Name: Neuromuskuläre Synapse Messfunktionalität (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-08-06T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 40 s
Description: Lernen Sie die Messung der neuromuskulären Synapsenfunktionalität mit ex vivo Muskel-Nerven-Präparationen. Diese Methode ermöglicht die Bewertung der neuromuskulären Übertragung durch direkte und indirekte Stimulation.

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Arbeit im Labor der Autoren wurde unterstützt von Fondazione Roma und Telethon (keine zu gewähren. GGP14066).

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<li>Dobrowolny, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skeletal+Muscle+Is+a+Primary+Target+of+SOD1G93A-Mediated+Toxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metab%22%5BJournal%5D)">Skeletal Muscle Is a Primary Target of SOD1G93A-Mediated Toxicity.</a> Cell Metab. 8 (5), 425-436 (2008).</li>
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<li>Sieck, D. C., Zhan, W. Z., Fang, Y. H., Ermilov, L. G., Sieck, G. C., Mantilla, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure-activity+relationships+in+rodent+diaphragm+muscle+fibers+vs.+neuromuscular+junctions%5BTitle%5D)+AND+%22Respir+Physiol+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Structure-activity relationships in rodent diaphragm muscle fibers vs. neuromuscular junctions.</a> Respir Physiol Neurobiol. 180 (1), 88-96 (2012).</li>
<li>Van Lunteren, E., Moyer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+DAP+on+diaphragm+force+and+fatigue%2C+including+fatigue+due+to+neurotransmission+failure%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Effects of DAP on diaphragm force and fatigue, including fatigue due to neurotransmission failure.</a> J Appl Physiol. 81 (5), 2214-2220 (1996).</li>
<li>Van Lunteren, E., Moyer, M., Kaminski, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adverse+effects+of+myasthenia+gravis+on+rat+phrenic+diaphragm+contractile+performance%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol%22%5BJournal%5D)">Adverse effects of myasthenia gravis on rat phrenic diaphragm contractile performance.</a> J Appl Physiol. 97 (3), 895-901 (2004).</li>
<li>Lee, Y., Mikesh, M., Smith, I., Rimer, M., Thompson, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscles+in+a+mouse+model+of+spinal+muscular+atrophy+show+profound+defects+in+neuromuscular+development+even+in+the+absence+of+failure+in+neuromuscular+transmission+or+loss+of+motor+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Muscles in a mouse model of spinal muscular atrophy show profound defects in neuromuscular development even in the absence of failure in neuromuscular transmission or loss of motor neurons.</a> Dev Biol. 356 (2), 432-444 (2011).</li>
<li>Personius, K. E., Sawyer, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variability+and+failure+of+neurotransmission+in+the+diaphragm+of+mdx+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Neuromuscular+Disord%22%5BJournal%5D)">Variability and failure of neurotransmission in the diaphragm of mdx mice.</a> Neuromuscular Disord. 16 (3), 168-177 (2006).</li>
<li>Röder, I. V., Petersen, Y., Choi, K. R., Witzemann, V., Hammer, J. A., Rudolf, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+myosin+Va+in+the+plasticity+of+the+vertebrate+neuromuscular+junction+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Role of myosin Va in the plasticity of the vertebrate neuromuscular junction in vivo.</a> PLoS ONE. 3 (12), e3871(2008).</li>
<li>Chevessier, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+model+for+congenital+myasthenic+syndrome+due+to+MuSK+mutations+reveals+defects+in+structure+and+function+of+neuromuscular+junctions%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Mol+Genet%22%5BJournal%5D)">A mouse model for congenital myasthenic syndrome due to MuSK mutations reveals defects in structure and function of neuromuscular junctions.</a> Hum Mol Genet. 17 (22), 3577-3595 (2008).</li>
<li>Farchi, N., Soreq, H., Hochner, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+acetylcholinesterase+overexpression+induces+multilevelled+aberrations+in+mouse+neuromuscular+physiology%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Chronic acetylcholinesterase overexpression induces multilevelled aberrations in mouse neuromuscular physiology.</a> J Physiol. 546 (1), 165-173 (2002).</li>
<li>Kuei, J. H., Shadmehr, R., Sieck, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relative+contribution+of+neurotransmission+failure+to+diaphragm+fatigue%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol+%28Bethesda%2C+Md%3A+1985%29%22%5BJournal%5D)">Relative contribution of neurotransmission failure to diaphragm fatigue.</a> J Appl Physiol (Bethesda, Md: 1985). 68 (1), 174-180 (1990).</li>
<li>Del Prete, Z., Musarò, A., Rizzuto, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+mechanical+properties%2C+including+isotonic+fatigue%2C+of+fast+and+slow+MLC%2FmIgf-1+transgenic+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">Measuring mechanical properties, including isotonic fatigue, of fast and slow MLC/mIgf-1 transgenic skeletal muscle.</a> Ann Biomed Eng. 36 (7), 1281-1290 (2008).</li>
<li>Lynch, G. S., Hinkle, R. T., Chamberlain, J. S., Brooks, S. V., Faulkner, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Force+and+power+output+of+fast+and+slow+skeletal+muscles+from+mdx+mice+6-28+months+old%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Force and power output of fast and slow skeletal muscles from mdx mice 6-28 months old.</a> J Physiol. 535 (2), 591-600 (2001).</li>
<li>Brooks, S. V., Faulkner, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contractile+properties+of+skeletal+muscles+from+young%2C+adult+and+aged+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Contractile properties of skeletal muscles from young, adult and aged mice.</a> J Physiol. 404, 71-82 (1988).</li>
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<li>Rizzuto, E., Pisu, S., Musar, A., Del Prete, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+Neuromuscular+Junction+Functionality+in+the+SOD1+G93A+Animal+Model+of+Amyotrophic+Lateral+Sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Biomed+Eng+%22%5BJournal%5D)">Measuring Neuromuscular Junction Functionality in the SOD1 G93A Animal Model of Amyotrophic Lateral Sclerosis.</a> Ann Biomed Eng . 43, (2015).</li>
<li>Soliani, L. <a target="_blank" href="http://www.dsa.unipr.it/soliani/soliani.html">Manuale di statistica per la ricerca e la professione statistica univariata e bivariata parametrica e non-parametrica per le discipline ambientali e biologiche</a>. , (2004).</li>
<li>Gurney, M. E., Pu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+neuron+degeneration+in+mice+that+express+a+human+Cu%2CZn+superoxide+dismutase+mutation%5BTitle%5D)+AND+%22Science+%28New+York%2C+N.Y%29%22%5BJournal%5D)">Motor neuron degeneration in mice that express a human Cu,Zn superoxide dismutase mutation.</a> Science (New York, N.Y). 264 (5166), 1772-1775 (1994).</li>
</ol>

