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DOI: 10.3791/65856-v
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This study presents a protocol for the efficient production of 3D-bioprinted cocultures of iPSC-derived neurons and astrocytes within hydrogel scaffolds. The developed model operates in 96- or 384-well formats and demonstrates high post-print viability and neurite outgrowth within seven days, while expressing maturity markers for both cell types. This approach aims to enhance the throughput and automation of 3D cell culture systems.
In dieser Arbeit stellen wir ein Protokoll zur Herstellung von 3D-biogedruckten Kokulturen von iPSC-abgeleiteten Neuronen und Astrozyten vor. Dieses Kokulturmodell, das in einem Hydrogel-Gerüst im 96- oder 384-Well-Format erzeugt wurde, zeigt eine hohe Post-Print-Viabilität und ein Neuritenwachstum innerhalb von 7 Tagen und zeigt die Expression von Reifemarkern für beide Zelltypen.
Die 3D-Zellmodellierung ist ein neuartiges Feld, das in den letzten zehn Jahren exponentiell gewachsen ist. Es hat sich gezeigt, dass diese Modelle sowohl das neuronale Wachstum erleichtern als auch Krankheitsphänotypen genauer darstellen. Wir glauben jedoch, dass es eine Verschiebung hin zu einem höheren Durchsatz dieser Modelle und eine Notwendigkeit gibt, die Automatisierung in die Entwicklung einzubeziehen.
Herkömmliche Methoden zur Entwicklung von 3D-Kulturen können mühsam und zeitaufwändig sein, aber der 3D-Biodruck ist eine Technologie, die angewendet werden kann, um diese Entwicklungsprozesse zu skalieren. Diese Technologie ermöglicht es, Hunderte von identischen Modellen effizient und ohne menschliche Fehler zu erstellen. Dieses Protokoll entwickelt komplexe Kulturen, da die Nervenzellen in 3D in biologisch aktiven Hydrogel-Matrizen gezüchtet werden.
Entscheidend ist jedoch, dass dieses Protokoll Geschwindigkeit und Bequemlichkeit bei der Modellentwicklung in den Vordergrund stellt, was in diesem Bereich fehlen kann und die Implementierung in die Industrie behindern kann. Dieses Protokoll definiert eine Methode, um viele 3D-Cokulturen sehr effizient und mit begrenztem Input von Benutzern zu etablieren. Wir hoffen, dass dies Hindernisse für die Verwendung komplexer Zellkulturmodelle in Hochdurchsatz-Assays beseitigen und die weitere Untersuchung der Wirkung von 3D-Kulturen auf neuronale Zelltypen erleichtern wird.
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