen sind.
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