Name: Eine Methode, um die Wirkung von Umwelteinflüssen auf das Paarungsverhalten zu untersuchen Drosophila melanogaster (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-07-17T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 13 s
Description: Erfahren Sie eine Verhaltensanalyse zur Quantifizierung chemischer Umweltreize auf Paarungsverhalten bei Drosophila melanogaster. Diese Methode ermöglicht die systematische Untersuchung genetischer und umweltbedingter Einflüsse auf reproduktives Verhalten.

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Wir danken der Bloomington Drosophila Stock Center für die Fliegenbestände; C. Gahr, JT Alkema und S. van Hasselt für ihren frühen Versuch, den Druckluft-Assay zu entwickeln; Jasper Bosman für den Rat zum Anbau von Hefe; Und Rezza Azanchi und Joel Levine für die ursprüngliche Entwicklung der Zeitraffer-Überwachung von Drosophila Paarung Verhalten. JA Gorter wurde von einer Neuroscience Research School BCN / NWO Graduate Program Grant unterstützt. Diese Arbeit wurde teilweise von der niederländischen Organisation für wissenschaftliche Forschung (NWO) (Referenz: 821.02.020) an JC Billeter unterstützt.

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Die Autoren haben keine konkurrierenden Interessen zu offenbaren.

Dieses Protokoll beschreibt einen Assay, um das Paarungsverhalten über 24 h zu testen, während kontinuierlich die Umgebungsbedürfnisse kontrolliert werden, dass ein Paarungspaar hypothetisch verwendet wird, um die Paarungsfrequenz zu bestimmen. Es ist möglich, die Gegenfrequenz in Reaktion auf Hefeluft zu erhöhen, die durch ein Druckluftsystem zugeführt wird, wenn das Medium auch Hefe enthält ( 2B ). Zusätzlich kann eine ähnliche Antwort in der Paarungsfrequenz mit einem vereinfachten Nahrungsmittelmedi...

