Löslichkeit von hydrophoben Verbindungen in wässriger Lösung unter Verwendung von Kombinationen der Montage selbst Peptide und Aminosäuren

Das übergeordnete Ziel dieser Methode ist es, die Löslichkeit von hydrophoben Verbindungen in wässriger Lösung für eine mögliche Verabreichung in klinische Umgebungen zu erhöhen. Diese Methode behebt eine wesentliche Einschränkung im medizinischen Bereich, nämlich die mangelnde Verwendung von hydrophoben Verbindungen im klinischen Umfeld aufgrund ihrer schlechten Löslichkeit in wässrigen Systemen wie dem Blut. Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass hydrophobe Verbindungen in wässrigen Lösungen gelöst werden können, ohne dass toxische Co-Lösungsmittel verwendet werden müssen.

Beschriften Sie zunächst zwei konische 50-Liter-Zentrifugenröhrchen für jede Aminosäure. Bereiten Sie einen großen Zwei-Liter-Kolben mit gereinigtem Wasser vor. Nachdem Sie die Menge jeder Aminosäure für die gewünschten Konzentrationen berechnet haben, wiegen Sie die entsprechenden Mengen an Aminosäuren mit einem Spatel in die jeweiligen Zentrifugenröhrchen.

einer serologischen Pipette werden 40 Milliliter gereinigtes Wasser in jedes Zentrifugenröhrchen gegeben. Nachdem Sie die Röhrchen verschlossen haben, wirbeln Sie die Proben, bis sie sich aufgelöst haben. Wiegen Sie mit einer Hochleistungs-Analysenwaage etwa ein plus oder minus 0,2 Milligramm Peptid in den Boden eines 20-Milliliter-Szintillationsfläschchens.

Notieren Sie das genaue Gewicht des Peptids auf der Kappe und schrauben Sie die Kappe auf das Fläschchen. Als nächstes pipettieren Sie das entsprechende Volumen der Aminosäurelösung in jedes Fläschchen, um die gewünschte Konzentration des selbstorganisierenden Peptids zu erreichen. Beschallen Sie die Proben 10 Minuten lang in einem Wasserbad-Ultraschallgerät bei Raumtemperatur, wobei Sie sicherstellen, dass die Lösungen im Fläschchen vollständig in das Wasserbad eingetaucht sind. Bereiten Sie zwei Konservierungsstoff-Stammlösungen vor, indem Sie ein Milligramm des gewünschten Arzneimittels mit der entsprechenden Menge DMSO und ein weiteres Milligramm des Arzneimittels mit Ethanol kombinieren.

Dann, beide Lösungen 15 Sekunden lang vortexen, um das Medikament vollständig aufzulösen. Markieren Sie anschließend 1,5-Milliliter-Mikrozentrifugenröhrchen für jede Formulierung mit dem selbstorganisierenden Peptid, der Aminosäure und dem Co-Lösungsmittel. Geben Sie 10 Mikroliter der DMSO-Stammlösung des Arzneimittels oder 20 Mikroliter der Ethanol-Stammlösung des Arzneimittels in die entsprechenden Mikrozentrifugenröhrchen.

Als nächstes fügen Sie 990 Mikroliter der selbstorganisierenden Peptid-Aminosäurelösungen zu den Mikrozentrifugenröhrchen hinzu, die die Wirkstoff-DMSO-Stammlösung enthalten. Geben Sie 980 Mikroliter der Peptid-Aminosäurelösungen in die Mikrozentrifugenröhrchen, die die Wirkstoff-Ethanol-Stammlösung enthalten. Wirbeln Sie alle Arzneimittelformulierungen 30 Sekunden lang kräftig ein.

Decken Sie sie dann mit Aluminiumfolie ab und lassen Sie die Formulierungen 30 Minuten einwirken, bevor Sie die Löslichkeit testen. Nach 30 Minuten die Formulierungen 30 Sekunden lang kräftig vortexen. Zentrifugieren Sie dann die Formulierungen eine Minute lang bei 14, 220 mal G.

Nach der Zentrifugation ist der Boden der Mikrozentrifugenröhrchen visuell auf Ausfällung zu untersuchen. Von den 40 Formulierungen, die in dieser Studie getestet wurden, lösten sieben das hydrophobe Medikament Curcumin erfolgreich auf. Durch die Gruppierung der Formulierungen nach Komponenten wurden zwei Haupttrends identifiziert.

Ethanol scheint ein besseres Co-Lösungsmittel zum Auflösen von Curcumin zu sein, und positiv geladene Aminosäuren, Lysin und Arginin scheinen optimale Komponenten zum Auflösen von Curcumin zu sein. Interessant ist die Farbveränderung bei Formulierungen, die Arginin und Lysin enthalten, die zeigen, dass Curcumin im alkalischen Zustand gelöst ist. Sobald diese Technik gemeistert ist, kann sie mit der richtigen Ausrüstung und wenn die Aminosäurelösungen vorher zubereitet werden, in zwei bis drei Stunden durchgeführt werden.

Im Anschluss an dieses Verfahren können lösliche Arzneimittelformulierungen in vitro und in vivo weiter getestet werden, um die biologische Wirksamkeit oder Sicherheit des gelösten Arzneimittels direkt zu beurteilen und zu vergleichen. Nach ihrer Entwicklung ebnete diese Formulierungsmethode den Weg für die In-vivo-Verabreichung eines hydrophoben Stamminhibitors namens PP@for der Prävention akuter Lungenverletzungen. Nachdem Sie sich dieses Video angesehen haben, sollten Sie ein gutes Verständnis dafür haben, wie Sie eine selbstorganisierende Peptid- und Aminosäurekombination anwenden, um ein bestimmtes hydrophobes Medikament aufzulösen.