Die Autoren haben nichts preisgeben.

Das experimentelle Protokoll beschriebenen bietet eine ideale Möglichkeit Mess-und diskriminieren funktionellen Veränderungen, die direkt in den Muskel oder eingetreten, indirekt auf die neuromuskuläre Synapse-Ebene. Da diese Technik auf eine indirekte Messung der NMJ Funktionalität basiert, kann es verwendet werden, um festzustellen, ob Mängel zu morphologischen Veränderungen oder biochemische Veränderungen zusammenhängt. Im Gegensatz dazu bietet es ein wirksames Mittel zur Feststellung, ob keine morphologische und bioc...

Die neuromuskuläre Synapse (NMJ) ist eine chemische Synapse, die durch die Verbindung zwischen der motorischen Endplatte der Muskelfaser und das Motoneuron Axon terminal gebildet. Die NMJ nachweislich eine entscheidende Rolle zu spielen, wenn die Kommunikation zwischen Muskeln und Nerven beeinträchtigt, wie es bei Alterung oder Amyotrophe Lateralsklerose (ALS). Da Muskeln und Nerven in einer bidirektionalen Weg1,2 kommunizieren, kann NMJ Mängel getrennt vom Muskel Mängel Messen neue Einblicke in ihre pathophysiologischen Zusammenspiel vorsehen. In der Tat kann diese funktionale Bewertung helfen, um zu beurteilen, ob morphologische und biochemische Veränderungen Neurotransmission Signalisierung Funktionalität reduzieren.
Der Vergleich der Muskel kontraktile Antwort hervorgerufen durch Nervenstimulation und die Reaktion des gleichen Muskels hervorgerufen durch direkte Stimulation der seine Membran wurde vorgeschlagen, als eine indirekte Messung der NMJ Funktionalität. In der Tat können keine Unterschiede in den beiden kontraktilen Antworten seit Membran Stimulation von Umgehungsstraßen Neurotransmission Signalisierung, Änderungen in den NMJ zugeschrieben werden. Dieser Ansatz intensiv vorgeschlagen für Ratten3,4,5,6,7wurde, und auch verwendet, um Informationen über Maus-Modelle8,9,10,11,12zu sammeln.
Hier beschreiben wir ausführlich ein Verfahren zur Verbrauchsteuer und zwei Muskel-Nerv-Präparate, d. h. die Soleus-Ischias und Membran-Phrenicus Vorbereitungen zu testen. Mit einem maßgeschneiderten Software, entwickelt wir eine kontinuierliche Testprotokoll, das die Messung verschiedener Parameter kombiniert, die NMJ und Muskel Funktionalität charakterisieren damit eine umfassende Bewertung der NMJ Schaden separat von der Muskel nachgeben. Insbesondere misst das Protokoll Twitch Kraft, die Muskel-Kinetik, die Kraft-Frequenzkurve für direkte und Nerv Stimulationen, die Neurotransmission Fehler13 für eine feuern und tetanische Frequenzen, und die intratetanic Müdigkeit7.