Fortpflanzungsverhalten haben typischerweise hohe Energiekosten, vor allem für Frauen, die größere Gameten produzieren als Männer und müssen sorgfältig die Bedingungen wählen, um ihre sich entwickelnden Nachkommen zu erhöhen. Wegen der Energiekosten ist es nicht verwunderlich, dass die Reproduktion mit den Ernährungsbedingungen verbunden ist. Dies gilt in den meisten, wenn nicht alle Tiere , einschließlich Säugetiere, deren Pubertät durch Unterernährung verzögert werden kann und Sexualtrieb , dessen kann sich negativ durch Nahrungsbeschränkung 1 betroffen sein. Die Reproduktion des genetischen Modellorganismus Drosophila melanogaster wird auch durch Ernährungsbedingungen beeinflusst. Males Gericht auf höherem Niveau in Gegenwart von Lebensmitteln flüchtige 2 , und Frauen sind mehr sexuell empfänglich in Gegenwart von Hefe, ein wichtiger Nährstoff für die Eiproduktion und Nachkommen Überleben 3 , 4 , 5 . DiesEvolutionäre konservierte Reproduktionsreaktion auf Nahrung bietet die Möglichkeit, Mechanismen zu untersuchen, die die Umweltnahrungsmittelverfügbarkeit mit der sexuellen Reproduktion in einem genetisch tragbaren und zeitsparenden Organismus verbinden. In der Tat hat die Arbeit in D. melanogaster den Insulinweg als wichtigen Regulator des Zusammenhangs zwischen Nahrung und Paarungsverhalten verwickelt 6 . Es hat auch gezeigt, dass der Akt der Paarung selbst die Nahrungspräferenz von Weibchen sowie die damit verbundenen chemosensorischen Neuronen 7 , 8 , 9 ändert. Es ist klar, dass Lebensmittel-Cues Reproduktionsverhalten in D. melanogaster beeinflussen . Diese Effekte scheinen vor allem Frauen zu behandeln, speziell diejenigen, die bereits gepaart haben 5 . Um jedoch diese akuten Effekte von Umgebungsbedingungen zu testen, kann der Assay, der klassisch für weibliches Paarungsverhalten verwendet wird,Nicht sehr geeignet wegen der langen Unterbrechungen zwischen Paarung Episoden. In der klassischen Remoting-Assay, eine Jungfrau weiblich erste Kumpel mit einem Mann, und ist sofort isoliert und präsentiert mit einem neuen Mann 24 bis 48 Stunden später. Dieser klassische Assay wurde mit großem Erfolg verwendet, um Komponenten des männlichen Ejakulats zu identifizieren, die das weibliche Verhalten und die weibliche Antwort 12 , 13 , 14 , 15 , 16 , 17 , 18 modifizieren. Der hier vorgestellte kontinuierliche Paarungsassay ist daher eine Ergänzung zu klassischen Paarungsassays, mit denen die akute Wirkung von Umgebungsbedingungen auf das Fortpflanzungsverhalten untersucht werden kann. Mit dem kontinuierlichen Assay für das Paarungsverhalten, das hier erklärt wird, haben wir vorher gezeigt, dass ein Paar Fliegen, die Hefe ausgesetzt sind, sAlltägliche Zeiten über einen 24-Stunden-Beobachtungszeitraum 5 , 19 , 20 , 21 , während Fliegen, die nicht der Nahrung ausgesetzt sind, nur einmal 5 Dieser Befund kann im Lichte eines großen Teils der D. melanogaster- Literatur rätselhaft sein, was darauf hinweist, dass Frauen sich nach einer anfänglichen Paarung (einige in den Ziffern 10 , 11 ) nicht wiederholen. Allerdings kann diese Diskrepanz leicht durch Assay-Bedingungen erklärt werden, wo eine Frau für ein bis mehrere Tage isoliert ist, bevor eine neue Paarungsmöglichkeit zur Verfügung gestellt wird. Wenn das Paar in dieser stundenlangen Beobachtungsperiode nicht passt, wird das Weibchen als nicht empfänglich charakterisiert. Darüber hinaus sollte die hohe Paarungsfrequenz nicht überraschen, da die Daten von wild gefangenen Fliegen zeigen, dass Frauen Spermien von 4 bis 6 Männchen in ihren Speicherorganen enthalten; Also inDass Frauen selbstverständlich mehrmals 22 , 23 . Hier zeigen wir die Verwendung dieses kontinuierlichen zusammenpassenden Assays, um zu enträtseln, wie Fliegen sammeln und kombinieren Informationen über Umgebungsbedingungen, um Paarungsfrequenz zu modulieren. Dieser Assay erlaubt es, eine relativ große Anzahl von Paarungspaaren für genetische Studien zu testen und den Einfluss von flüchtigen und nicht-flüchtigen Umwelt-Cues zu testen. Der Assay läuft typischerweise für 24 h, kann aber auf 48 h verlängert werden, was die Prüfung von Zyklus-Umgebungs-Cues wie dem Hell-Dunkel-Zyklus ermöglicht. Wir zeigen diesen Assay, indem wir den Einfluss von flüchtigen Cues aus einer Hefekultur innerhalb eines Druckluftsystems in Kombination mit der Verfügbarkeit von nicht-flüchtigen Hefe-Nährstoffen in dem Nahrungsmittelsubstrat untersuchen. Das Druckluftsystem pumpt kontinuierlich flüchtige Cues in eine passende Arena, die enthaltenSa-Food-Substrat und ein Test-Paar (dessen Paarungsverhalten überwacht wird). Um die Besonderheiten, durch die die Hefe beeinflusst, zu bestimmen, testen wir eine große flüchtige Verbindung von Hefe, nämlich Essigsäure 24 , in Kombination mit einem Aminosäuregehalt, der dem von Hefe im Nahrungsmittelsubstrat entspricht, in Form von Pepton (Amino Säuren, die aus der enzymatischen Verdauung von tierischen Proteinen gewonnen wurden). Gemeinsam zeigen diese Experimente, wie die Wirkung von Umwelteinflüssen auf das Paarungsverhalten von D. melanogaster mit diesem Assay getestet werden kann.

<table><tbody><tr><td>Schrank</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Küchenschrank aus Edelstahl</td><td>Horecaworld</td><td>7412.0105</td><td></td></tr><tr><td>Weiße LEDs</td><td>Lucky Light</td><td>ll-583wc2c-001</td><td>Kaltweiß, 20 mAmpere und 2 V</td></tr><tr><td>Rote LEDs</td><td>Lucky Ligt</td><td>ll-583vc2c-v1-4da</td><td>Wellenlänge zwischen 625 nm, 20 mAmp und 6 V</td></tr><tr><td>Widerstand</td><td>Royal Ohm</td><td>CFR0W4J0561A50</td><td>560 Ohm, 0,25 W, 250 V und 5 % Toleranz</td></tr><tr><td>Smartphone Belichtungsmesser App</td><td>Patrick Giudicelli</td><td></td><td>Light/Lux Meter FREE, Version 1.1.1</td></tr><tr><td>Powertimer</td><td>Alecto</td><td>TS-121</td><td></td></tr><tr><td>Metallhalterungen</td><td></td><td></td><td>Spitzwinkel 5 x 5 mm, 2 x 5450 und 1 x 1100 mm lang</td></tr><tr><td>Milchglasplatte</td><td></td><td></td><td>1190 x 545 x 5 mm</td></tr><tr><td>Filterpapier Blätter</td><td>LEE-Filter</td><td>220</td><td>Weiß frost</td></tr><tr><td>Kleiner Lüfter</td><td>Nanoxia Deep Quiet</td><td>4260285292828</td><td>80 mm Ultra-Quiet PC-Lüfter, 1200 RPM</td></tr><tr><td>Großer Lüfter</td><td>Nanoxia Deep Silence</td><td>4260285292910</td><td>120 mm Ultra-Quiet PC-Lüfter, 650-1500 U/min Webcam-Kamera</td></tr><tr><td></td><td>Logitech</td><td>950270</td><td>B910 HD WEBCAM OEM, Winkel: 78 Grad, Auflösung: 5-Millionen-Pixel&nbsp; &nbsp;</td></tr><tr><td>Kamerasoftware</td><td>DeskShare</td><td></td><td>Sicherheitsmonitor pro</td></tr><tr><td>Name</td><td><>Unternehmen</td><td>Katalognummer</td><td>Kommentare</td></tr><tr><td>Fliegenaufzucht</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fliegenaufzuchtflaschen</td><td>Flystuff</td><td>32-130</td><td>6oz Drosophila Lager Flasche</td></tr><tr><td>Flypad</td><td>Flystuff</td><td>59-114</td><td></td></tr><tr><td>Wildtyp-Fliegen</td><td></td><td></td><td>Canton-S</td></tr><tr><td>Fliegenaufzuchtfläschchen</td><td>Dominique Dutscher</td><td>789008</td><td>Drosophila Röhren schmal 25x95 mm</td></tr><tr><td>Inkubator</td><td>Sanyo</td><td>MIR-154</td><td></td></tr><tr><td>Magnetische Heizplatte</td><td>Heidolph</td><td>505-20000-00</td><td>MR Hei-Standard</td></tr><tr><td>Agar</td><td>Caldic Zutaten B.V.</td><td>010001.26.0</td><td></td></tr><tr><td>Glukose</td><td>Gezond& wel</td><td>1019155</td><td>Dextrose/Druivensuiker Saccharose</td></tr><tr><td></td><td>Van Gilse</td><td></td><td>Kristallzucker</td></tr><tr><td>Maismehl</td><td>Fliegenzeug</td><td>62-100</td><td></td></tr><tr><td>Weizenkeime</td><td>Gezond& wel</td><td>1017683</td><td></td></tr><tr><td>Sojamehl</td><td></td><td>Fliegenfutter 