<table><tbody><tr><td>Dual-Mode-Hebelsystem&nbsp;</td><td>Aurora Scientific Inc.</td><td>300B</td><td>Aktuator/Wandler</td></tr><tr><td>Bi-Phasen-Hochleistungsstimulator&nbsp;</td><td>Aurora Scientific Inc.</td><td>701B</td><td>Impulsstimulator (Nerv)</td></tr><tr><td>Zweiphasen-Hochleistungsstimulator&nbsp;</td><td>Aurora Scientific Inc.</td><td>701C</td><td>Pulsstimulator (Muskel)</td></tr><tr><td>In-vitro-Muskelapparat&nbsp;</td><td>Aurora Scientific Inc.</td><td>800A</td><td></td></tr><tr><td>Vorbereitendes Gewebebad</td><td>Radnoti</td><td>158400</td><td></td></tr><tr><td>Monopolare Saugelektrode</td><td>A-M Systems</td><td>573000</td><td>mit einer hausgemachten Referenz&nbsp;</td></tr><tr><td>Oszilloskop&nbsp;</td><td>Tektronix</td><td>TDS2014</td><td></td></tr><tr><td>Stereomikroskop</td><td>Nikon</td><td>SMZ 800</td><td></td></tr><tr><td>Kaltlichtbeleuchtung&nbsp;</td><td>Photonic Optics</td><td>PL 3000</td><td></td></tr><tr><td>Erfassungskarte</td><td>National Instruments</td><td>NI PCIe-6353</td><td></td></tr><tr><td>Anschlussblock</td><td>National Instruments</td><td>NI 2110</td><td></td></tr><tr><td>PC</td><td>AMD Phenom II x4 970</td><td></td><td>Prozessor 3,50 Ghz mit Windows 7</td></tr><tr><td>LabView 2012 Software</td><td>National Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Krebs-Ringer Bikarbonat Puffer&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>K4002&nbsp;</td><td>physiologischer Puffer</td></tr><tr><td>Natriumbicarbonat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S5761&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Calciumchlorid CaCl2</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C4901</td><td>wasserfrei, Pulver, &ge; 97%</td></tr><tr><td>Puffer HEPES</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H3375</td><td>&ge&ge; 99,5% (Titration)</td></tr><tr><td>Schalen 60mm x 15mm</td><td>Falcon</td><td>353004</td><td>Polystyrol</td></tr><tr><td>Silikon</td><td>Sylgard&nbsp;</td><td>184 Silikon&nbsp;</td><td>Elastomer-Kit & nbsp; 0,5 kg.</td></tr><tr><td>Thermostat</td><td>Dennerle</td><td>DigitalDuomat 1200</td><td></td></tr><tr><td>Pumpe</td><td>Newa Mini</td><td>MN 606</td><td>für Aquarium</td></tr><tr><td>Hitzebeständigkeit Thermokabel</td><td>Lucky Reptile</td><td>61403-1</td><td>50/60Hz 50W</td></tr><tr><td>Eimer</td><td>beliebig 10 Liter</td><td></td><td>Polypropylen</td></tr><tr><td>O2 + 5%CO2</td><td>siad</td><td></td><td>Mischgas</td></tr><tr><td>#5 Pinzette&nbsp;</td><td>Fine Science Tools</td><td>11252-20</td><td>2 Stück</td></tr><tr><td>Federschere - 8 mm Klingen</td><td>Fine Science Tools</td><td>15024-10</td><td>Nervenexzision</td></tr><tr><td>Scharfe Schere&nbsp;</td><td>Feine wissenschaftliche Werkzeuge&nbsp;</td><td>14059-11</td><td>Muskelentfernung</td></tr><tr><td>Zarte Schere</td><td>Wagner</td><td>02.06.32</td><td>Außenseite des Tieres</td></tr><tr><td>Student Skalpellgriff #3</td><td>Feinwissenschaftliche Werkzeuge&nbsp;</td><td>91003-12&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Skalpellklingen #10</td><td>Feinwissenschaftliche Werkzeuge&nbsp;</td><td>10010-00</td><td></td></tr><tr><td>Skalpellklingen #11</td><td>Feinwissenschaftliche Werkzeuge&nbsp;</td><td>10011-00</td><td></td></tr><tr><td>Nylondraht & Oslash; 0,16 mm</td><td>beliebig</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