62-115</td><td></td></tr><tr><td>Melasse</td><td>Fliegenfutter</td><td>62-117</td><td></td></tr><tr><td>Aktive Trockenhefe</td><td>Roter Stern</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tegosept</td><td>Fliegenzeug</td><td>20-258</td><td>100%</td></tr><tr><td>Pepton (Bacto)</td><td>BD</td><td>211677</td><td></td></tr><tr><td>Essigsäure</td><td>Merck</td><td>1000631000</td><td>Glacial, 100% </td></tr><tr><td></td> Kleiner <td>Petriden-Greiner bio-one</td> 627102 <td>35 x 10 mm mit Belüftungsöffnungen</td><td></td></tr> <tr><td>Paraffinfolie</td><td>Bemis NA</td><td></td><td>Parafilm</td></tr><tr><td>Name<</td><td>strong>Firma<</td><td>strong>Katalognummer</td><td>Kommentare</strong</td></tr><tr><td>>strong><Hefe und Druckluft setup</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Big</td><td>petridish Gosselin</td><td>BP140-01</td><td>140 x 20,6 mm</td></tr><tr><td>Reinstwasser</td><td>Millipore Corporation</td><td></td><td>MiliQ</td></tr><tr><td>Hefeextrakt</td><td>BD</td><td>212750</td><td></td></tr><tr><td>Agar (rein)</td><td>BD</td><td>214530</td><td>Bacto</td></tr><tr><td>Glukose (0(+)-Glukosemonohydrat)&nbsp;</td><td>Merck</td><td>18270000004</td><td></td></tr><tr><td>Open Caps</td><td>Schott</td><td>29 240 28&nbsp;</td><td>GL45</td></tr><tr><td>Silikon-Septum</td><td>VWR</td><td>548-0662</td><td></td></tr><tr><td>Schottverschraubungen mit Widerhaken</td><td>Nalgene</td><td>6149-0002</td><td></td></tr><tr><td>Durchmesser großer</td><td></td><td></td> PVC-Schläuche<td>: außen 1,2 cm und innen 0,9 cm</td></tr><tr><td>Durchmesser kleiner PVC-Schläuche</td><td></td><td></td><td>: außen 0,8 cm und innen 0,5 cm</td></tr><tr><td>15 ml Tube</td><td>Falcon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Aquarium Pumpe</td><td>Sera precision</td><td></td><td>sera air 110 plus, AC 220-240 V, 50/60 Hz, 3 W und Druck >100 mbar</td></tr><tr><td>Aktivkohle</td><td>Superfish</td><td>A8040400</td><td>Norit Aktivkohle</td></tr><tr><td>Einweg-Filtereinheit</td><td>Whatman</td><td>10462100</td><td></td></tr><tr><td>Serologische Pipetten</td><td>VWR</td><td>612-1600</td><td></td></tr><tr><td>Spritze</td><td>BD Plastipak</td><td>300013</td><td></td></tr><tr><td>Heißkleber</td><td>Pattex</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Spritzenvorsatzfilter</td><td>Whatman</td><td></td><td>FP 30/Porengröße 0,45 mm CA-S</td></tr><tr><td>Name</td><td>Unternehmen<</td><td>strong>Katalognummer</td><td>Kommentare</strong</td></tr><tr><td>>Analyse</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Statistics Software</td><td>R</td><td></td><td>lme4 Paket</td></tr></tbody></table>