neuromuskuläre synapse messfunktionalität

Measuring Neuromuscular Junction Functionality

Neuromuskuläre Synapse (NMJ) Funktionalität spielt eine zentrale Rolle bei Krankheiten zu studieren, in denen die Kommunikation zwischen Motoneuron und Muskel, wie Altern und Amyotrophe Lateralsklerose (ALS) vorliegt. Hier beschreiben wir ein experimentelles Protokoll, das verwendet werden kann, um NMJ Funktionalität zu messen, durch die Kombination von zwei Arten der elektrischen Stimulation: direkte Muskelstimulation Membran und die Stimulation durch den Nerv. Der Vergleich der Muskel-Reaktion auf diese zwei verschiedenen Stimulationen kann helfen, um zu definieren, auf der Funktionsebene, mögliche Änderungen in den NMJ, die funktionelle Rückgang der Muskulatur führen.
EX vivo Präparate eignen sich für gut kontrollierte Studien. Hier beschreiben wir eine intensive Protokoll um mehrere Parameter des Muskels und NMJ Funktionalität für die Vorbereitung der Soleus-sciatic Nerv und die Membran-Phrenicus Nerv Vorbereitung zu messen. Das Protokoll dauert ca. 60 Minuten und erfolgt ohne Unterbrechung durch eine maßgeschneiderte Software, die die Twitch-Kinetik-Eigenschaften, das Kraft-Frequenz-Verhältnis für Muskeln und Nerven Stimulationen und zwei Parameter spezifisch für NMJ Funktionalität, d.h. Neurotransmission scheitern und intratetanic Müdigkeit misst. Diese Methode wurde verwendet, um Schäden in Soleus und Zwerchfell Muskel-Nerv-Vorbereitungen mit SOD1G93A transgenen Maus, ein experimentelles Modell Alsen, die ubiquitär die mutierten antioxidative Enzym Superoxid-Dismutase 1 (SOD1) overexpresses zu erkennen.

Das Protokoll, die, das wir beschrieben, informiert über funktionelle Denervierung in verschiedenen neuromuskulären Erkrankungen oder Alterung Sarkopenie. Dieses Protokoll kann verwendet werden, um festzustellen, ob (und wenn ja, auf welcher Ebene) Muskel Änderungen sind durch selektive Veränderungen, die im Muskel selbst oder in der neuromuskulären Übertragung auftreten. Die unten angezeigten Daten sind die Ergebnisse der bisherigen Arbeit von unserer Gruppe18, au...