eine methode, um die wirkung von umwelteinflüssen auf das paarungsverhalten zu untersuchen<em&gt; drosophila melanogaster</em

A Method to Test the Effect of Environmental Cues on Mating Behavior in Drosophila melanogaster

Der sexuelle Antrieb eines Individuums wird durch Genotyp, Erfahrung und Umweltbedingungen beeinflusst. Wie diese Faktoren interagieren, um sexuelle Verhaltensweisen zu modulieren, bleibt schlecht verstanden. In Drosophila Melanogaster , Umwelt-Cues, wie die Verfügbarkeit der Lebensmittel, beeinflussen Paarung Aktivität bietet ein traktierbares System, um die Mechanismen zu modulieren sexuelles Verhalten zu untersuchen. In D. melanogaster werden ökologische Hinweise oft über die chemosensorischen Geschmacks- und Geruchsstoffe erkannt. Hier stellen wir eine Methode vor, um die Wirkung von umweltchemischen Stichworten auf das Paarungsverhalten zu testen. Der Assay besteht aus einer kleinen Paarungsarena mit Nahrungsmedium und einem Paarungspaar. Die Paarungsfrequenz für jedes Paar wird kontinuierlich für 24 Stunden überwacht. Hier stellen wir die Anwendbarkeit dieses Assays dar, um Umgebungsverbindungen aus einer externen Quelle durch ein Druckluftsystem zu testen und die Umweltkomponenten direkt in der Paarungsarena zu manipulieren. Das UEin Druckluftsystem ist besonders nützlich, um die Wirkung von sehr flüchtigen Verbindungen zu testen, während die Manipulation von Komponenten direkt in der Paarungsarena von Wert sein kann, um die Anwesenheit einer Verbindung zu ermitteln. Dieser Assay kann angepasst werden, um Fragen über den Einfluss von genetischen und ökologischen Cues auf Paarungsverhalten und Fruchtbarkeit sowie andere männliche und weibliche Fortpflanzungsverhalten zu beantworten.

Mit diesem kontinuierlichen Assay, Paarungsverhalten und Paarungsfrequenz im spezifischen, kann unter experimentellen Umgebungsbedingungen bestimmt werden. Um die Umgebungsbedingungen zu kontrollieren, haben wir einen Edelstahl-Küchenschrank in einen Testbereich mit eigener Lichtquelle und Diffusion verwandelt, der eine hohe Lichtmenge und eine minimale Blendung von der Oberseite der Paarungsarenen gewährleistet ( Abbildung 1A ) . Der innere Testbereich ist komplett aus ...

Wir zeigen einen Assay, um die ökologischen und genetischen Cues zu analysieren, die das Paarungsverhalten in der Fruchtfliege beeinflussen Drosophila melanogaster .

Eine Methode, um die Wirkung von Umwelteinflüssen auf das Paarungsverhalten zu untersuchen<em&gt; Drosophila melanogaster</em

An individual's sexual drive is influenced by genotype, experience and environmental conditions. How these factors interact to modulate sexual behaviors ...

Das übergeordnete Ziel dieses Verhaltensassays besteht darin, den Einfluss von Umweltfaktoren auf Fortpflanzungsverhalten wie Balz und Paarung zu quantifizieren. Diese Methode kann helfen, zentrale Fragen im Bereich der Verhaltensbiologie und der Neurogenetik zu beantworten, beispielsweise welche genetischen und umweltbedingten Faktoren auf das Fortpflanzungsverhalten einwirken und welche Mechanismen dieses Verhalten modulieren.Diese Technik bietet Geschwindigkeit und Flexibilität beim Testen einer breiten Palette von Umweltfaktoren, die die Fortpflanzung beeinflussen, und das bei einer sehr hohen Anzahl von Wiederholungen. Die Durchführung der Methode wird Jenke Gorter, eine Doktorandin aus meinem Labor, demonstrieren.Beginnen Sie das Experiment mit der Herstellung von einem Liter reichhaltigem Fliegenmedium. Geben Sie einen Liter Leitungswasser in einen zwei Liter fassenden Glasbecher mit einem magnetischen Rührstab und stellen Sie den Becher auf eine magnetische Heizplatte.Den Rührer ausgeschaltet lassen und die Temperatur auf 300 Grad Celsius erhöhen, bis die Siedetemperatur erreicht ist. Den Rührer einschalten und auf 500 U/min einstellen, dann die Zutaten dem kochenden Wasser zugeben. Warten, bis die Hefe kräftig schäumt.Danach die Heizplatte auf 120 Grad Celsius herunterregeln. Nach 10 Minuten die Heizplatte auf 30 Grad Celsius absenken und die Mischung unter Rühren abkühlen lassen, bis sie 48 Grad Celsius erreicht hat.Überwachen Sie die Temperatur, indem Sie ein Thermometer direkt in die Nahrung einfügen. Lösen Sie zwei Gramm Tegosept in 10 Milliliter 96 %igem Ethanol auf. Geben Sie das Gemisch und fünf Milliliter einmolarer Propionsäure zu dem Becher hinzu.Rühren Sie drei Minuten lang um. Erhitzen Sie eine Nadel in einem Bunsenbrenner bis zur Rotglut. Stechen Sie ein Loch mit einem Durchmesser von 0,3 Zentimetern auf der Oberseite einer 3,5 Zentimeter mal 1,0 Zentimeter großen Plastik-Petri-Schale. Bei der Zubereitung des Nährmediums mit geruchsbildenden Verbindungen zunächst 30 Mikroliter der gewünschten Verbindung in die Schale pipettieren, und zwar für die Hälfte der Versuchsschalen. Die andere Hälfte der Schalen zur Vergleichszwecken leer lassen. Mit einer fünf Milliliter-sterilen Pipette drei Milliliter Nährmedium einfüllen, sodass der Boden der Schale bedeckt ist.Bedecken Sie es mit einem Mulltuch, um Kontaminationen zu vermeiden, und lassen Sie das Medium eine Stunde lang bei Raumtemperatur erstarren. Anschließend setzen Sie die Deckel auf die Schalen und verschließen diese mit Klebeband an zwei Seiten. Bereiten Sie kleine Parafilm-Stopfen vor, um die Öffnungen der Schalen abzudecken, indem Sie Stücke Parafilm zu etwa 0,2 cm dicken Rollen zusammenrollen.Und schneiden Sie sie dann in Segmente von 0,5 cm Länge. Schneiden Sie zwei kleine Löcher in das Septum, um darin Hahn- und Durchführungsstutzen fest einzusetzen. Bestücken Sie 4,5 cm große Flaschendeckel mit einem 0,32 cm dicken Silikonseptum.Schließen Sie den kleinen PVC-Schlauch an beide Auslässe, die aus der Flasche austreten, und an nur einen der Einlässe, die in die Flasche führen. Anschließend verbinden Sie jedes YPD-Kulturfläschchen über einen Glasrohr mit dem Auslass unter Verwendung kleiner Schläuche. Füllen Sie den Schlauch mit Glasfaser. Und sterilisieren Sie es vor der Verwendung im Autoklaven. Wickeln Sie die passgenauen Verschlüsse und Schläuche in Aluminiumfolie ein. Und sterilisieren Sie sie 25 Minuten lang bei 120 Grad Celsius und einem Bar Druck im Autoklaven.Tauchen Sie eine sterile 100-Mikroliter-Pipettenspitze in eine der Hefe-Kolonien von der YPD-Agarplatte und geben Sie sie in die Flasche mit autoklaviertem YPD-Flüssigmedium. Verschließen Sie diese Flasche mit Hefe und inoculiertem YPD-Flüssigmedium sowie eine YPD-Medium-Kontrollflasche ohne Hefe mit autoklavierten Verschlüssen, die in einer