Eine funktionale Bewertung der neuromuskulären Synapse (NMJ) kann wesentliche Informationen über die Kommunikation zwischen Muskeln und Nerven. Hier beschreiben wir ein Protokoll, um die NMJ und Muskel Funktionalität mit zwei verschiedenen Muskel-Nerv-Präparate, d.h. Soleus-Ischias und Membran-Phrenicus umfassend zu bewerten.

Neuromuskuläre Synapse Messfunktionalität

Neuromuscular junction (NMJ) functionality plays a pivotal role when studying diseases in which the communication between motor neuron and muscle is ...

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens besteht darin, die Funktion der neuromuskulären Endplatte mittels eines ex vivo-experimentellen Ansatzes zu untersuchen. Dies wird erreicht, indem die Muskelnerv-Präparation auf zwei Arten stimuliert wird: direkt an der Muskelmembran und über den Nerv. Da die Membranstimulation die neuronale Signalübertragung umgeht, können Unterschiede zwischen den beiden kontraktilen Reaktionen als indirekte Messung der Funktionalität der neuromuskulären Endplatte betrachtet werden.Hier stellen wir dieses Verfahren an der Soleus-Skelettnerv-Präparation vor. Der Muskel wird zusammen mit seinem Nerv disseziert und in ein perfundiertes Gewebekörbchen gegeben. Er wird an einem Kraft- und Längenregler befestigt, und ein Paar Platinelektroden wird parallel zum Muskel angeordnet.Eine gläserne Saugelektrode wird dann nahe an das durchtrennte Nervenende herangeführt. Anschließend wird ein umfassendes Testprotokoll angewendet, um sowohl die neuromuskulare Junction als auch die Muskel-Funktionalität gründlich zu bewerten. Die funktionelle Verbindung zwischen Muskel und Nerv ist entscheidend für beide Teile und die überlebende Fraktion.Im ersten Bereich des Niveaus je

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Die Drosophila Neuromuscular Junction (NMJ) wird als Modell verwendet, um die Morphologie und Funktion von Synapsen zu untersuchen. Dieses Video beschreibt wichtige Merkmale, die Forscher quantifizieren, um das NMJ zu charakterisieren. Das Beispielprotokoll demonstriert eine Software, die in der Lage ist, die Quantifizierung automatisch durchzuführen.

Drosophila Quantifizierung der neuromuskulären Verbindung (NMJ): Eine Methode zur Beurteilung der synaptischen Morphologie und Funktion

Dieses Video zeigt eine in vivo Technik zur Messung des zusammengesetzten Muskelaktionspotentials (CMAP) bei Mäusen. Es beschreibt die Schritte zum Einrichten von Elektroden, zur Stimulation von Neuronen der Vordergliedmaßen, die die Muskelfasern innervieren, und zum Aufzeichnen von Muskelreaktionen. Die Technik beurteilt die neuronale Demyelinisierung und den Verlust funktioneller Neuronen.

Messung des Aktionspotentials von zusammengesetzten Muskeln in der Vordergliedmaßenmuskulatur von Mäusen in vivo

Dieses Video zeigt eine Methode zur Beurteilung funktioneller neuromuskulärer Verbindungen. Mit Hilfe eines Bioreaktors, der Muskelgewebe und Motoneuronen enthält, werden zusammen mit der Fluoreszenzmikroskopie die lichtempfindlichen Kanäle in den Neuronen stimuliert, um elektrische Signale zu erzeugen, was zu Muskelfaserkontraktionen führt.

Beurteilung einer funktionellen neuromuskulären Verbindung durch gleichzeitige optische Stimulation und Videoaufzeichnung

Die neuromuskuläre Verbindung (NMJ) ist in einer Vielzahl von Zuständen verändert, die manchmal in einem synaptischen Versagen gipfeln können. In diesem Bericht werden fluoreszenzmikroskopische Methoden zur Quantifizierung solcher Strukturveränderungen beschrieben.

Der neuromuskulären Synapse: Mess Synapse Größe, Fragmentierung und Veränderungen der synaptischen Protein Dichte Mit der konfokalen Fluoreszenzmikroskopie

Das Protokoll in diesem Dokument beschriebenen verwendet die Maus Levator Auris Longus (LAL) Muskeln, um spontan aufnehmen und Nerv-evozierten postsynaptischen Potenziale (Strom-Klemme) und Ströme (Voltage-Clamp) an der neuromuskulären Synapse. Diese Technik können wichtige Einblicke in die Mechanismen der synaptischen Übertragung unter normalen und Krankheit darstellen.

Levator Auris Longus Prüfungsvorbereitung der Säugetier-neuromuskulären Übertragung unter Spannung Klemme Bedingungen

Die Fähigkeit, neuromuskuläre Verbindungskomponenten genau zu erkennen, ist entscheidend für die Bewertung von Modifikationen in ihrer Architektur aufgrund pathologischer oder Entwicklungsprozesse. Hier präsentieren wir eine vollständige Beschreibung einer einfachen Methode, um qualitativ hochwertige Bilder von neuromuskulären Verbindungen ganzer Mounts zu erhalten, die für quantitative Messungen verwendet werden können.

Dissektion einzelner Skelettmuskelfasern für immunfluoreszierende und morphometrische Analysen von neuromuskulären Verbindungen am ganzen Berg

Wir beschreiben eine Methode zur Erzeugung menschlicher motorischer Einheiten in kommerziell erhältlichen mikrofluidischen Geräten durch Kokulturierung von humanen induzierten pluripotenten Stammzell-abgeleiteten Motoneuronen mit humanen primären Mesoangioblasten-abgeleiteten Myotuben, was zur Bildung funktionell aktiver neuromuskulärer Verbindungen führt.

Erzeugung humanmotorischer Einheiten mit funktionellen neuromuskulären Verbindungen in mikrofluidischen Geräten

Dieses Protokoll beschreibt eine Methode zur morphometrischen Analyse neuromuskulärer Verbindungen durch kombinierte konfokale und STED-Mikroskopie, die zur Quantifizierung pathologischer Veränderungen in Mausmodellen von SMA und ColQ-bezogenen CMS verwendet wird.

Charakterisierung neuromuskulärer Verbindungen bei Mäusen mittels kombinierter konfokaler und hochauflösender Mikroskopie

Wir beschreiben ein reproduzierbares, automatisiertes und unvoreingenommenes Bildgebungssystem zur Charakterisierung der neuromuskulären Verbindungsfunktion unter Verwendung von menschlichem Skelettmuskelgewebe und optogenetischen Motoneuronen. Dieses System ermöglicht die funktionelle Quantifizierung der neuromuskulären Konnektivität im Laufe der Zeit und erkennt eine verminderte neuromuskuläre Funktion, die durch Neurotoxine und Myasthenia gravis Patientenserum verursacht wird.

Engineering und Charakterisierung eines optogenetischen Modells des humanen neuromuskulären Übergangs

Das Protokoll zeigt eine Methode zur Untersuchung der räumlichen Korrelation zwischen den präsynaptischen Terminals, postsynaptischen Rezeptoren und perisynaptischen Schwann-Zellen im medialen Gastrocnemius-Muskel der Ratte unter Verwendung der fluoreszierenden Immunhistochemie mit verschiedenen Biomarkern, nämlich Neurofilament 200, vesikulärem Acetylcholintransporter, Alpha-Bungarotoxin und S100.

Visualisierung der morphologischen Eigenschaften der neuromuskulären Verbindung im Musculus atralis guestrocnemius medialis der Ratte

In dieser Studie demonstrieren wir ein verfeinertes Single Fiber Electromyography (SFEMG)-Protokoll, um in vivo die Übertragung der neuromuskulären Verbindung (NMJ) in Nagetiermodellen zu messen. Es wird ein schrittweiser Ansatz für die SFEMG-Technik beschrieben, um die Quantifizierung der NMJ-Übertragungsvariabilität und des NMJ-Transmissionsversagens im Gastrocnemius-Muskel der Ratte zu ermöglichen.

Stimulierte Einzelfaser-Elektromyographie (SFEMG) zur Beurteilung der Übertragung neuromuskulärer Verbindungen in Nagetiermodellen

Lernen Sie die Messung der neuromuskulären Synapsenfunktionalität mit ex vivo Muskel-Nerven-Präparationen. Diese Methode ermöglicht die Bewertung der neuromuskulären Übertragung durch direkte und indirekte Stimulation.

Neuromuskuläre Synapse Messfunktionalität

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