Öffnung befestigt sind. Um eine Kontamination des YPD-Mediums mit Mikroorganismen zu verhindern, verbinden Sie das kleine Schlauchstück mit einem sterilen Spritzenfilter mit einer Porengröße von 0,45 µm, wobei ein kunststoffbeschichteter Steckverbinder am Durchgangsstutzen zum Filter führt.Und eine Schraub-Plastikdurchführungsverbindung, die den Filter verlässt. Anschließend das Schlauchstück mit dem Einlass der YPD-Kulturflasche verbinden. Die Flaschen auf separate magnetische Platten stellen.Und rühren Sie die Lösung vor Versuchsbeginn 24 Stunden lang bei Raumtemperatur mit 100 U/min. Verbinden Sie die Einlässe beider Flaschen mit einem Schlauch, der mit Druckluft verbunden ist. Achten Sie darauf, den Auslass der Flasche mit der Versuchshefe mit einem Schlauch zu verbinden, der den Hefegeruch aus dem Versuchsraum ableitet, um Störungen des Experiments zu vermeiden.Schließen Sie einen PVC-Schlauch an die Auslassseite des Glasrohrs an und führen Sie ihn zu den unteren Öffnungen der Versuchsbox. Verwenden Sie einen T-Verteiler mit einem Außendurchmesser von mindestens 0,5 cm und kurze Stücke aus dünnem PVC-Schlauch, um je zwei serologische Pipetten an die beiden seitlichen Auslässe anzuschließen. Befestigen Sie die Pipetten mit Klebeband flach auf dem weißen Papierblatt unter den Kameras in der Stahlbox. Verwenden Sie eine Mundpipette, um ein experimentelles Weibchen um ZT sechs in eine kleine Petrischale zu geben. Lassen Sie die Fliege eine Stunde lang akklimatisieren, bevor sie in die Kopfungsarena übertragen wird. Nach einer Stunde, um ZT sieben, überführen Sie ein Wildtyp-Männchen in die Petrischale.Und klicken Sie auf „Start Monitoring“ für 24 Stunden. Für das Luftpumpen-Experiment platzieren Sie die Schale so, dass ein Pipettenspitzenausgang mit dem Eingangsloch der Paarungsarena verbunden ist. Um das Paarungsverhalten des Paares zu analysieren, wählen Sie eine Funktion „Alle Bilder öffnen“ in einer Bildbetrachtungssoftware.Blättern Sie chronologisch durch die Aufnahmen. Tragen Sie das Datum, die Versuchsnummer, die Schalennummer und die Startzeit in eine Tabellenzeile ein. Notieren Sie die Startzeit für jedes Beobachtungsareal ab dem Zeitpunkt, zu dem es unter der Webcam positioniert wird.Notieren Sie den Zeitstempel aus den Bildern. Markieren Sie die Startzeit jedes Kopulationsvorgangs in derselben Zeile in der Tabellenkalkulation. Zählen Sie eine Paarung als Ereignis, wenn das Männchen das Weibchen bestiegen hat und das Paar mindestens fünf aufeinanderfolgende Bilder lang weitgehend ruhig bleibt und die Körperhaltung beibehält.Die Analyse von Hefeluft, getrennt für das Nährmedium, zeigt, dass ein Paarungsverhalten nicht auf Hefegerüche reagiert, wenn keine Hefe im Nährmedium vorhanden ist. Allerdings erhöhen sie ihre Paarungshäufigkeit in Hefeluft, wenn Hefe ebenfalls dem Nährmedium zugesetzt wird. Die Weibchenakzeptanz steigt bei Anwesenheit von Essigsäure an. Doch nur, wenn Pepton im Medium vorhanden ist, was zeigt, dass die Fliegen Aminosäuren und Essigsäure gleichzeitig wahrnehmen müssen, um ihre Paarungshäufigkeit zu erhöhen. Sobald die Technik beherrscht ist, kann sie innerhalb von sechs Stunden eingerichtet werden. Und die Verhaltensanalyse kann, wenn sie ordnungsgemäß durchgeführt wird, innerhalb von fünf Stunden durchgeführt werden.

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Research

Forschung

JoVE Journal

Behavior

Verhalten

Drosophila melanogaster ist eine genetisch und auf der Verhaltensebene praktische Zwecke geeigneten Modells, das verwendet wurde, um die molekularen und zellulären Grundlagen von vielen wichtigen biologischen Prozessen seit über einem Jahrhundert ein zu verstehen. Drosophila wurde auch genutzt, um Einblicke in die genetischen Grundlagen der Fliege Verhalten zu gewinnen.

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